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文檔簡介
1、腦脊液常規(guī)檢查標準操作手冊1.目的:建立腦脊液常規(guī)檢查的標準化操作;2.范圍:適用于腦脊液的常規(guī)檢查(物理檢查、蛋白定性、細胞檢查);3.標本采集:3.1標本種類:腦脊液,由臨床醫(yī)師進行腰椎穿刺采集,必要時可從小腦延腦池或側(cè)腦室穿刺獲得。3.2標本要求:將腦脊液分別收集于3個無菌試管中,第一管作細菌培養(yǎng),第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查。每管收集12毫升。3.3遇高蛋白標本時可采用EDTAK2抗凝。4.標本儲存
2、:立即送檢。5.標本運輸:室溫運輸。5.標本拒收標準:污染,久置標本。6.器材試劑:5%苯酚溶液:取純苯酚25ml加蒸餾水至500ml,用力振搖,置37℃溫箱內(nèi)12天,待完全溶解后,置棕色瓶內(nèi)保存。細胞計數(shù)板;顯微鏡。7.物理檢查:7.1目測腦脊液顏色與透明度:(1)觀察顏色。(2)觀察透明度。(3)觀察凝塊或薄膜:收集腦脊液于試管內(nèi),靜置1224小時,正常腦脊液不形成薄膜、凝塊和沉淀物。7.2結(jié)果判斷與分析:7.2.1顏色:正常腦脊液
3、是無色透明的液體。在病理情況下,腦脊液可呈不同顏色改變:(1)紅色:常由于各種出血引起。腦脊液中出現(xiàn)多量的紅細胞,主要由于穿刺損傷出血、蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血引起。前者在留取三管標本時,第一管為血性,以后兩管顏色逐漸變淡,紅細胞計數(shù)結(jié)果也依次減少,經(jīng)離心后上清液呈無色透明。當蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血時,三管呈均勻紅色,離心后上清液顯淡紅色或黃色。紅細胞在某些腦脊液中5分鐘后,即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象,因此紅細胞皺縮現(xiàn)象不能用以鑒別陳舊性或新鮮出血。(
4、2)黃色:可因出血、梗阻、郁滯、黃疸等引起。陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血,由于紅細胞缺乏蛋白質(zhì)和脂類對膜穩(wěn)定性的保護,很易破壞、溶解,出血48小時即可出現(xiàn)黃色。停止出血后,這種黃色仍可持續(xù)3周左右。椎管梗阻如髓外腫瘤,格林巴利綜合征,當腦脊液蛋白質(zhì)量超過1.5gL時,顏色變黃,其黃色程度與蛋白質(zhì)含量呈正比?;撔阅X膜炎、重癥結(jié)核性腦膜炎時,因腦脊液蛋白質(zhì)含量明顯增加而呈淡黃色或黃色。重癥如核黃疸、新生兒溶血病時腦脊液也呈黃染。(3)白色或
5、灰白色:多因白細胞增加所致常見于化膿性腦膜炎。(4)褐色或黑色:常見于腦膜黑色素瘤。7.2.2透明度:正常腦脊液應清晰透明。病毒性腦炎、神經(jīng)梅毒等疾病的腦脊液也可呈透明外觀。腦脊液中白細胞如超過300106L時可變?yōu)榛鞚?;蛋白質(zhì)含量增加或含有大量細菌、真菌等也可使其混濁;結(jié)核性腦膜炎常呈毛玻璃樣微混;而化膿性腦膜炎常呈明顯混濁。填寫報告時用“清晰透明”、“微渾”、“渾濁”等描述。7.2.3凝塊或薄膜:正常腦脊液不形成薄膜、凝塊和沉淀物。
6、若腦脊液內(nèi)蛋白質(zhì)包括纖維蛋白質(zhì)多于10gL即可出現(xiàn)凝塊或沉淀物,結(jié)核性腦膜炎的腦脊液靜置1224小時后,可見表面有纖維的網(wǎng)膜形成,取此膜涂片檢查結(jié)核桿菌,陽性率較高。蛛網(wǎng)膜下隙梗阻時,由于阻塞,遠端的腦脊液蛋白質(zhì)含量常高達15gL,此時腦脊液呈黃色膠凍狀。填寫報告百可用“無凝塊”、“有凝塊”、“有薄膜”、“膠凍狀”等描述。8.蛋白定性試驗(潘氏法):8.1實驗原理:腦脊液中球蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉,產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。
