歸芪益元膏對重離子輻射肺損傷大鼠DNA雙鏈斷裂及旁效應(yīng)的影響.pdf

1、目的：通過觀察歸芪益元膏對重離子輻射肺臟的肺腎旁效應(yīng)模型大鼠DNA雙鏈斷裂和修復(fù)因子γH2AX、53BP1表達(dá)的影響，分析歸芪益元膏對重離子輻射肺腎旁效應(yīng)模型大鼠 DNA損傷和修復(fù)的調(diào)控機(jī)理，從DNA損傷和修復(fù)的層面探討其對輻射旁效應(yīng)防護(hù)的分子生物學(xué)機(jī)制，為臨床使用歸芪益元膏防護(hù)輻射旁效應(yīng)損傷提供理論基礎(chǔ)和藥效學(xué)基礎(chǔ)。
　　方法：將42只SPF級(jí)Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為3組，分別為空白組、輻射組、中藥組，其中空白組6只，輻射組

2、和中藥組各18只。對中藥組大鼠進(jìn)行歸芪益元膏湯劑灌胃處理，灌胃劑量為2mL/天，時(shí)間為14天；其他組同步給予生理鹽水灌胃處理。藥物干預(yù)結(jié)束后，對輻射組和中藥組大鼠右肺進(jìn)行重離子輻射。輻射組和中藥組大鼠分別在輻射后6h、12h、24h各處死6只，采集標(biāo)本，流式細(xì)胞術(shù)檢測股骨骨髓細(xì)胞周期，Q-PCR法檢測大鼠右肺、左肺、左腎組織中H2AX、53BP1的轉(zhuǎn)錄水平，Western-blot法檢測大鼠右肺、左肺、左腎組織中γH2AX、53BP1的

3、表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.骨髓細(xì)胞周期變化：①與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細(xì)胞中的G0/G1期細(xì)胞率在重離子輻射后12h下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股骨骨髓細(xì)胞中G0/G1期細(xì)胞率在重離子輻射后12h、24h下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細(xì)胞中的S期細(xì)胞率在重離子輻射后12h升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股

4、骨骨髓細(xì)胞中的S期細(xì)胞率在重離子輻射后6h升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在重離子輻射后12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。③與空白組相比，輻射組大鼠股骨骨髓細(xì)胞中的G2/M期細(xì)胞率在重離子輻射后6h無明顯差異（P＞0.05），在重離子輻射后12h、24h均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與空白組相比，中藥組大鼠股骨骨髓細(xì)胞中的G2/M期細(xì)胞率在重離子輻射后6h無明顯差異（P＞0.05），在重離

5、子輻射后24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2.右肺、左肺、左腎組織中H2AXmRNA表達(dá)變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中 H2AXmRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠右肺中 H2AXmRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中H2AXmRNA在

6、重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中H2AXmRNA在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.右肺、左肺、左腎組織中53BP1mRNA表達(dá)變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠右肺中

7、53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中53BP1mRNA在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中53BP1mRNA在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.右肺、左肺、左腎組織中γH2AX蛋白表達(dá)變化：①與空白組相比

8、，輻射組大鼠右肺中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠右肺中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中γH2AX蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中γH2AX蛋白在重離子輻射

9、后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　5.右肺、左肺、左腎組織中53BP1蛋白表達(dá)變化：①與空白組相比，輻射組大鼠右肺中53BP1蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠右肺中53BP1蛋白在重離子輻射后6h、12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與空白組相比，輻射組大鼠左肺、左腎中53BP1蛋白在重離

10、子輻射后6h、12h、24h明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與同時(shí)間點(diǎn)輻射組相比，中藥組大鼠左肺、左腎中53BP1蛋白在重離子輻射后12h、24h明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：歸芪益元膏通過調(diào)控直接輻射組織右肺、輻射旁組織左肺和輻射旁器官左腎中γH2AX、53BP1的表達(dá)，可有效預(yù)防由重離子輻射引起的靶組織、旁組織和旁器官細(xì)胞中的DNA雙鏈斷裂，同時(shí)可促進(jìn)DNA的修復(fù)。這可能是歸芪益元膏防護(hù)重