mba論文釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的rapd分析與基因工程改造pdf

1、分類(lèi)號(hào)豳3 = 3 3U D C碩士學(xué)位論文密級(jí)公本釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的R A P D分析與基因工程改造曹樹(shù)威學(xué)科專(zhuān)業(yè) 微生物堂指導(dǎo)老師 黃旦這麴拯論文答辯日期2 Q ! 三生§且2 2 旦 學(xué)位授予日期2 Q ! 圣生魚(yú)且墊毋答辯委員會(huì)主席 值勇強(qiáng)熬攫釀酒酵母乙醇發(fā)酵工業(yè)菌株的R A P D 分析與基因工程改造摘要甘蔗糖蜜作為我國(guó)南方蔗糖產(chǎn)區(qū)主要的乙醇發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)原料，具有低成本，不耗糧，并可解決制糖業(yè)污染等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)其

2、乙醇發(fā)酵的研究一直是研究的重點(diǎn)，其中很關(guān)鍵的問(wèn)題是獲得高性能的菌種，菌株的鑒定及選育具有重要意義。因此本論文工作主要從兩方面展開(kāi)，首先選擇單細(xì)胞形態(tài)及甘蔗糖蜜乙醇發(fā)酵表型不同的7 株釀酒酵母工業(yè)菌株為研究對(duì)象，利用R A P D 技術(shù)進(jìn)行核基因組多態(tài)性分析鑒定，以探討釀酒酵母核基因組多態(tài)性與相關(guān)性狀的關(guān)系；然后以全基因組分析為基礎(chǔ)進(jìn)一步對(duì)菌株進(jìn)行改造，以選育高性能的甘蔗糖蜜乙醇發(fā)酵釀酒酵母菌種。為滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)進(jìn)程要求，本實(shí)驗(yàn)建立了一種P C

3、 R 模板高通量制備法，可以在3m i n 內(nèi)完成一株釀酒酵母的P C R 模板制備工作。I T S 擴(kuò)增及測(cè)序結(jié)果證實(shí)該法擴(kuò)增目標(biāo)條帶的專(zhuān)一性。釀酒酵母不同長(zhǎng)度核基因的擴(kuò)增及R A P D 擴(kuò)增，證實(shí)該法相對(duì)于C T A B 基因組法，具有時(shí)間短，操作簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)。基于P C R 模板高通量制備法進(jìn)行R A P D 實(shí)驗(yàn)，先對(duì)2 2 種隨機(jī)引物進(jìn)行篩選。利用8 種引物對(duì)7 株釀酒酵母工業(yè)菌株進(jìn)行R A P D 分析，結(jié)果表明，系列菌株間

4、的相似性系數(shù)在0 ．4 7 ．0 ．9 6 之間，高產(chǎn)菌株1 0 1 5 ．0 4 ．0 1 與高產(chǎn)菌株1 0 0 2 ．0 3 ．0 3 之間的相似性最高，而高產(chǎn)菌株1 0 1 5 ．0 4 ．0 1 與低產(chǎn)菌株1 4 1 5 相似．性最低。利用U P G M A 法進(jìn)行聚類(lèi)分析，高產(chǎn)菌株1 0 1 6 ．0 2 ．0 4 ，低產(chǎn)菌株1 4 1 5及低產(chǎn)菌株1 3 1 3 聚為一大類(lèi)，而1 4 1 5 與1 3 1 3 又聚為一小類(lèi)，