長鏈非編碼RNA ATB對人腦膠質(zhì)瘤細胞惡性生物學特征的影響.pdf

1、目的：
　　采用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)（sh-RNA），敲減膠質(zhì)瘤細胞內(nèi)長鏈非編碼RNA ATB基因后，闡述長鏈非編碼RNA ATB對人腦膠質(zhì)瘤細胞惡性生物學特征的影響。
　　方法：
　　采用Real-time PCR方法檢測79例不同惡性程度人膠質(zhì)瘤組織、15例正常腦組織（來自顱腦損傷術(shù)后患者）、人腦膠質(zhì)瘤細胞系中長鏈非編碼RNA ATB的表達情況。采用sh-RNA技術(shù)構(gòu)建相關(guān)細胞模型，利用細胞增殖計數(shù)法（CCK-8）檢測

2、細胞增殖活力，克隆形成實驗檢測細胞克隆形成能力，劃痕實驗及Transwell方法檢測膠質(zhì)瘤細胞的侵襲能力，我們進一步用體內(nèi)實驗（即裸鼠成瘤實驗）來探究ATB基因在裸鼠體內(nèi)的功能作用，用成瘤組織做Western blot法和免疫組化分別分析成瘤組織中PCNA蛋白和Ki-67蛋白的表達情況,進而檢測成瘤組織增殖能力的情況。觀察并探究長鏈非編碼RNA ATB基因?qū)θ四z質(zhì)瘤細胞惡性生物學行為的影響。
　　結(jié)果：
　　與正常腦組織相比

3、，ATB基因在膠質(zhì)瘤組織以及細胞中均是表達上調(diào)。敲減膠質(zhì)瘤細胞內(nèi)的長鏈非編碼RNA ATB基因后可抑制人腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移及侵襲能力。裸鼠成瘤實驗表明敲減膠質(zhì)瘤細胞內(nèi)的長鏈非編碼RNA ATB基因后，可明顯抑制裸鼠的成瘤能力，包括裸鼠成瘤體積和成瘤重量均小于實驗組，Western blot法和免疫組化結(jié)果表明實驗組中成瘤組織中的PCNA蛋白和Ki-67染色陽性數(shù)目明顯減少,表明實驗組裸鼠成瘤增殖能力明顯低于對照組。
　　結(jié)論