腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測及質(zhì)量控制

1、腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測及質(zhì)量控制,仙桃一醫(yī)檢驗(yàn)科　陳杰,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報(bào)道，腫瘤疾病的發(fā)病率在逐年上升，并有年輕化的趨勢；估計(jì)2020年全球腫瘤病人將增加到1500萬。,WHO權(quán)威發(fā)布,世界衛(wèi)生組織（WHO）指出：若能早期診斷并及時(shí)治療，90%～95%的腫瘤是可以治愈的。其原理是，一般腫瘤細(xì)胞在癌前病變時(shí)，

2、會(huì)產(chǎn)生表達(dá)腫瘤異常蛋白質(zhì)，多數(shù)腫瘤從癌前病變發(fā)展到0.5 cm 以上的占位性病變需要 5 a～10 a的時(shí)間。如果能夠在這段時(shí)間內(nèi)運(yùn)用腫瘤標(biāo)志物檢測技術(shù)，早期檢測到患者血液中腫瘤所表達(dá)的異常蛋白質(zhì)，就可以早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷，并獲得早期治療（三早）的良好效果。,腫瘤診斷目前主要依賴影像學(xué)檢查、生化學(xué)、細(xì)胞學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)。后者主要是檢測血清中腫瘤標(biāo)志物，由于敏感性、特異性相對較高，較為經(jīng)濟(jì)，檢查時(shí)痛苦少，適于大批量標(biāo)本檢測，腫瘤標(biāo)志物的開發(fā)

3、和應(yīng)用受到了廣泛的關(guān)注。,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,一、什么是腫瘤標(biāo)志物,腫瘤標(biāo)志物（tumor markers，TM）　　　是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放，或由機(jī)體對腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的標(biāo)志腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。 主要包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺、癌基因產(chǎn)物等。,TM的發(fā)現(xiàn)概況,第一代（腫

4、瘤代謝產(chǎn)物）1846 Bence-Jones 尿腫瘤特異蛋白（Ig輕鏈）1928 Zoudek （人絨毛膜促性腺激素）HCG 1932 Cushing 腫瘤異位激素（ACTH）1959 Market PAP，AKP，LDH及同工酶1960 Newell 腫瘤畸變?nèi)旧w,TM的發(fā)現(xiàn)概況,第二代（腫瘤自身抗原）1963 Abelev AFP1965

5、 Gold，F(xiàn)reedman CEA,TM的發(fā)現(xiàn)概況,第三代（糖類抗原）1977 Kato SCC （糖蛋白）1979 美Kaprowski CA19-9（糖脂）1981 美NCI CA72-4（糖蛋白）1983 Lindholm CA50（糖脂-節(jié)苷脂）1983 Base，Klug CA12-5（糖蛋白）1985 Tobies

6、CA15-3（糖蛋白）,腫瘤標(biāo)志物的分類,按腫瘤標(biāo)志物來源分類 腫瘤組織產(chǎn)生的標(biāo)志物：胚胎抗原、同工酶、激素、組織特異性抗原、粘蛋白、糖蛋白、糖脂、癌基因及其產(chǎn)物、多胺類等。 腫瘤與宿主相互作用產(chǎn)生的標(biāo)志物：血清鐵蛋白、免疫復(fù)合物、同工酶、白細(xì)胞介素受體、腫瘤壞死因子等。按腫瘤標(biāo)志物本身的化學(xué)特性分類 蛋白質(zhì)類、糖脂類、酶類、激素類。,理想的腫瘤標(biāo)志物,①靈敏度高，使腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷； ②

7、特異性好，即腫瘤患者為陽性，而非惡性腫瘤患者為陰性，能對良、惡性腫瘤進(jìn)行鑒別； ③能對腫瘤進(jìn)行定位，即具有器官特異性； ④與病情嚴(yán)重程度、腫瘤大小或分期有關(guān)，即腫瘤越大或越晚期，腫瘤標(biāo)志物濃度越高；⑤監(jiān)測腫瘤治療效果，即腫瘤標(biāo)志物濃度增高或降低與治療效果密切相關(guān)；,理想的腫瘤標(biāo)志物,⑥監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)，即腫瘤治療后腫瘤標(biāo)志物濃度降低，腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)明顯升高； ⑦預(yù)測腫瘤的預(yù)后，即腫瘤標(biāo)志物濃度越高，預(yù)后越差，反之亦然 ⑧存在于體液特

8、別是血液中易于檢測。 　　 　　然而，目前所應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物均未達(dá)到上述要求，但如正確合理使用，仍有很大臨床價(jià)值，關(guān)鍵是要正確評價(jià)腫瘤標(biāo)志物檢測的臨床意義。,腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用,正常人群中的篩查有癥狀者的輔助診斷癌癥的臨床階段的分期疾病進(jìn)程的預(yù)后指標(biāo)評估治療方案判斷癌癥是否復(fù)發(fā)治療應(yīng)答的監(jiān)測,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測

