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文檔簡介
1、動物研究發(fā)現(xiàn),B-1a細胞能在感染性炎癥或慢性炎癥疾病的固有免疫機制中起到保護作用,它能在病毒或細菌入侵的早期快速清除感染源。牙周炎與肥胖,可分別引起局部感染性炎癥與全身慢性炎癥狀態(tài),二者相關(guān)聯(lián)的流行病學報道很多,但是它們之間的免疫機制還尚不明了。本研究建立肥胖復合牙周炎小鼠模型,基于B-1a細胞存在牙周病損局部和肥胖與牙周炎相關(guān)聯(lián)的理論基礎(chǔ),對B-1a細胞在肥胖和牙周炎兩種炎癥狀態(tài)中發(fā)揮的病理機制進行探索。
第一章 肥胖狀態(tài)
2、下牙周感染對小鼠牙周組織中B-1a細胞的影響
目的:
本章主要探討肥胖狀態(tài)下牙周感染對小鼠牙周組織中B-1a細胞的表達水平及功能的影響,分析肥胖伴牙周感染小鼠牙周組織中B-1a細胞膜表面特異性蛋白CD5,及B-1a細胞分泌的白細胞介素-10(IL-10)炎癥因子和抗Ⅰ膠原抗體(抗COLⅠ抗體)的蛋白和mRNA表達變化。
方法:
動物模型分組:將24只小鼠隨機分成兩組,每組各12只。其中一組喂以高脂
3、飼料,為肥胖組(high fat diet,HF),另一組喂以低脂飼料,為正常體重組(low fat diet,LF)。飼料誘導30周后,分別從肥胖組和正常體重組中隨機抽取6只做牙周真性結(jié)扎處理(periodontitis,P),每組剩余的6只做假性結(jié)扎處理(control,C),結(jié)扎處理5天,隨即產(chǎn)生牙周炎組(LFP組)、正常體重對照組(LFC組)、肥胖組(HFC組)、肥胖復合牙周炎組(HFP組)。
免疫組化染色定量分析和實
4、時定量PCR基因水平檢測:通過實時定量PCR和免疫組化染色方法對牙周組織中CD5、抗COLⅠ抗體、IL-10的蛋白和mRNA表達水平進行定量檢測。
牙周組織中CD5、抗COLⅠ抗體、IL-10的表達水平分別與體重和牙周組織浸潤的炎癥細胞數(shù)之間的相關(guān)性分析:小鼠稱重;牙周組織HE染色后對浸潤的炎癥細胞定量計數(shù);將體重、炎癥細胞數(shù)與三種蛋白之間進行Pearson相關(guān)性分析。
結(jié)果:
牙周組織中B-1a細胞的mR
5、NA及蛋白的表達水平:B-1a細胞相關(guān)三種蛋白的牙周炎主效應均有顯著性,牙周炎組中的IL-10、CD5、抗COLⅠ抗體的mRNA和蛋白表達水平均顯著高于對照組(P<0.001)。
肥胖和牙周炎對牙周組織中B-1a細胞功能的影響:CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達水平與炎癥細胞數(shù)之間均呈顯著正相關(guān)性(r>0,P<0.001);但三者與體重之間的相關(guān)性均不顯著(P>0.05)。
結(jié)論:
B-1a細胞在
6、牙周炎癥早期表達上調(diào),所分泌的抗COLⅠ抗體可以抵御細菌初期對牙周組織的破壞。但肥胖并未對炎性牙周組織中B-1a細胞的表達水平及功能產(chǎn)生顯著性影響。
第二章 肥胖狀態(tài)下牙周感染對小鼠脾臟組織中B-1a細胞的影響.
目的:
本章主要探討肥胖狀態(tài)下牙周感染對小鼠脾臟組織中B-1a細胞表達水平及功能的影響,分析肥胖伴牙周感染小鼠脾臟組織中B-1a細胞膜表面特異性蛋白CD5,及B-1a細胞分泌的抗COLⅠ抗體和IL
7、-10炎癥因子的蛋白表達變化。
方法:
蛋白質(zhì)印跡定量分析:用蛋白質(zhì)印跡方法對脾臟組織中CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達水平進行定量檢測。
將脾臟組織中CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的表達水平分別與體重和牙周組織浸潤的炎癥細胞數(shù)之間進行Pearson相關(guān)性分析。
結(jié)果:
脾臟組織中B-1a細胞的表達水平:B-1a細胞相關(guān)三種蛋白的肥胖主效應均有顯著性,肥胖組中的CD5、I
8、L-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達水平均顯著高于正常體重組(P<0.001)。
肥胖和牙周炎對脾臟組織中B-1a細胞功能的影響:CD5、IL-10、抗COLⅠ抗體的蛋白表達水平與體重之間均呈顯著正相關(guān)性(r>0,P<0.001),但三者與牙齦炎癥細胞數(shù)之間的相關(guān)性均不顯著(P>0.05)。
結(jié)論:
B-1a細胞在肥胖機體內(nèi)表達上調(diào),但其發(fā)揮的功能尚不明確。牙周感染并未對肥胖機體脾臟組織中B-1a細胞的表達產(chǎn)
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