藥物相關基因單核苷酸多態(tài)性的電化學分析方法研究.pdf

1、單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNP)是被公認的導致基因多樣性與復雜性的重要原因。β1腎上腺素能受體基因（ADRB1）發(fā)生SNP直接影響高血壓患者服用美托洛爾的降壓效應。而維生素K環(huán)氧化物還原酶復合物亞基1（VKORC1）基因發(fā)生SNP與華法林的使用劑量有密切關系。因此，建立全新的SNP分子檢測方法可以更好地掌握針對某種藥物反應性的個體間差異，從而實現(xiàn)個體化治療，降低醫(yī)療風險和醫(yī)療費用。

2、本文通過合成全新的納米材料，用于修飾電化學DNA傳感器，實現(xiàn)了對兩種比較常見的臨床應用藥物相關的SNP的檢測，以期精準指導個體化臨床用藥。研究工作分為以下兩部分：
　　第一章、應用氧化石墨烯/二氧化鈰/鉑納米粒子作為納米信標對β1腎上腺素能受體基因的電化學檢測
　　本實驗構建了一個基于氧化石墨烯/二氧化鈰/鉑納米粒子（GO/CeO2/PtNPs）作為納米信標，金納米粒子/鏈霉親和素（AuNPs/SA）作為電極修飾納米材料形成

3、的 DNA傳感器，用于血清中ADRB1突變特異性檢測。首先以GO為載體，固載了大量的CeO2。接著，在其表面還原了PtNPs，合成了GO/CeO2/PtNPs獲得良好的催化性能。另外，在玻碳電極（GCE）表面沉積一層AuNPs之后修飾SA來連接生物素標記的探針。通過各種條件優(yōu)化，制備的傳感器靈敏度較高，特異性較好，線性范圍較寬，重現(xiàn)性較好。線性范圍為分為兩段：1fM到100fM和100fM到10nM，最低檢測限為0.33fM。此外，加樣

4、回收率在99.4-101.9%之間，說明該傳感器可以應用于血清中ADRB1基因突變的檢測。
　　第二章、應用富勒烯-聚酰胺-胺型樹枝狀高分子-空心鉑作為納米信標對維生素K環(huán)氧化物還原酶復合物亞基1的電化學檢測
　　本實驗構建了一個基于富勒烯-聚酰胺-胺型樹枝狀高分子-空心鉑（C60NPs-PAMAM-PtPNPs）作為納米信標，還原性氧化石墨烯四乙烯五胺/金納米顆粒/鏈霉親和素（rGO-TEPA/AuNPs/SA）作為電極修

5、飾納米材料形成的DNA傳感器，用于血清中VKORC1基因突變的特異性檢測。C60NPs不僅具有氧化還原活性可以作為信號物質，而且還能作為生物分子的載體來固載PtPNPs。因此，我們合成了C60NPs-PAMAM-PtPNPs。在GCE表面修飾rGO-TEPA后再沉積一層AuNPs，接著修飾SA來連接生物素標記的四面體DNA用于捕獲目標DNA。通過條件優(yōu)化，傳感器的靈敏度較高，特異性較好，線性范圍較寬，重現(xiàn)性較好。線性范圍為1pM到10n