微生物標(biāo)本正確采集及運(yùn)送

1、微生物標(biāo)本正確采集及運(yùn)送,標(biāo)本采集的意義,明確診斷真正致病菌病情追蹤指導(dǎo)制定治療措施抗生素選擇抗生素更換預(yù)后推測(cè)減少細(xì)菌耐藥性,,,,,,,,結(jié)果無(wú)意義,規(guī)范化采集,不符合要求,,提供重要臨床感染信息,處理失當(dāng)造成 污染,誤導(dǎo)臨床,,,,標(biāo)本,,,,檢驗(yàn)前誤差,檢驗(yàn)前誤差：病人準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本儲(chǔ)存及運(yùn)送不規(guī)范,Clin Chem. 2007 Jul;53(7):1338-42. Epub 2007 May 24

2、Clin Chem Lab Med. 2006;44(6):750-9,檢驗(yàn)前誤差是導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果失真的最主要原因之一,細(xì)菌診斷標(biāo)本采集原則,用抗菌素前采集，不同時(shí)期、不同標(biāo)本采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作，避免污染采集真正病灶處且足量標(biāo)本→避免假陰性標(biāo)本需新鮮，不可添加防腐劑立即送檢→愈新鮮標(biāo)本愈容易分離病原菌,痰液標(biāo)本采集,采集時(shí)間：晨痰，因晨痰量多，且含菌量也多先以冷開(kāi)水漱口刷牙，有假牙者應(yīng)取下假牙做深呼吸數(shù)次后收腹用力深咳將

3、痰吐到寬口無(wú)菌加蓋容器2小時(shí)內(nèi)送達(dá)檢驗(yàn)室（未能及時(shí)送檢于4℃保存）（苛養(yǎng)菌如肺炎鏈球菌減少，正常菌過(guò)度生長(zhǎng)）年老體弱、無(wú)力咳痰、下呼吸道分泌物不多時(shí),怎辦？,痰標(biāo)本采集,耐心宣講，取得患者合作翻身叩背，附著痰液松動(dòng)易于排出霧化吸入生理鹽水或高滲鹽水，使痰液稀薄，痰液增多，而易于排出,標(biāo)本質(zhì)量,帶血痰,唾液,膿痰,白色粘液痰,黃色粘液樣痰,唾液痰,,,粘液絲,,衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》,鱗狀上皮細(xì)胞SBC>2

4、5 白細(xì)胞WBC25 /每低倍視野為合格痰 =接受培養(yǎng),衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》,鱗狀上皮細(xì)胞SBC>25 白細(xì)胞WBC>25 /每低倍視野鱗狀上皮細(xì)胞SBC10-25 白細(xì)胞WBC>25 /每低倍視野,衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》,白細(xì)胞吞噬革蘭陰性桿菌 / 革蘭陽(yáng)性球菌未見(jiàn)白細(xì)胞吞噬,,,血液標(biāo)本采集,采集時(shí)機(jī)消毒規(guī)范雙側(cè)雙瓶,最佳采血時(shí)機(jī)-1,,研究指出：在使用抗生素前采血

5、，陽(yáng)性率是用藥后采血的2.2倍！,最佳采血時(shí)機(jī)-2,病人準(zhǔn)備：正確消毒方式,培養(yǎng)瓶消毒：以75%酒精消毒瓶口皮膚消毒：采血點(diǎn)由內(nèi)往外，以75%酒精用力涂抹皮膚內(nèi)往外劃圈用力涂抹皮膚，待干燥以達(dá)殺菌效果（等待時(shí)間：碘伏約1-3分鐘，碘酊約30秒）75%酒精由內(nèi)往外去除碘液，避免污染,血培養(yǎng)采集,綠色蓋子：含活性炭需氧橘色蓋子：含活性炭厭氧紫色蓋子：普通厭氧藍(lán)色蓋子：普通需氧黃色蓋子：普通小兒瓶,血培養(yǎng)采集,雙側(cè)雙瓶,為何

6、？,提高陽(yáng)性率,判斷污染與否,影響血培養(yǎng)陽(yáng)性率因素,,血培養(yǎng)的組合與檢出率,J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,致病菌和污染菌的鑒別,真正菌血癥：分離有毒力的菌株肺炎鏈球菌克雷伯菌屬假單胞菌屬金黃色葡萄球菌腸桿菌科念珠菌屬存在危險(xiǎn)因素免疫抑制假體手術(shù)留置導(dǎo)管多部位分離相同菌株,污染菌培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)后續(xù)培養(yǎng)沒(méi)有可重復(fù)性分離多種微生物臨床情況不提示存在感染分離皮膚定植菌凝

7、固酶陰性葡萄球菌：類(lèi)白喉?xiàng)U菌桿菌屬,3天陰性的血培養(yǎng)->需重送檢,有臨床意義的分離菌：在2天內(nèi)被檢出占94%，在3天內(nèi)被檢出占97%,J Clin Microbiol. 2005; 43:2506-2509,97％,,,做厭氧血培養(yǎng)的價(jià)值？,只做需氧瓶不做厭氧瓶培養(yǎng)19%-29%的菌株不能發(fā)現(xiàn)5%的血培養(yǎng)延遲1天報(bào)告陽(yáng)性結(jié)果采集厭氧瓶同時(shí)增加采血量每增加1 ml血液?陽(yáng)性率增加3%Clin Infect Dis

