清腦益元湯對大鼠腦缺血損傷VEGF、PDGF表達的影響.pdf

1、目的：觀察清腦益元湯對大鼠腦缺血損傷缺血側(cè)皮層及海馬區(qū)VEGF、PDGF表達的影響，探討清腦益元湯對大鼠腦缺血損傷神經(jīng)元保護的作用機制。
　　方法：將成年健康雄性SD大鼠192只，按隨機數(shù)字表分為兩大組，每組96只，繼續(xù)隨機分為4個亞組：空白組(A組6只)、假手術組(B組30只)、模型對照組(C組30只)、清腦益元組(D組30只)。假手術組、模型對照組及清腦益元組均按缺血損傷后1d、3d、7d、14d、28d五個處死時間點分為5個

2、亞組(n=6)，并分別作如下處理：空白正常飼養(yǎng)，灌胃等體積蒸餾水；假手術組單純手術而未插線動物，術后正常飼養(yǎng)，灌胃等體積蒸餾水；模型對照組灌胃等體積蒸餾水7d后，麻醉，行MACO術，術后制成大鼠急性腦缺血損傷大鼠模型，待大鼠麻醉清醒后，繼續(xù)予生理鹽水灌胃至各處死時間點。清腦益元組灌胃等體積清腦益元7d后操作同模型對照組，待大鼠麻醉清醒后，繼續(xù)予中藥灌胃至大鼠各處死時間點。參考Longa的5分制法對大鼠進行神經(jīng)功能缺損評分，并按各時間點進

3、行標本采集。取材后，一組應用實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(Real Time PCR)檢測大鼠缺血側(cè)皮層及海馬區(qū)VEGF的表達，另一組應用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)檢測大鼠缺血側(cè)皮層及海馬區(qū)PDGF的表達。
　　結(jié)果：
　　1. RT-PC R檢測結(jié)果：與假手術組比較，模型組腦組織VEGF的mRNA表達在各時間點均有所升高，但統(tǒng)計學比較無顯著差異。與模型組比較，清腦益元組VEGF mRNA表達在各時間點均顯著增高

4、。清腦益元組早期(第1天)可見VEGF表達增高，在早期(第3天)就明顯升高，并逐漸升高第14天達到高峰；在模型對照組VEGF表達成緩慢增長的趨勢，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果：與模型組比較，清腦益元組PDGF的表達在各時間點均顯著增高。清腦益元組早期(第1天)可見 PDGF的明顯增高，在早期(第3天)呈稍放緩但仍很明顯的增高趨勢，并逐漸升高第14天達到高峰；在模型組PDGF表達成緩慢增長的趨勢，差異