圍孕期營養(yǎng)素及母胎Jagged1基因多態(tài)性與先天性心臟病的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　回顧性分析深圳市2009.1.1～2013.12.31出生缺陷監(jiān)測資料，了解近五年深圳市先天性心臟病的基本流行病學(xué)特點;比較深圳市先天性心臟病兒母體與正常胎兒母體圍孕期營養(yǎng)元素攝入情況，明確該地區(qū)圍孕期營養(yǎng)素攝入情況在胎兒CHD發(fā)生中的影響程度;以期發(fā)現(xiàn)影響該地區(qū)CHD發(fā)生可能的因素，為孕婦圍孕期合理的飲食及營養(yǎng)素的補(bǔ)充提供指導(dǎo)，更好地做好CHD的一級預(yù)防工作。檢測先天性心臟病胎兒母體和正常胎兒母體全血鋅及血清維生素A

2、的含量和母胎Jagged1基因的多態(tài)性，分析其與胎兒CHD發(fā)生的相關(guān)性，有望通過檢測母體全血鋅、血清維生素A的含量及母胎Jagged1基因多態(tài)性篩查出發(fā)生胎兒CHD的高危人群，為CHD的產(chǎn)前篩查和風(fēng)險評估提供幫助。
　　方法：
　　1.研究對象
　　流行病學(xué)研究:收集深圳市婦幼保健系統(tǒng)2009年～2013年醫(yī)院出生監(jiān)測資料進(jìn)行回顧性分析;并從中隨機(jī)抽取2013年1月至2013年12月在深圳居住時間滿1年以上的先天性心臟

3、病兒母親和同期引產(chǎn)或分娩的正常胎嬰兒母親組成病例組和對照組，按照1:1匹配，匹配條件:年齡相差2歲以內(nèi)、孕周相差2周以內(nèi)、孕期生活在深圳同一城區(qū)、漢族。對兩組的圍孕期營養(yǎng)元素攝入情況進(jìn)行電話回訪。兩組孕婦年齡、孕周的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。共收集問卷324份。
　　實驗室研究:選取2013年11月～2014年11月在深圳市婦幼保健院引產(chǎn)或分娩的先天性心臟病胎兒及其母親組成病例組，其中母體病例組44例，胎兒病

4、例組44例;同期在深圳市婦幼保健院引產(chǎn)或分娩的正常胎兒及其母親為對照組，按照1∶2匹配，匹配條件:同前。共收集母體對照組88例，胎兒對照組88例。兩組孕婦年齡、孕周的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。
　　所有的調(diào)查及研究對象都在知情同意后納入研究。
　　2.實驗方法
　　2.1 根據(jù)深圳市2009年～2013年深圳市監(jiān)測的先天性心臟病胎嬰兒及其母親的資料，分析五年內(nèi)深圳市出生缺陷和先天性心臟病發(fā)生率的變

5、化趨勢和先天性心臟病胎嬰兒及其母親的基本流行病學(xué)特征（包括孕婦的戶籍類型、文化程度、年齡分布等;先心兒的性別、出生季節(jié)、轉(zhuǎn)歸等）。將CHD分為僅有心血管系統(tǒng)畸形的單純型CHD（單純組）及合并有其他心外系統(tǒng)畸形的復(fù)雜型CHD（復(fù)雜組），對兩組的年齡分層、轉(zhuǎn)歸、戶籍類型、診斷時間、文化程度、妊娠/分娩并發(fā)癥進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　2.2 通過電話回訪，調(diào)查深圳市先天性心臟病兒母體與正常胎兒母體圍孕期營養(yǎng)元素攝入情況，包括①孕早期飲食習(xí)慣（

6、分為肉食為主、葷素相當(dāng)、素食為主），孕早期飯量改變（分為較孕前差，與孕前相當(dāng)，較孕前好），懷孕前三個月、妊娠早期和妊娠中晚期奶制品、蛋類、豆類、水果、堅果類、海產(chǎn)品、復(fù)合維生素、葉酸、鈣片、鐵劑、魚肝油、蛋白粉的攝入情況;②奶制品、蛋類、豆類、水果、堅果類、海產(chǎn)品在懷孕前三個月、妊娠早期和妊娠中晚期的攝入頻率（分為每天、每周4～6次、每周1～3次、少于一周1次），共32個變量。
　　2.3 在引產(chǎn)或分娩時采集病例組和對照組母體肘靜

7、脈血8ml，分別注入干燥管、肝素鈉抗凝管各3ml，干燥管血液自然凝固30min后，以3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘后分離血清，將全血和血清放置-80℃冰箱保存，以待檢測全血鋅、血清維生素A的含量;另2ml靜脈血采用EDTA抗凝，并在引產(chǎn)或分娩時采集所有入選對象5ml羊水，注入BD管內(nèi)，一起保存于-80℃冰箱，以待檢測Jagged1基因多態(tài)性。
　　2.4 應(yīng)用超高液相色譜法(UHPLC)測定母體血清維生素A含量;應(yīng)用電感耦合等離子質(zhì)譜