9、,二、常用的腫瘤標(biāo)志物,甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）β2-微球蛋白（ β2-MG）鐵蛋白（SF）細(xì)胞角質(zhì)素片段抗原21-1（CYFRA21-1）鱗狀上皮癌相關(guān)抗原（SCC-Ag）前列腺特異抗原（PSA）組織多肽抗原（TPA）糖類抗原（CA50、CA125、CA15-3、CA199、CA242、CA72-4）神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）前列腺酸性磷酸酶（PAP）激素類腫瘤標(biāo)志物,蛋白類腫瘤標(biāo)志物,糖脂類腫

10、瘤標(biāo)志物,酶及同工酶類腫瘤標(biāo)志物,激素類腫瘤標(biāo)志物,,,,,,,,甲胎蛋白（AFP）,胎兒發(fā)育早期，由肝臟和卵黃囊合成的一種血清糖蛋白，電泳時(shí)位于白蛋白和α1球蛋白之間，胎兒出生后不久即逐漸消失。成人血清中含量甚微。 參考值：400ng/ml 　近20% AFP正常 ?。?）病毒性肝炎、肝硬化絕大部分AFP<400ng/ml,甲胎蛋白（AFP）,（3）內(nèi)胚層癌、畸胎瘤、睪丸癌、卵巢

11、癌、胃癌與其伴肝轉(zhuǎn)移者AFP可升高 　（4）婦女妊娠3個(gè)月后，AFP開始升高，7-8個(gè)月時(shí)達(dá)高峰，一般在400ng/ml以下，分娩后3周恢復(fù)正常 妊娠期AFP異常升高，胎兒神經(jīng)管缺損、畸形？,癌胚抗原（CEA）,是一種可溶性糖蛋白，胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟。胃腸道惡性腫瘤時(shí)可見血清CEA升高，在乳腺癌、肺癌及其他惡性腫瘤中也可出現(xiàn)表達(dá)，并分泌于體液中。 參考值：<5ng/ml,癌胚抗原（CE

12、A）,臨床意義： （1）CEA升高主要見于結(jié)/直腸癌、胃癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮及子宮頸癌、泌尿系腫瘤等，其他惡性腫瘤也有不同程度的陽性率。 （2）肝硬化、肝炎、肺氣腫、腸道憩室、直腸息肉、結(jié)腸炎等良性病CEA可升高。 （3）癌癥越晚期，CEA越高。,癌胚抗原（CEA）,（4）體積越大，CEA越高（5）轉(zhuǎn)移者，CEA高（6）腺癌敏感，其次是鱗癌和低分化癌，分化程度越高陽性率越高（7）正常

13、人吸煙者CEA升高（8）癌癥病人的胸、腹水、消化液、分泌物中的CEA常升高,前列腺特異抗原（PSA）,PSA是由前列腺腺泡和導(dǎo)管的上皮細(xì)胞分泌的一種單鏈糖蛋白，存在于前列腺上皮細(xì)胞的胞漿中。正常人血清內(nèi)含量極微。分為少量的游離型PSA（f-PSA），大量的復(fù)合型PSA（c-PSA）。參考值：<35歲 <1.6 ng/ml 　　　36-45歲 <2.0 ng/ml 　　　46-55歲 <3

14、.1 ng/ml 　　　56-66歲 <5.4 ng/ml,不同年齡需要不同的Cut-off,PSA血清檢查的現(xiàn)實(shí)情況,PSA的正常值為<4ng/ml在2-10ng/ml有交叉情況假陽性會(huì)在4-10ng/ml出現(xiàn)65%良性錯(cuò)判假陰性會(huì)在2-4ng/ml出現(xiàn)20%癌癥漏檢,前列腺特異抗原（PSA）,臨床意義： PSA是目前廣泛應(yīng)用于前列腺癌的腫瘤標(biāo)志物。血清中的PSA絕大部分來源于前列腺，具有

15、前列腺組織特異性而不具前列腺癌特異性。 良性前列腺增生癥（BPH）時(shí)，血清PSA可增高；小型前列腺癌時(shí)PSA可無明顯增高，即血清PSA在前列腺癌診斷中的敏感性和特異性仍有待提高。,前列腺特異抗原（PSA）,（1）前列腺癌血清PSA升高，陽性率在50%-80%?。?）前列腺增生、前列腺炎、腎臟和泌尿生殖系統(tǒng)的疾病也可見血清PSA升高　　　良性前列腺增生血清中游離PSA的比例是顯著增高的。,前列腺特異抗原（PSA）,（3）P

16、SA水平隨年齡的增加而增加，一般以每年0.04ug/L的速度遞增。（4）PSA水平與前列腺的體積有關(guān)，但兩者并不具有相關(guān)性。（5）有關(guān)前列腺損傷的各種檢查均可引起PSA的明顯升高。,前列腺特異抗原（PSA）,雖然婦女沒有前列腺器官，PSA也存在于幾種女性組織和體液中，具有臨床應(yīng)用價(jià)值?！　　SA陽性乳腺癌患者治愈率較高?！　　∪轭^溢液中PSA的水平提示患乳腺癌的危險(xiǎn)性。,糖類抗原50（CA50）,CA50是1983年Lin

