長非編碼RNA-AK004418對成肌細胞增殖和分化的影響.pdf

1、長非編碼RNA(lncRNA)是轉(zhuǎn)錄本長度大于200核苷酸不編碼蛋白質(zhì)的RNA。本研究基于本實驗室前期基因芯片結(jié)果，篩選出在肌肉組織中高表達的lncRNA-AK004418，以小鼠C2C12細胞為研究材料，利用RNA干涉和超表達技術(shù)研究了lncRNA-AK004418對成肌細胞增殖和分化的影響。主要的研究結(jié)果如下:
　　1.利用RACE技術(shù)獲得了AK004418的全長序列，該lncRNA位于編碼基因SYNPO2第4內(nèi)含子區(qū)域，且無

2、蛋白編碼能力;AK004418在腿肌、背最長肌和舌中高表達，而SYNPO2在所研究的13種組織中均有表達;在成肌細胞分化過程中，AK004418表達量逐漸上升，而SYNPO2在細胞分化5天表達量最高;核質(zhì)定位結(jié)果表明AK004418分布在細胞核和細胞質(zhì)中。
　　2.利用實時定量PCR、Western Blot、RTCA xCELLigence系統(tǒng)和細胞免疫熒光技術(shù)在成肌細胞中研究了干涉和超表達AK004418后對SYNPO2基因表

3、達、成肌細胞增殖與分化的影響。研究結(jié)果表明AK004418促進了成肌細胞增殖，抑制了成肌細胞分化及其標(biāo)志基因MyHC和MyoG的表達，但對SYNPO2基因表達無顯著影響。
　　3.利用基因芯片技術(shù)檢測了AK004418干涉前后的基因表達變化，結(jié)果表明干涉AK004418后上調(diào)差異表達的基因有1357個，下調(diào)差異表達的基因有1837個，上調(diào)差異表達基因主要與心肌疾病等信號通路相關(guān)，下調(diào)差異表達基因主要與細胞周期、機動蛋白細胞骨架調(diào)節(jié)