8、法(ICP-MS)測定母體全血鋅含量。
　　2.5 采用PCR測序技術(shù)檢測母胎Jagged1基因第6外顯子區(qū)3個位點(765、814、834)。
　　2.6 數(shù)據(jù)經(jīng)核實整理后在Excel上創(chuàng)建數(shù)據(jù)文件庫，均采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗后，正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用兩獨立樣本t檢驗，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用兩獨立樣本的非參數(shù)檢驗，用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）[M(Q)]表示;計數(shù)資料用率表示，采

9、用卡方/Fisher檢驗，計算OR值及其95％CI，表示它們之間的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，以P＜0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.五年內(nèi)深圳市先天性心臟病平均發(fā)生率為7.25‰，呈上升趨勢，其中超聲波檢查發(fā)現(xiàn)者占94.36％，產(chǎn)前診斷率為33.20％;孕婦年齡≥30歲者占64.80％，其中≥35歲者占40.72％，暫住型戶籍占44.36％，高中及中專文化水平者占41.93％;以單胎、男性、夏秋季出生者較多;最常見的心血

10、管畸形是動脈導(dǎo)管未閉、室間隔缺損、房間隔缺損，發(fā)生率分別是24.12‰、18.96‰、14.81‰;并發(fā)心外系統(tǒng)畸形者占14.11％，以骨骼四肢系統(tǒng)、顏面五官、神經(jīng)系統(tǒng)畸形常見;51.83％的單純型CHD并發(fā)有兩種及以上心臟畸形;單純型CHD與復(fù)雜型CHD在孕婦年齡分層、文化程度、胎兒轉(zhuǎn)歸、產(chǎn)前診斷時間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2.圍孕期未補(bǔ)充任何一種營養(yǎng)素補(bǔ)充劑者，病例組有7人(4％)，正常組有5人(3％)。兩

11、組補(bǔ)充率較高的均為葉酸、孕婦奶粉、復(fù)合維生素、鈣片，而鐵劑、魚肝油和蛋白粉的補(bǔ)充率則兩組都較低。單因素卡方檢驗顯示:兩組間孕早期飲食習(xí)慣，圍孕期補(bǔ)充奶制品、堅果類、海產(chǎn)品、豆類、復(fù)合維生素、葉酸、鐵劑、魚肝油的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而且圍孕期上述營養(yǎng)元素的補(bǔ)充均為保護(hù)性因素(OR＜1)。兩組在圍孕期不同階段奶制品、蛋類、水果、豆類、堅果類和海產(chǎn)品的攝入頻率有差異，尤其孕前3個月及孕早期(P＜0.05)。多因素條件Logist

12、ic回歸分析顯示:圍孕期補(bǔ)充復(fù)合維生素、葉酸、奶制品、堅果類，孕前三個月奶制品的攝入頻率，孕早期素食為主的飲食習(xí)慣會影響胎兒CHD的發(fā)生(P＜0.05)。
　　3.先天性心臟病兒母體的全血鋅含量[5.20(0.85) mg/L]和血清維生素A[0.37(0.16) mg/L]含量均低于正常胎兒母體[5.67(1.05) mg/L、0.43(0.10)mg/L]，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。先天性心臟病兒母體全血鋅和血清維生

13、素A含量間呈正相關(guān)性（rp=0.594，P＜0.001），正常胎兒母體內(nèi)未發(fā)現(xiàn)兩者相關(guān)(P=0.072)。
　　4.132例孕婦中，Jagged1基因c.765C＞A突變型基因頻率為18.18％，非突變型（即野生純合型）為81.82％;132例胎兒中Jagged1基因c.765C＞A突變型基因頻率為21.97％，非突變型（即野生純合型）為78.03％。Jagged1基因814位點和834位點在所有樣本中均未發(fā)現(xiàn)基因突變。兩組母體和

14、胎兒的Jagged1基因c.765C＞A突變型與非突變型的基因型及等位基因分布間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.2009～2013年深圳市先天性心臟病發(fā)生率呈上升趨勢。以單純型CHD為主，復(fù)雜型CHD的死胎率、產(chǎn)前診斷率均明顯高于單純型CHD，年齡≥35歲的孕婦子代復(fù)雜型CHD的構(gòu)成比高于單純型CHD，尤其40歲后更為明顯。
　　2.孕早期以素食為主的飲食會增加胎兒CHD的發(fā)生風(fēng)險，而圍孕