17、dholm等從抗人結(jié)腸癌、直腸癌Colo-205細(xì)胞株的一系列單克隆抗體中篩選出一株對結(jié)腸癌、直腸癌有強(qiáng)烈反應(yīng)，但不與骨髓瘤細(xì)胞及血淋巴細(xì)胞反映的單克隆抗體所能識別的抗原。CA50存在于細(xì)胞膜內(nèi)。是一種廣譜的腫瘤標(biāo)志物 。　　抗原決定簇為唾液酸Lea血型物質(zhì)與唾液酸-N-四氧神經(jīng)酰胺。　參考值：<20U/ml,糖類抗原50（CA50）,臨床意義：（1）見于肝、肺、胃、結(jié)/直腸、胰腺、膽囊、腎、子宮、卵巢、乳腺、膀胱、前列腺癌

18、、淋巴、黑色素瘤等（2）肺炎、腎炎、胰腺炎、結(jié)腸炎等某些感染性疾病血清CA50升高（3）某些潰瘍性疾病、自身免疫性疾病也有CA50升高的現(xiàn)象。,糖類抗原125（CA125）,CA125是1983年Bast等從上皮性卵巢癌檢測出可被單克隆抗體OC125結(jié)合的一種糖蛋白?！　　　　　⒖贾担?lt;35U/ml,糖類抗原125（CA125）,臨床意義：（1）卵巢癌血清CA125升高，陽性率61.4%； 治療有效CA125下降

19、；復(fù)發(fā)CA125升高先于癥狀；　　CA125是判斷療效和復(fù)發(fā)的良好指標(biāo)。（2）其他非卵巢惡性腫瘤也有一定的陽性率。 宮頸癌、宮體癌、子宮內(nèi)膜癌 43% 胰腺癌50% 肺癌41% 胃癌47% 結(jié)/直腸癌34% 乳腺癌40%,糖類抗原125（CA125）,（3）其他非惡性腫瘤，也有不同程度的升高，但陽性率較低；如子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、卵巢囊腫、胰腺炎、肝炎、肝硬化等（4）在許多良性和惡性胸、腹水中發(fā)現(xiàn)CA125升

20、高（5）早期妊娠，也有CA125升高,糖類抗原15-3（CA15-3）,CA15-3是1984年Hilkens等從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成的小鼠單克隆抗體（115-DB）；1984年Kufu等自肝轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞膜制成單克隆抗體（DF-3），故命名CA15-3?！　　θ橄侔┑脑\斷和治療隨訪有一定價(jià)值，但在乳腺癌的早期敏感性較低是其不足。參考值：<31U/ml,糖類抗原15-3（CA15-3）,臨床意義：（1）乳腺

21、癌患者CA15-3升高， 乳腺癌初期的敏感性 60% 乳腺癌晚期的敏感性 80%　　　　　CA15-3對乳腺癌的療效觀察、預(yù)后判斷，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的診斷有重要價(jià)值。,糖類抗原15-3（CA15-3）,（2）其他惡性腫瘤也有一定的陽性率如：肺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、原發(fā)性肝癌等。（3）肝臟、胃腸道、肺、乳腺、卵巢等非惡性腫瘤性疾病，陽性率一般<10%。,糖類抗原19-9（C

22、A19-9）,CA19-9是一種粘蛋白型的糖類蛋白腫瘤標(biāo)志物，為細(xì)胞膜上的糖脂質(zhì)，分子量大于1000kD。因由鼠單克隆抗體116NS19-9識別而命名。是迄今報(bào)道的對胰腺癌敏感性最高的標(biāo)志物。在血清中它以唾液粘蛋白形式存在，分布于正常胎兒胰腺、膽囊、肝、腸和正常成年人胰腺、膽管上皮等處。是存在于血液循環(huán)的胃腸道腫瘤相關(guān)抗原，但正常人組織中含量甚微。參考值：<35U/ml,糖類抗原19-9（CA19-9）,臨床意義：（1）胰腺癌

23、、膽囊癌、膽管壺腹癌，CA19-9明顯升高，尤其胰腺癌晚期的陽性率可達(dá)75%，是重要的輔助診斷指標(biāo)，但早期診斷價(jià)值不大。（2）胃癌的陽性率 50% 結(jié)/直腸癌的陽性率 60%　　 肝癌的陽性率 65%,糖類抗原19-9（CA19-9）,（3）其他惡性腫瘤也有一定的陽性率 如：乳腺癌、卵巢癌、肺癌等（4）某些消化道炎癥CA19-9也有不同程度的升高， 如：急性胰腺炎、膽囊炎、膽汁淤積性膽管炎、肝炎

24、、肝硬化等（5）CA19-9的檢測對上述腫瘤的療效觀察、預(yù)后判斷、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的診斷均有重要意義。,糖類抗原242（CA242）,CA242是一種唾液酸化的黏蛋白類型的糖抗原，其單克隆抗體是Lindholm 等于1985年通過雜交瘤技術(shù)用人結(jié)腸癌細(xì)胞株COLO205免疫鼠而得，免疫組化研究發(fā)現(xiàn)CA242在惡性組織如胰腺癌和結(jié)腸癌中有明顯表達(dá)，而在其他器官的腺癌中亦有輕度表達(dá)。參考值：<12U/ml,糖類抗原242（CA242）

