新型鉑金屬離子配合物PtPT抗卵巢癌的效應(yīng)及機(jī)制的研究.pdf

1、背景與目的：
　　卵巢癌的死亡率居?jì)D科惡性腫瘤之首，提高惡性卵巢腫瘤患者的生存，特別是上皮性卵巢癌(EDC),尋找鉑類藥物的替代治療上皮性卵巢癌藥物迫在眉睫。近年來(lái)，隨著蛋白酶體抑制劑硼地佐米應(yīng)用于多發(fā)性骨髓瘤及套細(xì)胞淋巴瘤等疾病并取得良好效果，泛素化蛋白酶抑制劑逐漸成為癌癥治療新靶點(diǎn)。在目前的研究中,鉑羥基吡啶硫酮(PtPT),一種新型的鉑金屬離子配合物,可以通過(guò)抑制蛋白酶體功能,在肺癌細(xì)胞及白血病細(xì)胞中表現(xiàn)出比順鉑更大的和更有

2、選擇性細(xì)胞毒性。而且體內(nèi)體外均未表現(xiàn)出顯著的DNA損傷效應(yīng)，引起了我課題組廣泛關(guān)注。在本次課題中，我們發(fā)現(xiàn)PtPT通過(guò)對(duì)泛素蛋白酶體抑制，在體內(nèi)和體外均可一定程度誘導(dǎo) A2780和SKOV3細(xì)胞株的生長(zhǎng)。這些研究為PtPT在上皮性卵巢癌的臨床治療中提供了扎實(shí)的前期基礎(chǔ)，,我們猜想,PtPT可能是治療卵巢癌的極具潛能的新藥物。
　　在課題組前期實(shí)驗(yàn)中，我們以具有良好生物活性的2-巰基吡啶氮氧化物為配體，合成一種具有潛在抗癌活性的新型

3、金屬配合物 PtPT。并在其體內(nèi)外抗肺癌效應(yīng)及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步研究，我們發(fā)現(xiàn)PtPT通過(guò)選擇性的抑制26S蛋白酶體相關(guān)去泛素化酶UCHL5及USP14活性從而選擇性的抑制包括肺癌在內(nèi)的多種惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。而去泛素化酶UCHL5和USP14在卵巢腫瘤中表達(dá)明顯高于正常組織，甚至可作為預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo)之一，因此，我決定進(jìn)一步探討鉑金屬配合物PtPT在卵巢腫瘤治療中的應(yīng)用及相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法與結(jié)果：
　　通過(guò)MTS實(shí)驗(yàn)我們發(fā)

4、現(xiàn)，PtPT可選擇性誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞死亡，并且表現(xiàn)出比順鉑更敏感的腫瘤細(xì)胞殺傷作用，通過(guò)細(xì)胞周期流式檢測(cè)我發(fā)現(xiàn)PtPT可誘發(fā)A2780和SKOV3發(fā)生G2/M周期阻滯，結(jié)合Western bloting檢測(cè)結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)PtPT可誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、線粒體膜電位下降、casepase激活等多種途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)casepase通路抑制劑Z-vad可以大部分逆轉(zhuǎn)PtPT誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，進(jìn)一步表明細(xì)胞凋亡依賴casepase通路

5、激活。我們進(jìn)一步研究了作用機(jī)制，Western Blot結(jié)果顯示 PtPT可誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞泛素化蛋白的聚集，且早于誘導(dǎo)凋亡之前，提示PtPT可能通過(guò)抑制卵巢癌細(xì)胞泛素化蛋白酶體功能從而引起泛素化蛋白的聚集來(lái)發(fā)揮抑制增殖和抗凋亡效應(yīng)。在A2780和SKOV3細(xì)胞裸鼠移植瘤動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn) PtPT既可顯著抑制腫瘤組織的生長(zhǎng)，同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重機(jī)能無(wú)影響。Western Bloting提示PtPT可引起裸鼠卵巢腫瘤中泛素化蛋白表達(dá)