腫瘤標志物檢測的影響因素

1、腫瘤標志物檢測的影響因素,郴州市第一人民醫(yī)院兒童醫(yī)院檢驗科李勝濤,2015.9.18,主要內容,一、腫瘤標志物的定義二、 理想的腫瘤標志物三、影響血液和體液中腫瘤標志物濃度的因素四、腫瘤標志物檢測的影響因素,惡性腫瘤、腦血管疾病、心臟病 =高死亡率！,腫瘤早期診斷早期根治的重要性,腫瘤是嚴重威脅人類健康的重大疾病，死亡率高，因此人們害怕腫瘤。而防治腫瘤的最好辦法是早期診斷、早期治療。如胃癌早期行根治術

2、，5年生存率達90%，如侵及肌層則下降為50-70%，如侵入漿膜則僅為8-17%。,所以人們對腫瘤標志物的檢測寄予了極大的希望。那么腫瘤標志物測定能否達到早期診斷的目的？能否對一般人群進行篩查？其臨床意義到底有多大？評價有多高？引起了醫(yī)學界的爭議。,目前臨床應用中常見的問題1. 對腫瘤標志物在腫瘤診斷中的作用認識和評價不一致，甚至錯誤。2. 糾正“不用”和“濫用”兩個極端。,一、腫瘤標志物的定義 腫瘤標志物（tumor ma

3、rker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身所產生的或者是由機體對腫瘤細胞反應而產生的，反映腫瘤存在和生長的一類物質，包括蛋白質、激素、酶（同工酶）、多胺等?？稍谀[瘤患者血液或體液中檢測到腫瘤標志物。,二、 理想的腫瘤標志物應具有： ⑴ 靈敏度100%； ⑵ 特異性100%； ⑶ 器官特異性； ⑷ 與腫瘤的大小或分期有關； ⑸ 與預后有關； ⑹ 監(jiān)測腫瘤的復發(fā)。 然而目前所

4、應用的腫瘤標志物均未達到上述要求，但如正確合理使用，仍有很大臨床價值，關鍵是要正確評價腫瘤標志物檢測的臨床意義。,三、影響血液和體液中腫瘤標志物濃度的因素 1．腫瘤的大小和腫瘤細胞的數(shù)目：腫瘤越大細胞越多，腫瘤標志物的濃度越高。,2．腫瘤細胞合成和分泌腫瘤標志物的速度：腫瘤細胞合成和分泌腫瘤標志物的速度越快，血液循環(huán)中腫瘤標志物的濃度越高。 3．腫瘤組織的血液供應好壞：若血液供應差，血液循環(huán)中腫瘤標志

5、物的濃度低。,4．腫瘤細胞是否有壞死和壞死的程度：腫瘤細胞壞死后，釋放出大量腫瘤標志物，使腫瘤局部和血液中腫瘤標志物的濃度升高。 5．腫瘤細胞的分化程度和腫瘤的分期：腫瘤細胞分化程度越差，惡性程度越高，越晚期，產生的腫瘤標志物越多。,6．腫瘤細胞是否表達和合成腫瘤標志物：有些腫瘤細胞不表達、不攜帶腫瘤標志物，則在血液和體液中就檢測不到。 7．腫瘤標志物在體內的降解和排泄速度：若肝、腎功能差，排泄

6、速度慢，則腫瘤標志物在體內可異常升高。,四、腫瘤標志物檢測的影響因素,㈠ 分析前 1. 標本采集對檢測結果的影響: ⑴ 前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、導尿和直腸鏡檢查后，血液PSA和PAP值可升高(宜在此操作過后一周取樣）； ⑵ 肝、腎功能異常和膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成如CEA、ALP、GGT等濃度增高。,⑶ 某些藥物會影響腫瘤標志物的濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時可抑制PSA產生，導致PSA假陰性結果。⑷ 唾液和汗液

7、污染標本可使鱗狀上皮細胞癌相關抗原（SCC）、CA 19-9濃度升高，CEA也會輕度升高。,2.標本保存對檢測結果的影響: ⑴ 血液標本采集后應及時離心，若從采血到血清分離的間隔時間﹥60min， NSE濃度會從血小板中釋放而增高；保存於4℃冰箱中，24小時內測定；如在2～3個月內測定，則應-20℃保存，避免反復凍融。 ⑵ 酶類和激素類腫瘤標志物不穩(wěn)定，易降解，應及時測定或低溫保存。,⑶ 由于紅細胞和血小板中也存在神經元特異性

