子宮NK細(xì)胞在ASD中作用機(jī)制.pdf

1、人體的免疫系統(tǒng)是一個(gè)相互制衡的穩(wěn)態(tài)環(huán)境。作為孕育新生命的子宮，承擔(dān)著作為一個(gè)物種繁衍后代的歷史使命。近些年來(lái)，子宮免疫環(huán)境的研究越來(lái)越受重視。而子宮對(duì)于胚胎的耐受機(jī)制也一直是人們的研究熱點(diǎn)。在子宮當(dāng)中，除了子宮內(nèi)膜細(xì)胞，胎兒的滋養(yǎng)層細(xì)胞外，還有一群在母胎界面無(wú)處不在的免疫細(xì)胞，包括巨噬細(xì)胞、DC細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等。
　　這其中作為自然殺傷細(xì)胞的NK細(xì)胞自然不容忽視。在以往的研究中，發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞除了行使其殺傷功能外。處于子

2、宮當(dāng)中的NK細(xì)胞，還行使著維持母胎界面免疫耐受的功能。
　　ASD又被稱為自閉癥譜系障礙，是一種嚴(yán)重普遍的神經(jīng)發(fā)育障礙。根據(jù)美國(guó)最新的精神病協(xié)會(huì)(DSM-V)，將ASD臨床表現(xiàn)描述為按社交障礙和重復(fù)刻板行為。而我們?nèi)粘Ｋ盍私獾淖蚤]癥(autistic disorder)則是其中最嚴(yán)重的一種疾病形式。ASD患者多為兒童時(shí)期即發(fā)病，并且在日后的生活中并不能得到非常有效的治療，使這一類(lèi)人在社會(huì)互動(dòng)，言語(yǔ)或非言語(yǔ)交際上受到嚴(yán)重的限制。并

3、且長(zhǎng)此以往，也給家庭帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。正因?yàn)槿绱耍澜鐚?duì)于ASD的研究層出不窮。
　　在本研究中，我們?cè)噲D從母胎界面的子宮NK細(xì)胞入手，來(lái)揭開(kāi)ASD疾病的一層薄紗。首先，我們通過(guò)向C57BL/6J小鼠腹腔注射TLR3激動(dòng)劑poly(I∶C)，觀察到小鼠容易出現(xiàn)流產(chǎn)的狀況，并且胎鼠的生長(zhǎng)發(fā)育嚴(yán)重受限。胎鼠的大腦皮層結(jié)構(gòu)混亂無(wú)序，出現(xiàn)ASD疾病中大腦皮層會(huì)出現(xiàn)的現(xiàn)象。接著，我們對(duì)小鼠的子宮免疫細(xì)胞進(jìn)行了檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)poly (I∶

4、C)處理的小鼠子宮當(dāng)中，子宮NK細(xì)胞的比例發(fā)生明顯降低。CD49a+ Eomes+的子宮NK細(xì)胞被認(rèn)為是子宮所獨(dú)有的組織居留細(xì)胞。E12.5天，用poly(I∶C)處理孕鼠之后，CD49a+ Eomes+的子宮NK細(xì)胞的比例也發(fā)生明顯下降。E13.5天，我們檢測(cè)到子宮中的CD4+T細(xì)胞分泌IL-17A的水平明顯提高，即子宮Th17細(xì)胞比例增多。而子宮NK細(xì)胞，其分泌IFN-γ的能力下降，分泌顆粒酶B的能力增強(qiáng)。
　　研究表明子宮N

5、K細(xì)胞可以通過(guò)IFN-γ來(lái)負(fù)調(diào)子宮Th17細(xì)胞分泌IL-17A的能力。并且ASD發(fā)病的重要原因就是母胎界面IL-17A大量增多，通過(guò)母胎血腦屏障與胎兒大腦內(nèi)的IL-17A受體相結(jié)合，最終導(dǎo)致大腦皮層結(jié)構(gòu)的錯(cuò)亂。因此我們猜測(cè)子宮NK細(xì)胞可能可以通過(guò)分泌IFN-γ來(lái)阻止ASD的發(fā)生。
　　我們選擇了IFN-γ分泌缺陷的T-bet缺陷鼠和缺乏NK細(xì)胞的Nfil3缺陷鼠，進(jìn)行進(jìn)一步的檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)相比較WT鼠而言，T-bet缺陷鼠更容易發(fā)生I

6、L-17A的高水平分泌。而Nfil3缺陷鼠則在子宮居留NK細(xì)胞比例上低于WT鼠，并且大腦發(fā)育結(jié)構(gòu)錯(cuò)亂。由此，驗(yàn)證了子宮NK細(xì)胞對(duì)于大腦發(fā)育和維持母胎免疫環(huán)境穩(wěn)定的重要性。子宮NK細(xì)胞可以通過(guò)IFN-γ的水平來(lái)加重或者延緩ASD發(fā)生的可能。
　　進(jìn)一步，我們選擇了人體正常妊娠的子宮細(xì)胞，并且將子宮淋巴細(xì)胞與滋養(yǎng)層細(xì)胞在體外共同培養(yǎng)，并且用poly (I∶C)刺激。人體子宮NK細(xì)胞的比例并沒(méi)有發(fā)生改變，但是其分泌IFN-γ的能力發(fā)生了