油豆角phaseolusvulgaris.l.主要種質(zhì)資源親緣關(guān)系的rapd分析

1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文油豆角（Phaseolus vulgaris.L.）主要種質(zhì)資源親緣關(guān)系的RAPD分析姓名：孫曉丹申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：蔬菜育種學(xué)指導(dǎo)教師：秦智偉2003.5.1東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文P h y l o g e n y o fG e n u so fB e a n ( P h a s e o l u sv u l g a r i s ．L ·)i nH e i l o n g j i a n g

2、 P r o v i n c e I d e n t i f i e db y R A P DA b s t r a c tT h ee x p e r i m e n t s w e r eo nt h eb a s i s o ft h eo b s e r v a t i o ni n t h ef i e l d s ．1 5 c u l t i v a r s w e r es e l e c t e d o u tf r o

3、 m2 7s p e c i a lc u l t i v a r s ，j u d g i n gb yb i o l o g i c a lc h a r a c t e r s a n dp e r f o r m a n c e ．w h i c h i n c l u d e s 12 f o r v i n e ．a(chǎn) n d 3 f o r d w a r f ．T h e t o t a l a m o u n t o f

4、 2 7 c u h i v a r s w a ss y s t e m a t i c a l l y , s t u d i e d a n d d i s c u s s e d f o r t w o a s p e c t s ：b i o l o g i c a l c h a r a c t e r s a n d R A P Dm o l e c u l a r m a r k e r sT h e r e s u l

5、 t ss h o w e d ：1 1 T h e e x p e r i m e a t s o n f r e s h b e a n 1 n t h e f i e l d s s h o w e d t h a t s p e c i a l l o c a I b e a n s o fH e i l o n g j i a n gP r o v i n c e a r cg o o dv a r i e t i e s o

6、 fc o l n l l l o nb e a n ，a n dt h e y ' a r et h er e s u l t s o fs e e d - s e l e c t i o n o f d e c a d e so fy e a r s —T h e n a t u r a l r e s o u r c e s o ft h e m i n H e i l o n 鰣i a n gp r o v i n e

7、ew e r ea b u n d a n t —b u tn os y s t e m a t i c a l l yh o m e r i c l a t I I r ee x i s t e d O nt h er e s p e c to fb i o l o g i c a l c h a r a c t e r s ．s o m ec o l o ro fb l o s o mC a nd i s t i n g u i s

8、 ht h e mf r o mc o m m o nb e a n sd u n n g t h e d i f f e r e n tp e n o d s o f g r o w t h2 ) I n t h es e c t i o no fm o l e e l l l a t “ b i o l o g i c a le x p e r i m e n t s ，t h em o d i f i e dS D S m e t

9、 h o dw h i c h W a Su s e dt o e x t r a c tD N A g o tg o o dr e s u l t s ．U s i n gI L N A s ec o u l de l i m i n a t et h ed i s t u r b a n c eo fR N A ．a(chǎn) n dg o tt h eq u a l i f i e dD N A w i t hal o n g t e r

10、mo fv a l i d i t y T h eo p t i m i z e dR A P Ds y s t e m s w e r e ：t o t a l r e a c t i o n v o l u m e 2 5uL i n c l u d i n g 1 0 t i m e s a m p l i f i c a t i o n b u f f e rs o l u t i o n25H l ，M 9 2 - 2 ．5

11、m m o l ／1 ．d N T P3 0 0 pm o l ／l ，0l m m o l ／l ，g e n o m eD N A 6 0 n g ．T a qe n z v m e l5 U O p t i m i z e dp r o g r a m ：9 4 ℃1 0m i n ；9 4 ℃lr a i n ，3 7 “ C l r a i n ．7 2 ℃l r a i n ．f o r t y “ c y c l e s

12、；7 2 “ C 7 r a i no n e c y c l e ；4 ℃k e e p i n g ．2 7c u l t i v a r sw e r ed e t e c t e dh y 隊P Ot h r o w l g h 1 4s e l e c t e d a r b i t r a r y ．p r i m e r s ．At o t a l o f1 1 7l o c i w e r ea m p l i f i

13、e da m o n gw h i c h1 0 4 l o c iw e r e p o l y m o r p h i cw i t ham e a n o f b a n d s p e r p r i m e rT h e r a t i oo f p o l y m o r p h i s m i s8 9 9 ％T h e g e n e t i cs i m i l a rd e g r e ei s 6 9 0a st

14、h r e s h o l d C l u s t e r ( U P G M A ) a n dp r i n c i p a lc o o r d i n a t ea n a l y s e si d e n t i f i e db e a n so f H e i l o n g i i a n gp r o v i n c ea sad i s t i n c tg r o u pw i t ht h er e s t T

15、h er e s u l t i s i n h a r m o n yw i t hb i o l o g i c a l f e a t u r eG e n e t i cs i m i l a rd e g r e e i S 6 ．5 a st h r e s h o l d ，c l u s t e r ( U P G M A ) a n dc o o r d i n a t ea n a l y s i si d e n