細(xì)胞計(jì)數(shù)方法------細(xì)胞計(jì)數(shù)板法

1、細(xì)胞計(jì)數(shù)方法細(xì)胞計(jì)數(shù)方法細(xì)胞計(jì)數(shù)板法細(xì)胞計(jì)數(shù)板法實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí)，通過(guò)測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目，即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。具體操作：具體操作：1.將計(jì)數(shù)板及蓋片擦拭干凈，并將蓋片蓋在計(jì)數(shù)板。2.將細(xì)胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。3.計(jì)算板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。然后按公式計(jì)

2、算：細(xì)胞數(shù)mL=四大格細(xì)胞總數(shù)410個(gè)ml4(注：當(dāng)細(xì)胞很多時(shí)，可在四個(gè)格中選一定數(shù)目較平均的小格，由于每大格中有16個(gè)小格，然后計(jì)左側(cè)和上方的細(xì)胞數(shù)，求出每小格的細(xì)胞數(shù)，取平均值m，m16即每個(gè)格的平均值。所以，細(xì)胞密度=m1610個(gè)ml)4說(shuō)明：說(shuō)明：公式中除以4，因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。公式中乘以10因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：41.0mm（長(zhǎng)）1.0mm（寬）0.1mm（高）=0.1mm而1ml=1000ul=1000m

3、m33（注意：注意：鏡下偶見有兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算，若細(xì)胞團(tuán)10%以上，說(shuō)明分散不好，需重新制備細(xì)胞懸液。）================================================細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板的使用一、血球計(jì)數(shù)板一、血球計(jì)數(shù)板基本構(gòu)造基本構(gòu)造血球計(jì)數(shù)板是一塊特制的厚型載玻片，載玻片上有四個(gè)槽構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽分隔成兩半，每個(gè)半邊上面各刻有一小方格網(wǎng)

4、，每個(gè)方格網(wǎng)共分九個(gè)大格，中央的一大格作為計(jì)數(shù)用，稱為計(jì)數(shù)區(qū)。計(jì)數(shù)區(qū)的刻度有兩種：一種是計(jì)數(shù)區(qū)分為16個(gè)大方格（大方格用三線隔開），而每個(gè)大方格又分成25個(gè)小方格；另一種是一個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)分成25個(gè)大方格（大方格之間用雙線分開），而每個(gè)大方格又分成16個(gè)小方格。但是不管計(jì)數(shù)區(qū)是哪一種構(gòu)造，它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，即計(jì)數(shù)區(qū)都由400個(gè)小方格組成。格）。為了保證計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，避免重復(fù)計(jì)數(shù)和漏記，在計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)沉降在格線上的細(xì)胞的統(tǒng)計(jì)應(yīng)有統(tǒng)一的規(guī)定。如

5、菌體位于大方格的雙線上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線，以減少誤差。即位于本格上線和左線上的細(xì)胞計(jì)入本格，本格的下線和右線上的細(xì)胞按規(guī)定計(jì)入相應(yīng)的格中。見下圖：即本格中計(jì)數(shù)細(xì)胞為3個(gè)。6對(duì)于出芽的酵母菌，芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。每個(gè)樣品重復(fù)計(jì)數(shù)23次（每次數(shù)值不應(yīng)相差過(guò)大，否則應(yīng)重新操作），按公式計(jì)算出每mL（g）菌懸液所含細(xì)胞數(shù)量。7測(cè)數(shù)完畢，取下蓋玻片，用水將細(xì)胞計(jì)數(shù)板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，

6、以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機(jī)吹干，放入盒內(nèi)保存。三、細(xì)胞計(jì)數(shù)板三、細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)公式計(jì)數(shù)公式1、16格25格的細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：細(xì)胞數(shù)ml=100小格內(nèi)細(xì)胞個(gè)數(shù)10040010000稀釋倍數(shù)1、25格16格的細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：細(xì)胞數(shù)ml=80小格內(nèi)細(xì)胞個(gè)數(shù)8040010000稀釋倍數(shù)四、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來(lái)自哪些方面四、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的誤差主要來(lái)自哪些方面應(yīng)如何盡量減少誤應(yīng)如何盡量減少誤差力求準(zhǔn)確力求準(zhǔn)確血細(xì)