25、,臨床意義：（1）胰腺癌、膽管癌CA242的陽性率高達(dá)88%-100%（2）肺腺癌陽性率76% 直腸腺癌陽性率79%　　 食管和乳腺癌陽性率為62% 小細(xì)胞肺癌的陽性率為50% 肺鱗癌的陽性率為9%（3）假陽性率較低，只有5%,糖類抗原72-4（CA72-4）,CA72-4是一高分子量(>106)的類粘蛋白分子，是通過以乳腺癌轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞膜免疫所制備的McAb B 72.3及純化抗原后所制備的第

26、二代McAb CC 49所識別抗原,可用于診斷與監(jiān)測某些上皮腫瘤,特別是胃癌。參考值：<6U/ml,糖類抗原72-4（CA72-4）,臨床意義：（1）胃癌的陽性率65-70%，有轉(zhuǎn)移者更高（2）結(jié)/直腸癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌也有一定的陽性率（3）CA72-4還可作為治療后隨訪的指標(biāo)以及復(fù)發(fā)和預(yù)后的判斷,神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）,NSE是神經(jīng)母細(xì)胞瘤的腫瘤標(biāo)志物，正常僅存于神經(jīng)組織和紅細(xì)胞中。NSE也是

27、小細(xì)胞肺癌最敏感、最特異的腫瘤標(biāo)志物。待測標(biāo)本絕對禁止溶血，溶血可出現(xiàn)NSE血清水平升高。參考值：<15 ug/L,神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）,臨床意義：（1）小細(xì)胞肺癌的鑒別診斷、監(jiān)測效果、復(fù)發(fā)（2）神經(jīng)母細(xì)胞瘤的鑒別診斷、監(jiān)測病情變化、療效、復(fù)發(fā)等（3）神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤 NSE升高 如：嗜鉻細(xì)胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤、胰島細(xì)胞瘤等,前列腺酸性磷酸酶（PAP）,PAP是前列腺分泌的唯一酶類參考值： <

28、;2.5ug/L臨床意義：（1）前列腺癌血清PAP升高，是前列腺癌診斷、分期、療效觀察及預(yù)后的重要指標(biāo)。（2）前列腺炎和前列腺增生PAP也有一定程度的增高。,β2-微球蛋白（ β2-MG）,β2-MG 1968年 在腎小管病變患者尿中分離而獲得的。 β2-MG是構(gòu)成細(xì)胞膜上組織相容性抗原（HLA）的一部分，在正常細(xì)胞新陳代謝中與HLA分離后釋放入血。β2-MG起源于人體間質(zhì)、上皮細(xì)胞和造血系統(tǒng)的正常細(xì)胞以及惡性腫瘤細(xì)胞參考值

29、：<2.5mg/L,β2-微球蛋白（ β2-MG ）,臨床意義： （1）急、慢性單核細(xì)胞和慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、 β2-MG升高； （2）腎小球疾病血清β2-MG升高，腎小管病變尿β2-MG升高； （3）免疫性疾病血清β2-MG升高,鐵蛋白（SF）,鐵蛋白（SF） 1937年分離得到的含鐵蛋白質(zhì)生理作用：具有強(qiáng)大的結(jié)合和儲(chǔ)備鐵的能力 由人體網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞分泌，人體內(nèi)的2/3的鐵在肝、

30、脾、骨髓和腸黏膜細(xì)胞中 某些腫瘤細(xì)胞也可合成并釋放鐵蛋白 鐵蛋白（SF）的含量能反映肝臟儲(chǔ)鐵量和體內(nèi)儲(chǔ)鐵總量,鐵蛋白（SF）,參考值：男性 20-280 ug/L 女性 12-145 ug/L臨床意義：（1）肝癌、肺癌、膽管癌、胰頭癌、淋巴瘤、白血病、泌尿系腫瘤、腦腫瘤、鼻咽癌、乳腺癌、宮頸癌、卵巢癌、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金氏病等SF升高,鐵蛋白（SF）,（2）輸血或鐵劑治療SF升高（3）再障、溶血

31、性貧血、地中海貧血SF升高（4）原發(fā)性含鐵血黃素沉積癥SF升高（5）結(jié)締組織病SF升高（6）各種肝臟疾病及慢性腎衰SF升高（7）感染性疾病SF升高（8）腦脊液Ft的測定有助于腦部疾病的診斷（9）缺鐵性貧血SF下降,細(xì)胞角質(zhì)素片段抗原21-1（CYFRA21-1）,血清CYFRA21-1是指細(xì)胞角蛋白19的片段（CK19），角蛋白是構(gòu)成細(xì)胞骨架的一種中間絲狀物。CK19主要分布在單層上皮細(xì)胞，如腸上皮、胰管、膽囊、子宮內(nèi)膜、

32、輸尿管及肺泡上皮。參考值： <3.3 ug/L,細(xì)胞角質(zhì)素片段抗原21-1（CYFRA21-1）,臨床意義：（1）鱗狀上皮細(xì)胞癌、非小細(xì)胞肺癌、大細(xì)胞肺癌、肺癌、腺癌、小細(xì)胞肺癌，轉(zhuǎn)移性肺癌血清CYFRA21-1升高（2）子宮癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌血清CYFRA21-1升高（3）血清CYFRA21-1值與腫瘤的進(jìn)展程度和組織分型相關(guān),鱗狀上皮癌相關(guān)抗原（SCC-Ag）,1977年

