《生物化學(xué)實驗》理論考查復(fù)習(xí)思考題

1、《生物化學(xué)實驗》總復(fù)習(xí)思考題1. 請掌握下列生物化學(xué)實驗常用儀器的正確操作使用方法，并能回答以下問題：(1) 離心機使用時為什么要平衡？普通離心機與高速離心機在平衡時有什么不同要求？(2) 為什么用高速組織搗碎機進行動、植物組織搗碎時，需采用間歇式方式進行操作？(3) 用真空泵進行減壓抽濾時，為什么要連接緩沖瓶？2. 為什么肝糖元只能從剛宰殺的動物肝臟中獲??？在提取肝糖元過程中，三氯乙酸、95%乙醇各起什么作 用？在糖元水解產(chǎn)物中如果存

2、在殘留蛋白質(zhì)時，當用班氏試劑檢測水解產(chǎn)物，有何影響？(要求詳細闡述)3. 以下是涉及分光光度儀結(jié)構(gòu)、各部件功能的一些基礎(chǔ)問題，請依次解答：(1 )請闡述分光光度儀的主要部件及其功能，紫外與可見光光波的波長范圍？(2) 從光源發(fā)出的光是復(fù)合光，而測定物質(zhì)吸光度大小的光是單色光，請問該單色光與物質(zhì)結(jié)構(gòu)和對光的 吸收有何內(nèi)在聯(lián)系？什么叫物質(zhì)的特征吸收波長？用分光光度法定制實測物質(zhì)標準曲線時，如何確定被測物質(zhì)的 特征吸收波長？(3) 產(chǎn)生紫外與

3、可見光光譜的光波是甶什么光源發(fā)出的？用石英與普通玻璃所制作的比色皿在材質(zhì)上有何 差異？為什么在紫外波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)吸光度大小必須采用石英材質(zhì)的比色皿？(4) 光電管的功能是什么？為什么說光電管是分光光度儀最脆弱和最易損的部件？4. 以下是涉及分光光度儀工作原理一Beer-Lamber定律的一些基礎(chǔ)問題，請依次解答：(1 ) Beer-Lamber定律揭示在稀溶液中，物質(zhì)的濃度與其對光的吸收值大小(吸光度)之間的什么關(guān)系？該 定律如

4、何用數(shù)學(xué)表達式表示？在該表達式中，各符號代表什么含義？(2 )由于分光光度儀不能直接測定溶液吸光度的大小，請問分光光度儀是如何間接測定溶液吸光度大小的？ 在間接測定溶液吸光度大小時,Beer-Lamber定律還有一種表達方式即溶液的吸光度大小與其透光率的關(guān)系表達 式，請寫出該表達式，在該表達式中，各符號代表什么含義？(3)由于分光光度儀是通過測定溶液透光率大小，間接測定其吸光度大小的，請依據(jù)溶液吸光度大小與其 透光率的關(guān)系表達式，詳細

5、闡述為什么在用分光光度儀定制標準曲線或測定樣品時，需將待測溶液的吸光度(0D 值)控制在一定的范圍內(nèi)？你知道該測定范圍是多少嗎？17. 請闡述茚三酮反應(yīng)的反應(yīng)原理及其應(yīng)用。18. 蛋白質(zhì)的天然屬性是什么？請從蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)，正確分析理解蛋白質(zhì)分子為什么具備這樣的天然屬 性(請參照課堂重點講解內(nèi)容回答)？19. 請闡述蛋白質(zhì)“鹽析”與“中性有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)”反應(yīng)原理；這兩類沉淀反應(yīng)有何應(yīng)用？20. 在蛋白質(zhì)不可逆沉淀反應(yīng)實驗中，多次涉

6、及到蛋白質(zhì)遇到沉淀劑后，沉淀不增加反而消失的現(xiàn)象，這一 現(xiàn)象統(tǒng)稱為“假溶“現(xiàn)象，蛋白質(zhì)的“假溶“與“復(fù)溶“兩者之間有什么本質(zhì)上的不同？并請解釋以下“假溶“ 現(xiàn)象：(1 )在重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì)實驗中，加入過量的硫酸銅或過量的乙酸鉛后，沉淀消失現(xiàn)象？(2)在“海倫壓環(huán)”試驗中；請解釋用濃硫酸與濃鹽酸進行海倫壓環(huán)試驗振蕩后，沉淀消失現(xiàn)象？(3)如何快速準確鑒定一蛋白質(zhì)沉淀后的溶解是鹽析透析后的復(fù)溶“還是受溶液pH影響出現(xiàn)旳假溶“？21. 請闡

7、述用透析試驗驗證蛋白質(zhì)“可逆”與“不可逆沉淀反應(yīng)”的實驗設(shè)計原理。22. 請闡述酸、堿、鹽的存在對加熱變性蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)有何影響。要求能對加熱變性沉淀蛋白質(zhì)實驗中涉 及到的每個實驗現(xiàn)象作出正確的理論解釋。23. 請列表從檢測原理、樣品測定范圍、標準品使用濃度與消耗量、檢測結(jié)果準確性、操作難易程度、測定 方法的局限性與應(yīng)用等方面，對雙縮脲法與Folin酚法測定蛋白含量含量的方法進行分析歸納總結(jié)。24. 請闡述考馬斯亮藍G250染色法定制蛋

8、白質(zhì)標準曲線的原理對比Folin酚定制蛋白質(zhì)標準曲線原理和方 法，列表從標準品的使用濃度，測定范圍，反應(yīng)靈敏度，標準品的用量，線性關(guān)系的好壞比較兩種測定蛋白質(zhì)方 法的優(yōu)、缺點。25請從檢測方法的原理與應(yīng)用范圍著手分析，為什么分別采用Folin酚法和雙縮脲法測定“蛋白胨“這種 微生物培養(yǎng)基質(zhì)中蛋白含量時，其測定出的蛋白含量檢測結(jié)果會大相徑庭，相差甚遠？26. 在考馬斯亮藍G250染色法定制蛋白質(zhì)標準曲線實驗準備中，考馬斯亮藍G250試劑配