8、烯醇化酶（NSE），因此，樣本溶血可使血液中NSE濃度增高（RBC中有大量的NSE，1%的溶血可使血清NSE升高5ug/L)。 黃疸血樣本，會引起PSA的檢測值升高。,㈡ 分析中 1.測定方法和試劑對檢測結果的影響： 從方法學來看，腫瘤標志物測定方法很多，有放射免疫測定法，酶聯(lián)免疫測定法，化學發(fā)光免疫測定法等，每種測定方法有自己的精密度和重復性，但手工操作的方法重復性較差，誤差比較大，操作時要特別認真；用

9、自動化儀器進行測定，重復性好，誤差小。,有研究報道，使用12種不同的CEA試劑盒檢測某一混合血清中CEA的濃度，結果其差異超過100%。導致分析間誤差的主要原因是沒有測定的標準化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分、校正品和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進行測定。,2. 交叉污染對檢測結果的影響： 當測定非常高濃度標本時，交叉污染成為一個導致假陽性的潛在問題。所以應不時地復查有無標本被

10、交叉污染。,3. 嗜異性抗體對檢測結果的影響： 大多數(shù)腫瘤標志物的測定中常使用一對鼠單克隆抗體來與腫瘤抗原反應，如果病人血清中存在嗜異性抗體（特別是人抗鼠抗體），它可能在兩種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用，導致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標志物濃度增高的假象。,㈢ 分析后： 1．參考值范圍：不同標本如血液、尿液、胸、腹水等，必須有不同的參考值。 不同地區(qū)、不同人群、不同方

11、法、不同試劑和設備應建立自己的參考值范圍。,治療,,0 1 2 3 4 5 6月,,2．病人基礎測定值的變化，對于結果的分析極有價值。故應監(jiān)測病人治療前、治療中和治療后各個階段腫瘤標志物含量的變化，最好畫一張腫瘤標志物含量的變化的曲線圖，以便綜合分析。,3．一般病人的結果在排除檢測方法引起的誤差后，上升或下降25％都有臨床價值。對于測定結果特別異常的標本必須復查，以防測定

12、誤差。 4．由于腫瘤標志物測定其臨床意義的特殊性，必須加強與臨床的交流和溝通當改變腫瘤標志物檢測方法和試劑時，必須通知臨床，否則會影響結果的判斷。,,5．必須知道腫瘤標志物的半壽期（手術后降到一半所需的時間），這有助解釋某些腫瘤標志物，如AFP和hCG 的濃度變化，對于臨床療效判斷有重要意義。,主要腫瘤標志物經手術后半壽期,,,,,五、腫瘤標志物的聯(lián)合應用,1.有關標志物聯(lián)合檢測 -- 提高特異性2.陽性標志物動態(tài)觀察

13、-- 提高準確性,腫瘤標志物檢測的目的是要達到腫瘤的早期診斷，早期治療，因此，希望找到特異性強，敏感性高的腫瘤標志物。腫瘤標志物的聯(lián)合應用有助于提高檢測的敏感性。,一種腫瘤可分泌多種腫瘤標志物，而不同的腫瘤或同種腫瘤的不同組織類型可有相同的腫瘤標志物，而且在不同的腫瘤患者體內，腫瘤標志物的質和量變化也較大。因此，單獨檢測一種腫瘤標志物，可能會因為測定方法的靈敏度不夠而出現(xiàn)假陰性，聯(lián)合檢測多種腫瘤標志物有利于提高檢出的陽性率。為此，選擇一

14、些特異性較高，可以互補的腫瘤標志物聯(lián)合測定，對提高腫瘤的檢出率是有價值的。,一個腫瘤細胞經過10次分裂能增殖至103個細胞，達1ug重的微小病灶，再經10次分裂，達106個腫瘤細胞，重約1mg。 用生物物理方法，如X線，CT和超聲等檢查，只有當腫瘤大小至少到1～2cm時才能發(fā)現(xiàn)，而此時腫瘤細胞已達10億（109）甚至更多。 用免疫學方法檢測時，腫瘤細胞需達到1百萬個（106）才可檢出，但此時可能已經發(fā)生腫瘤轉移，而且也

15、不是所有腫瘤在此時都能被檢出。,常用腫瘤標志物聯(lián)合檢測的臨床應用腫瘤 首選標志物 補充標志物 肺癌 CEA、NSE、CYFRA21-1 TPA、SCC、ACTH、降鈣素、TSA肝癌 AFP AFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌 CA15-3、CEA

16、 CA549、hCG、降鈣素、鐵蛋白 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA242前列腺癌 PSA、f-PSA PAP結腸直腸癌 CEA CA19-9、CA50 胰腺癌 CA19-9

17、 CA50、CEA、CA125 卵巢癌 CA125 、CA724 CEA、hCG、CA19-9 睪丸腫瘤 AFP、hCG宮頸癌 SCC CA125、CEA、TPA 膀胱癌 CYFRA21-1