33、 子宮頸鱗狀細(xì)胞癌中獲得參考值： <2.5 ug/L臨床意義：（1）SCC-Ag在子宮頸癌、肺癌、食道癌、頭頸部癌等各種鱗癌中升高。 子宮頸癌的陽性率 80% 肺鱗癌的陽性率46.5% 食道癌的陽性率 31% 監(jiān)測療效、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后等（2）肝炎、肝硬化、肺炎、腎衰、結(jié)核等，有一定的SCC-Ag陽性率,組織多肽抗原（TPA）,TPA是存在于胎盤和大部分腫瘤組織細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中的一種單鏈多肽

34、。血液中TPA水平與細(xì)胞分裂增殖程度密切相關(guān)TPA為廣譜的腫瘤標(biāo)志物，特異性不高，但靈敏度較高，臨床上常用于迅速增殖的惡性腫瘤的輔助診斷，特別是已知腫瘤的療效監(jiān)測參考值：< 60 U/L,組織多肽抗原（TPA）,臨床意義： 1.TPA是腫瘤增殖性標(biāo)志 TPA在膀胱癌、前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌和消化道惡性腫瘤中表達(dá)率高，特別是膀胱轉(zhuǎn)移癌的診斷敏感性高 2.療效與預(yù)后判斷 3.其他：TPA在下呼吸道

35、、肝、尿路感染等非惡性腫瘤患者中也可升高，但往往為一過性,激素類腫瘤標(biāo)志物,原位激素、異位激素原位激素：內(nèi)分泌腺體腫瘤導(dǎo)致相應(yīng)激素的過量分泌，往往在未檢出腫瘤前，血清中相應(yīng)的激素水平即已升高，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)某些功能亢進(jìn)。異位激素：正常情況下不產(chǎn)生激素的細(xì)胞，在惡變?yōu)槟[瘤細(xì)胞后才合成、分泌激素或激素樣物質(zhì)。,激素類腫瘤標(biāo)志物,激素腫瘤： 胰島素----胰島素瘤 降鈣素----甲狀腺髓樣癌、小細(xì)胞癌 皮

36、質(zhì)醇、ACTH----腎上腺皮質(zhì)瘤 兒茶酚胺----腎上腺髓質(zhì)瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤 β-HCG----滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤 生長激素----腎癌 抗利尿激素----小細(xì)胞肺癌 雌激素----卵巢顆粒細(xì)胞瘤,激素類腫瘤標(biāo)志物,異位激素瘤 腫瘤產(chǎn)生激素較普遍，腫瘤多為惡性，表現(xiàn)為異位激素綜合征。　異位ACTH腫瘤----燕麥細(xì)胞支氣管肺癌、類癌 異位HCG腫瘤----乳腺、消化道、

37、肺等 異位ADH腫瘤----小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌 PRL----肺癌、腎癌 LH、FSH----肺癌 雌激素----肺癌、胃癌,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,三、為什么要聯(lián)合檢測,,理想的腫瘤標(biāo)志物特異反映特定腫瘤；量的變化反映腫瘤：發(fā)生、發(fā)展、及對治療的反映性。容易檢測準(zhǔn)確可靠,腫瘤標(biāo)志物檢測存在的問題

38、,1、大部分腫瘤標(biāo)志物是多種組織產(chǎn)生，或者特異組織產(chǎn)生，但良性組織也有合成。因此，特異性皆不高，沒有一錘定音的“王牌”腫瘤標(biāo)志物。2、用腫瘤標(biāo)志物作為診斷，對絕大部分患者皆為參考或重要參考，并無診斷某腫瘤的“金指標(biāo)”。但由于在腫瘤惡性增殖時(shí)，其相應(yīng)指標(biāo)含量確實(shí)有消長關(guān)系。因此，動(dòng)態(tài)檢查是解決特異性不強(qiáng)的最好辦法。,3、各標(biāo)志物用于治療觀察和預(yù)測復(fù)發(fā)，不失為有用的指標(biāo)，如化療、放療、手術(shù)及免疫生物治療前后的監(jiān)測極為有用。大部分指標(biāo)動(dòng)態(tài)觀

39、察也可用于腫瘤的復(fù)發(fā)預(yù)測。4、由于各腫瘤標(biāo)志物在同一腫瘤同時(shí)出現(xiàn)，或者說同一腫瘤標(biāo)志物在多種腫瘤皆會(huì)升高，因此可同時(shí)選擇幾種特異性較高的腫瘤標(biāo)志物，互相補(bǔ)充，提高診斷的陽性率，從而提出了腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測的概念。,胃癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,單一標(biāo)志物的應(yīng)用 　陽性率>60%的TM：　　　CA72-4、 CEA、 CA19-9、 ß2-MG、　　　　　　　CA50、胃癌相關(guān)抗原（MG-Ag）

40、　 其余TM的陽性率<50% 　　 除CA72-4和胃癌相關(guān)抗原外，其他特異性差，單獨(dú)作為胃癌的診斷、鑒別診斷、療效及預(yù)后評估的指標(biāo)尚難滿足臨床應(yīng)用的要求，聯(lián)合檢測能提高胃癌的檢出率，可達(dá)80%以上。,胃癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,,胃癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,CA72-4、CA242、CEA、MG-Ag 四種TM聯(lián)合檢測為最佳組合，必要時(shí)可增加檢測CA19-9，以其中兩種陽性即判為陽性，或其中一種為陽性，結(jié)合影像學(xué)檢查即可診