7、離現(xiàn)象,臨床上稱為Froin綜合征,是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻性腦脊液的特征。常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點壓力(kpa)外觀蛋白質(zhì)定性定量(gL)葡萄糖(mmolL)氯化物(mmolL)細胞總數(shù)及分類細菌正常人臥位0.781.67無色透明0.20.42.54.4120130(010)106L多為淋巴細胞無化膿性腦膜炎↑↑↑混濁有凝塊↑↑2以上↓↓↓↓顯著增加,以中性粒細胞為主可發(fā)現(xiàn)致病菌結(jié)核性腦膜炎↑↑↑毛玻璃樣混濁有薄膜形成↑~2↓↓↓
8、↓增加,早期以中性粒細胞為主,其后以淋巴細胞為主找到抗酸性桿菌或結(jié)核培養(yǎng)陽性病毒性腦膜炎↑清晰或微混↑正常正常增加以淋巴細胞為主無新型隱球菌腦膜炎↑清晰或微混↑↓↓增加以淋巴細胞為主新型隱球菌腦室及珠網(wǎng)膜下腔出血腦瘤↑↑血性↑↑~2↑正常增加以紅細胞為主無腦脊髓梅毒↑↑~↑清晰↑正常正常增加以淋巴細胞為主無11.2中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病時腦脊液根據(jù)細胞病理學變化分三個不同時期:①急性炎性滲出期,呈粒細胞反應;②亞急性增殖期,呈激活淋巴細
9、胞或單核巨噬細胞反應;③修復期呈淋巴細胞反應?;撔阅X膜炎的急性期變化最突出,持續(xù)時間最長;此期腦脊液細胞數(shù)每微升可高達數(shù)千,以中性粒細胞為主,當用抗生素治療后,腦脊液細胞數(shù)迅速下降。梅毒性腦炎亞急性期出現(xiàn)較早,持續(xù)時間較長,腦脊液中細胞數(shù)輕度增加,以淋巴細胞為主,在單純皰疹病毒性腦炎的腦脊液淋巴樣細胞中可發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)包涵體,結(jié)核性腦膜炎時其腦脊液細胞數(shù)可增加,但超過500106L者較為罕見,在發(fā)病初期以中性粒細胞為主,但很快下降,由于患
10、者多在發(fā)病數(shù)天后才來診治,因此首次腰穿時,腦脊液中中性粒細胞已趨下降而淋巴細胞為多。粒細胞、淋巴及漿細胞同時存在是結(jié)核性腦膜炎的特點。新型隱球菌性腦膜炎可在腦脊液中直接發(fā)現(xiàn)隱球菌,必要時用印度墨汁染色予以確診。11.3中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤腦脊液細胞總數(shù)可正常或稍高,以淋巴細胞為主。腦脊液中能否找到腫瘤細胞取決于腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和采集標本的多少。同時也與檢查者技術(shù)水平有關(guān),采用細胞正玻片離心沉淀儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細胞
11、是白血病腦膜轉(zhuǎn)移的證據(jù)。11.4腦血管病腦脊液細胞學檢查有助于鑒別腦出血或腰穿損傷性出血。前者在早期病后數(shù)小時可見大量紅細胞和明顯中性粒細胞增多,23天內(nèi)達高峰,在腦脊液中可發(fā)現(xiàn)吞噬細胞,出血后數(shù)小時至第3天可出現(xiàn)含有紅細胞的吞噬細胞,5天后可見含鐵血黃素吞噬細胞。如為穿刺損傷性出血則不會有上述反應。11.5腦寄生蟲病不僅腦脊液細胞數(shù)升高,并可見嗜酸性粒細胞增多,約占白細胞的60%或更高。漿細胞增多為另一特點。如將腦脊液離心沉淀物全傾倒
12、在玻片上,在顯微鏡下檢查可發(fā)現(xiàn)血吸蟲卵、阿米巴原蟲、弓形體、旋毛蟲的幼蟲等,甚至還可找至細粒棘球絳蟲的頭節(jié)或頭鉤。11.6紅斑狼瘡有時可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細胞。劉云的永生不死鍛煉方法,真是凈化增強“腦脊液”。12.方法學評價:潘氏試驗所需標本量少,靈敏度高,試劑易得,操作簡便,結(jié)果易于觀察,其沉淀多少與蛋白質(zhì)含量成正經(jīng)比,部分正常腦脊液亦可出現(xiàn)極弱陽性結(jié)果。RossJine試驗主要沉淀的是球蛋白,但敏感性較弱,NoneApett試驗
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