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1、157五、腫瘤、淋巴相關(guān)(一)(一)ApcminApcmin小鼠腸道息肉、腫瘤的檢測小鼠腸道息肉、腫瘤的檢測試劑和儀器:試劑和儀器:PBS、4%多聚甲醛、蘇木精、伊紅、體視鏡、顯微鏡、包埋機(jī)、切片機(jī)、展片機(jī)。注意事項(xiàng):注意事項(xiàng):不同背景下的Apcmin+小鼠,其表型并不一致,最好選擇C57BL6背景的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。C57BL6JApcMin+小鼠具高度自發(fā)腸內(nèi)腺瘤。正常飲食的Apcmin+小鼠約7月齡死亡;高脂飼料喂養(yǎng)的小鼠約4月齡死亡
2、。C57BL6JApcMin+小鼠因腸道出血會(huì)導(dǎo)致貧血,雌鼠約20%具自發(fā)乳腺腫瘤。ApcMin雄鼠可育,但Apcmin+的雌鼠因?yàn)榻】祮栴}不能維持妊娠,因而采用Apcmin的雄鼠進(jìn)行繁育和保種。操作步驟:操作步驟:1.小鼠鑒定引物引物PrimerSequence5–3PrimerTypeoIMR0033GCCATCCCTTCACGTTAGWildtypeoIMR0034TTCCACTTTGGCATAAGGCCommonoIMR0758
3、TTCTGAGAAAGACAGAAGTTAMutant反應(yīng)體系反應(yīng)體系ReactionComponentVolume(l)TotalVolume(l)10XPCRBuffer5502.5mMdNTP310uMoIMR0033110uMoIMR0034110uMoIMR075815UulTaqDNAPolymerase0.3DNA3ddH2O35.7PCR程序程序Step#TempCTimeNote1943min29430sec35530
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