41、斷。,腸癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,腸癌是嚴(yán)重威脅人類健康的一種疾病，近年發(fā)病率逐年上升。大腸癌的發(fā)病率僅次于肺癌、胃癌居第三位。在西方國家居惡性腫瘤死亡率的第二位，中國的第五位。常用的診斷結(jié)/直腸癌的TM CEA CA50 CA242 TPA CA19-9 ß2-MG SF等,腸癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,單一TM的應(yīng)用 CEA 52.5% TPA 82% CA

42、50 64% SF 60% CA19-9 58% ß2-MG 60% CA24-2 50%,腸癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,多項(xiàng)TM的聯(lián)合檢測CEA+CA50+CA19-9　　其中兩種陽性即判為陽性，或其中一種為陽性，結(jié)合影象學(xué)檢查即可診斷。,肝癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,肝細(xì)胞癌或原發(fā)性肝癌是最常見的惡性腫瘤之一，肝癌惡性度大，死亡率

43、高，提高5年生存率的關(guān)鍵是早發(fā)現(xiàn)、早治療。單一TM的應(yīng)用 AFP的特異性和敏感性較高 ，可高達(dá)85%-90% CA50 50% SF 77% CEA 62%-75% ß2-MG 72%,肝癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,多項(xiàng)TM的聯(lián)合檢測 AFP+AIF+AFU聯(lián)合檢測可使肝癌的檢出高達(dá)96%以上，若結(jié)合影像學(xué)檢查即可明確診斷。,肺癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,

44、肺癌是常見的惡性腫瘤，屬于最難治的實(shí)體瘤之一，發(fā)病率逐年上升，死亡率在各類惡性腫瘤中居首位。5年生存率僅為13%，其中近60%的患者不能手術(shù)，大部分腺癌對化療、放療不敏感。常用的與肺癌有關(guān)的TMSF CEA HCG ACTH CA125 NSE CYFRA21-1 SCC CA199 CA50 ß2-MG等,肺癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,多項(xiàng)TM的聯(lián)合檢測無法確定病理類型時(shí)： CEA NSE CYFRA21-1 A

45、CTH SF CA125 CA50小細(xì)胞肺癌 （ SCLC ）：CEA ACTH NSE CA50非小細(xì)胞肺癌 （ NSCLC ）：CYFRA21-1 CEA SCC鱗癌：CYFRA21-1 SCC大細(xì)胞肺癌：CYFRA21-1 CA125肺腺癌：CYFRA21-1 CEA支氣管肺癌：ACTH HCG,卵巢癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)腫瘤僅次于宮頸癌、宮體癌的第三位婦科腫瘤，居女性惡性腫瘤的第六位，死亡率居

46、婦科惡性腫瘤的第一位。由于卵巢癌發(fā)病率逐年增高以及早、晚期預(yù)后差異顯著，在臨床上缺乏特異性的早期診斷方法，5年生存率僅15%-20%.單項(xiàng)檢測CA125 75%-82%CEA 25%-58%CA19-9 CA72-4 ß2-MG有一定的陽性率,卵巢癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,多項(xiàng)TM的聯(lián)合檢測CA125+CEA CA125在漿液性卵巢癌中常為陽性 CEA在黏液性卵巢癌中常為陽性,乳腺癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,C

47、A153+CEA+TPA+SF,前列腺癌的實(shí)驗(yàn)室診斷,多項(xiàng)TM的聯(lián)合檢測PSA+f-PSA　　血清PSA及f-PSA測定無疑是前列腺癌腫瘤標(biāo)志物的首選項(xiàng)目，特別是f-PSA/PSA比值意義最大?！　‘?dāng)f-PSA/PSA比值f-PSA 10倍以上）時(shí)前列腺癌確診的概率明顯增高。,以上介紹的各種聯(lián)合檢測也不是十全十美，有時(shí)聯(lián)合檢測的增加，提高了敏感性，反而降低了特異性。因此，在聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，一定要選準(zhǔn)特異性較強(qiáng)的標(biāo)志物，作不同標(biāo)志物的聯(lián)

48、合檢測，再作仔細(xì)的分析，才能使聯(lián)合檢測達(dá)到盡可能“完美”的程度。一句話，不是聯(lián)合越多越好。,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制,要獲得準(zhǔn)確的TM檢測結(jié)果就必須與實(shí)驗(yàn)室其他檢查一樣，認(rèn)真分析影響檢測的各種因素，包括從標(biāo)本采集、實(shí)驗(yàn)操作到發(fā)出報(bào)告的全部過程的各個(gè)環(huán)節(jié)，其常見的影響因素有以下幾點(diǎn)：,1、分析前影響因素,（

49、1）臨床診療措施對TM的影響：前列腺按摩、前列腺穿刺、導(dǎo)尿和直腸鏡檢查后血液中前列腺特異性抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)可升高。某些藥物會(huì)影響TM濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時(shí)可抑制PSA產(chǎn)生；絲裂霉素、順珀等抗腫瘤藥可導(dǎo)致PSA假性升高；一些細(xì)胞毒藥物(如5-氟尿嘧啶)治療腫瘤時(shí)，可使癌胚抗原(CEA)暫時(shí)升高。,1、分析前影響因素,（2）肝腎功能異常的影響：肝功能異常、膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成CEA和細(xì)胞

