脾動脈結(jié)扎對肝部分切除術(shù)后大鼠肝再生的影響.pdf

1、目的:
　　肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一。在治療肝臟惡性腫瘤時，外科醫(yī)生經(jīng)常面臨著腫瘤根治性切除和保全殘肝功能的兩難境地。這種顧慮往往使外科醫(yī)生放棄了腫瘤的根治性切除。因此如何提高肝臟部分切除術(shù)后肝再生能力成為亟待解決的問題。有研究表明脾切除術(shù)促進(jìn)了肝部分切除術(shù)后大鼠的肝再生。與脾切除相比較，脾動脈結(jié)扎也可以在一定程度上減少門靜脈的血流來源，降低門靜脈壓力，緩解肝大部切除后門脈高灌注狀態(tài)，而且手術(shù)操作簡單易行、切口相對較小，相對縮

2、短了手術(shù)時間，減少了術(shù)中出血，降低了手術(shù)風(fēng)險，同時又保留了脾臟的免疫功能、清除功能等。但脾動脈結(jié)扎對肝再生的影響及機(jī)制仍不明確。本課題通過建立Sprague-Dawley大鼠70％肝切除模型，觀察脾動脈結(jié)扎對部分肝切除大鼠術(shù)后肝臟功能恢復(fù)及肝臟再生過程中肝細(xì)胞生長因子（hepatocyte growth factor, HGF）、轉(zhuǎn)化生長因子-α(transforming growth factoralpha, TGF-α)和轉(zhuǎn)化生長因

3、子-β1（transforming growth factor beta1，TGF-β1）表達(dá)的影響，探討脾動脈結(jié)扎對肝再生的影響。
　　材料與方法:
　　在實驗前期，通過進(jìn)行預(yù)實驗建立穩(wěn)定的大鼠70％肝切除模型。在此基礎(chǔ)上，將72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠（河南省實驗動物中心購買），鼠齡6-8周，體重220～250 g，隨機(jī)分為3組，假手術(shù)組（A組）:開腹后僅行肝左葉、肝中葉分離及距脾門1.5 cm分離脾動

4、靜脈;70％肝切除組（B組）:完整切除大鼠肝左葉及肝中葉;70％肝切除+脾動脈結(jié)扎組（C組）:完成肝左葉和肝中葉的切除后，距脾門1.5 cm，結(jié)扎脾動脈。每組再分為3個階段:術(shù)后24h、術(shù)后48 h、術(shù)后72 h，稱重，麻醉后開腹留取腹主動脈血及取肝臟標(biāo)本。記錄麻醉前大鼠重量，測殘肝的濕重，計算大鼠肝體比;所取腹主動脈血，一部分送檢驗科測定肝功能生化指標(biāo)ALT和AST水平，另一部分靜置后離心取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme-l

5、inked immunosorbent diffusion assay, ELISA）檢測血清中HGF、TGF-α和TGF-β1的水平;所取肝臟組織多聚甲醛固定，采用免疫組織化學(xué)方法分別檢測肝組織中TGF-α和TGF-β1的表達(dá)。應(yīng)用SPSS21.0軟件統(tǒng)計分析各組間各個指標(biāo)的差異，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　成功建立了SD大鼠70％肝切模型，在實驗過程中大鼠能正常存活。術(shù)后B組、C組肝體比隨時間變化

6、逐漸增加。與B組比較，C組術(shù)后24 h肝體比較小(P＜0.05)，術(shù)后48h肝體比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，術(shù)后72h肝體比增大(P＜0.05)。與A組比較，B組、C組術(shù)后24、48和72 h血清ALT、AST水平均明顯增高(P＜0.05);B組、C組術(shù)后血清ALT、AST水平均隨時間的變化逐漸降低，C組術(shù)后24、48和72h血清ALT、AST水平均低于術(shù)后同時間B組(P＜0.05)。與A組比較，術(shù)后24、48和72 h血清TG

7、F-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平在B組和C組均明顯升高(P＜0.05）。與B組比較，C組術(shù)后24 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平均增高(P＜0.05），在術(shù)后48、72 h血清中TGF-α水平和肝組織中TGF-α的表達(dá)水平與C組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05）。與A組比較，B組和C組大鼠在術(shù)后24、48和72 h肝組織中TGF-β1表達(dá)量明顯增加(P＜0.05);與B組比較，C組大鼠在術(shù)后24、48和72

8、h肝組織中TGF-β1表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。B組大鼠術(shù)后24、48和72 h血清中TGF-β1水平均高于C組大鼠(P＜0.05)。B組和C組術(shù)后24、48和72 h血清中HGF水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.脾動脈結(jié)扎可以減輕70％肝切除大鼠術(shù)后肝組織損傷，提高殘肝質(zhì)量增加的速度，促進(jìn)肝臟功能的恢復(fù);
　　2.結(jié)扎脾動脈可促進(jìn)70％肝切除大鼠術(shù)后24 h TGF-α的表達(dá)，