8、, 1999,29:1309-1311中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23：285Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219,采集方式嚴(yán)格無(wú)菌皮膚消毒穿刺針穿刺抽取無(wú)菌試管或針筒直接送檢(亦可直接打入血瓶?jī)?nèi)送檢-同時(shí)具增菌功能，縮短TAT)即時(shí)送檢、不能冷藏做厭氧培養(yǎng)輸送過(guò)程嚴(yán)禁接觸環(huán)境氧,無(wú)菌體液采集,腦脊液采集,采集方式：碘酒、酒精消毒皮膚L3，L4間穿刺入蜘蛛膜

9、穿刺后分裝3-5 ml至無(wú)菌試管檢測(cè)細(xì)菌、病毒 >1 ml檢測(cè)真菌、抗酸菌> 2 ml注意事項(xiàng)：迅速送至實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌培養(yǎng)保存于35℃溫箱或室溫，因嗜血桿菌及奈瑟氏菌對(duì)溫度敏感檢測(cè)病毒、真菌、分支桿菌4℃保存,L3 L4 L5,尿液,清潔中段尿（自然排尿）直接導(dǎo)尿?可能下尿道細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染常規(guī)法消毒尿道外圍以無(wú)菌方式將導(dǎo)管插入膀胱恥骨上膀胱穿刺法 (厭氧檢查適用)導(dǎo)管消毒后以空針抽取5-10m

10、l尿液有尿路感染癥狀但中段尿培養(yǎng)菌數(shù)很少小兒收集包留置尿?qū)Ч苁占∣ 穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液X 尿液收集袋中采集,女性肥皂清洗尿道外圍以無(wú)菌紗布擦拭用手分開(kāi)大陰唇先排出前段尿液，再以無(wú)菌寬口容器收集中段尿液,男性肥皂清洗尿道外圍以無(wú)菌紗布擦拭扶起莖陰翻上包皮先排出前段尿液，再以無(wú)寬口容器收集中段尿液,最好留取早晨清潔中段尿標(biāo)本,自然排尿-中段尿,尿標(biāo)本采集注意事項(xiàng),留取尿培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)需以無(wú)菌操作

11、注明是否使用抗生素女患者月經(jīng)期不宜留取尿標(biāo)本會(huì)陰部分泌物過(guò)多，應(yīng)先清潔沖洗再收集4-8℃保存不可超過(guò)24小時(shí)標(biāo)本如不能立即送檢，應(yīng)存放于冰箱,生殖泌尿道標(biāo)本,依不同感染種類(lèi)和病變特征采集不同標(biāo)本尿道標(biāo)本，用生理鹽水局部清洗，無(wú)菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒，輕輕旋轉(zhuǎn)拭子外陰部糜爛、潰瘍，生理鹽水清洗后取病灶邊緣分泌物陰道和宮頸口分泌物須在窺陰器下用長(zhǎng)拭子采集子宮內(nèi)分泌物用無(wú)菌導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜，插入子宮后再刺穿

12、該膜予負(fù)壓吸引，可減少陰道菌群污染女性盆腔膿腫，應(yīng)局部消毒陰道由子宮陷凹處進(jìn)針抽取,生殖泌尿道標(biāo)本,2支無(wú)菌棉花拭子分2次收集，其中一支直接涂片發(fā)育期或成年婦女抹片：尿道口、子宮頸或直腸年幼女童：外陰部位取標(biāo)本男性：前列腺液需進(jìn)行前列腺按摩獲取懷疑急性淋病：尿道分泌物懷疑慢性淋病：前列腺或精囊注意事項(xiàng)：淋菌等病原菌檢測(cè)需避免正常菌污染，取時(shí)盡量小心淋菌低溫會(huì)死亡，采取后請(qǐng)勿延誤，速送細(xì)菌室培養(yǎng),傷口、膿瘍、膿,以70%

13、 酒精消毒采檢表面開(kāi)放式傷口：以棉棒采取深部標(biāo)本封閉式傷口：以空針抽?。s1ml）如需厭氧培養(yǎng)，避免接觸空氣并及時(shí)送檢，最好床邊接種，可直接打入?yún)捬跹浚ㄔ鼍Ч眩?糞便,自然排便挑取帶膿或血部分（> 2g）液狀糞便取絮狀物（> 2ml）置于無(wú)菌容器或置于保存液或增菌液送檢直腸拭子肥皂、水和70%的酒精清潔肛門(mén)周?chē)薨舨迦肜s肌約 4-5cm（幼兒約2-3cm）輕輕的旋轉(zhuǎn)數(shù)圈后送檢,注意事項(xiàng),注意事項(xiàng)：

14、調(diào)取糞便的粘液、組織、膿或血液部分送檢前與微生物科聯(lián)絡(luò)，注明培養(yǎng)項(xiàng)目。沙門(mén)和志賀菌、致病性大腸桿菌、弧菌、念珠菌、菌群失調(diào)（難辨梭菌）懷疑沙門(mén)菌感染應(yīng)在發(fā)病2周后采集標(biāo)本,標(biāo)本運(yùn)送、儲(chǔ)存溫度,標(biāo)本送檢時(shí)間限制,15 分鐘,導(dǎo)管CSF眼結(jié)膜/角結(jié)膜檢體體液胃液羊水鼻咽組織,標(biāo)本送檢時(shí)間限制,2小時(shí),膿瘍、傷口、濃血液培養(yǎng)耳直腸拭子生殖道標(biāo)本痰、呼吸道標(biāo)本尿液,所有送檢的檢體都不要超過(guò)2小時(shí)的時(shí)間,病原微生物