50、因子等濃度增高。腎功能不良時(shí)細(xì)胞角質(zhì)素片段抗原21-1(CYFRA 21-1)、鱗狀上皮癌相關(guān)抗原( SCC)和β2微球蛋白 (β2- M)可升高。,1、分析前影響因素,（3）生物學(xué)因素的影響：隨年齡的增長PSA升高，老年人CA19-9、CA15-3、CEA等可升高。部分婦女在月經(jīng)期CA125和CA19-9可升高。在妊娠期甲胎蛋白(AFP)和CA125等明顯升高。某些長期抽煙者中可見CEA升高。,1、分析前影響因素,（4）標(biāo)本

51、采集和保存的影響：由于紅細(xì)胞中也存在神經(jīng)元特異性烯醇化酶 (NSE)，標(biāo)本溶血可使血液中NSE濃度增高。通常血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心，保存于4℃ 冰箱中，并在24h內(nèi)測定；不能在2h內(nèi)測定的血清應(yīng)貯存于-20℃冰箱內(nèi)；須長期貯存的標(biāo)本應(yīng)置-70℃保存，且應(yīng)防止反復(fù)凍融。,1、分析前影響因素,酶類和激素類TM不穩(wěn)定，易降解，應(yīng)及時(shí)測定或分離血清低溫保存。此外，試管內(nèi)的促凝劑對某些TM有干擾；呼吸道分泌物、唾液和汗液等污染標(biāo)本，可使S

52、CC、CA19-9和CEA升高。,2、分析中影響因素,（1）測定方法和試劑的影響TM測定方法有：放射免疫測定法(RIA)酶聯(lián)免疫測定法 (ELISA)化學(xué)發(fā)光免疫測定法(CLIA)等。每種測定方法有自己的精密度和重復(fù)性。,2、分析中影響因素,手工方法，由于加樣、洗滌、溫育、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線等操作步驟多，如標(biāo)本量少，一盒試劑分次使用，則重復(fù)性較差，人為誤差較大操作時(shí)要特別認(rèn)真。用自動(dòng)化儀器測定，重復(fù)性好，人為誤差小，但要注意不

53、同廠家、不同試劑盒測定有差異，原因是使用的單克隆抗體針對抗原的位點(diǎn)不同所致。有時(shí)使用同一種抗體，也可能因抗原異質(zhì)性或基質(zhì)的影響而得到不同的結(jié)果。,2、分析中影響因素,有學(xué)者用12種不同的CEA試劑盒檢測某一世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果差異達(dá)500%。導(dǎo)致分析中誤差的主要原因是缺乏測定的標(biāo)準(zhǔn)化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原成分、校正品和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一方法，同一儀器和同一廠家試劑盒進(jìn)行測定。,2、分析中影響因素,（2

54、）“鉤狀效應(yīng)”的影響ELISA或RIA測定時(shí)，若待測樣本中抗原濃度過高，會(huì)出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象(“鉤狀效應(yīng)”)，此時(shí)免疫反應(yīng)被明顯抑制，測定結(jié)果偏低，要消除此干擾，只有對樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測定。,2、分析中影響因素,（3）交叉污染的影響在測定高濃度標(biāo)本時(shí)，交叉污染成為一個(gè)導(dǎo)致假陽性的潛在問題。特別是緊隨在高濃度標(biāo)本后一孔，若出現(xiàn)偏高結(jié)果，應(yīng)復(fù)查有無交叉污染。,2、分析中影響因素,（4）嗜異性抗體對檢測結(jié)果的影響大多數(shù)TM測定中常

55、使用一對鼠單克隆抗體與腫瘤抗原反應(yīng)，如患者因閃爍影像學(xué)檢查或治療時(shí)使用過鼠單克隆抗體，則體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生人抗鼠抗體(HAMA)，血清中的HAMA可在2種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用，導(dǎo)致無抗原情況下，出現(xiàn)TM濃度增高的假象。對有動(dòng)物密切接觸史者要特別注意嗜異性抗體問題，以避免假陽性而帶來醫(yī)療糾紛。,3、分析后報(bào)告的注意事項(xiàng),（1）TM的參考值范圍不同標(biāo)本如血液、尿液、胸腹水等，必須有不同的參考值。不同地區(qū)、人群、方法、試劑和設(shè)備應(yīng)建立自己

56、實(shí)驗(yàn)室的參考值范圍。但目前臨床使用的參考值大多為國外文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)，很少有國內(nèi)自己的參考范圍，對此應(yīng)向臨床說明，供臨床診斷和分析疾病時(shí)參考。,3、分析后報(bào)告的注意事項(xiàng),（2）測定結(jié)果上升或下降25%的臨床意義一般情況下，患者檢測結(jié)果在排除檢測方法誤差后，上升或下降25%都有臨床價(jià)值。因此，對于測定結(jié)果升高的標(biāo)本必須復(fù)查，以避免測定誤差給患者帶來不必要的恐慌。SCC的生理波動(dòng)較大，平均日間變異為24%，在監(jiān)測疾病復(fù)發(fā)時(shí)，每次采血應(yīng)

57、在同一時(shí)間進(jìn)行。,3、分析后報(bào)告的注意事項(xiàng),（3）患者TM基礎(chǔ)測定值變化圖的臨床意義每個(gè)人的TM水平是未知的，且波動(dòng)較大。在監(jiān)測患者治療前、中、后各階段TM含量的變化時(shí)，最好作TM含量變化的曲線圖，并以治療后TM的水平作為特殊的“參考水平”，這對判斷療效和監(jiān)測復(fù)發(fā)有很大價(jià)值。,3、分析后報(bào)告的注意事項(xiàng),（4）加強(qiáng)與臨床的交流和溝通由于TM測定對臨床診療有特殊性，必須加強(qiáng)與臨床的交流和溝通，當(dāng)改變TM檢測方法和試劑時(shí)，必須通知臨床，以

58、免影響結(jié)果的判斷。,3、分析后報(bào)告的注意事項(xiàng),（5）T M半壽期TM半壽期是指腫瘤組織完全切除后血中TM下降50%的時(shí)間。這對臨床確定TM監(jiān)測時(shí)間和判斷療效有重要意義。例如PSA半壽期為3d，若術(shù)前濃度為100μg/L，一般應(yīng)在治療后18d復(fù)查，若術(shù)前濃度為10μg/L，則術(shù)后6d內(nèi)應(yīng)降到正常水平。,一、什么是腫瘤標(biāo)志物二、常用的腫瘤標(biāo)志物三、為什么要聯(lián)合檢測四、腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制五、正確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,五、正

59、確認(rèn)識腫瘤標(biāo)志物的檢測,腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用正常人群中的篩查有癥狀者的輔助診斷癌癥的臨床階段的分期疾病進(jìn)程的預(yù)后指標(biāo)評估治療方案判斷癌癥是否復(fù)發(fā)治療應(yīng)答的監(jiān)測,五大誤區(qū),腫瘤標(biāo)志物的檢測有助于腫瘤的早期診斷 腫瘤標(biāo)志物陰性就可以排除相關(guān)腫瘤 腫瘤標(biāo)志物異常就可以診斷相關(guān)腫瘤 腫瘤標(biāo)志物只要聯(lián)合檢測效率就高 腫瘤標(biāo)志物的輕度升高價(jià)值不大,誤區(qū)一：腫瘤標(biāo)志物的檢測有助于腫瘤的早期診斷,事實(shí)上，除了AFP有助于原發(fā)性肝癌

60、的早期診斷，PSA、f-PSA及其比值有助于前列腺癌的早期診斷，其他腫瘤標(biāo)志物的檢測對于腫瘤的早期診斷并不具有很大的意義，其臨床價(jià)值主要體現(xiàn)在分析療效、判斷預(yù)后、預(yù)測復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移等?！　∧[瘤的早期診斷更多的需要結(jié)合病史、癥狀、體征、影像學(xué)檢查(B超、CT、X線、胃鏡、腸鏡)等手段來綜合分析，明確診斷則需要依靠病理檢查。,誤區(qū)二：腫瘤標(biāo)志物陰性就可以排除相關(guān)腫瘤,既然多數(shù)腫瘤標(biāo)志物的檢測對于腫瘤的早期診斷并不具有很大的意義，那么，腫瘤標(biāo)志

61、物的陰性也就不能完全排除相關(guān)腫瘤?！　±缥赴┰缙趦H限于浸潤或淋巴轉(zhuǎn)移時(shí)血清CA199才明顯升高。即使像AFP這種對原發(fā)性肝癌的早期診斷具有相當(dāng)意義的腫瘤標(biāo)志物，其陽性率也僅達(dá)到79%～90%，(AFP診斷原發(fā)性肝癌的陽性閾值為>400ng/ml)。也就是說，還有10%～30%的原發(fā)性肝癌的患者，AFP是正常的或只有輕度的升高。,誤區(qū)三：腫瘤標(biāo)志物異常就可以診斷相關(guān)腫瘤,許多良性疾病都可以有腫瘤標(biāo)志物的異常，如前列腺肥大、前列腺

62、炎可以有PSA的輕、中度升高，子宮內(nèi)膜異位癥可以有CA125的輕、中度升高，急、慢性肝病時(shí)可以有CA125、CA199、CA50、鐵蛋白的不同程度的升高。膽道疾病伴黃疸時(shí)常有CA199、CA50的明顯升高，甚至長期吸煙者CEA也會(huì)有輕度升高。,誤區(qū)四：腫瘤標(biāo)志物只要聯(lián)合檢測效率就高,腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測確實(shí)能在一定程度上提高陽性檢出率，但部分腫瘤標(biāo)志物之間的相關(guān)性極高，如CA199和CA50之間的相關(guān)性可達(dá)到95%～98%，即95%～9

63、8%的被檢者如CA199正常，則CA50也正常，CA199異常，則CA50也異常，這時(shí)就可以選用一些靈敏度更高的腫瘤標(biāo)志物，如CA724。再比如CA242較少受到黃疸的影響，在膽道、胰腺良惡性疾病的鑒別診斷中具有較高價(jià)值。,誤區(qū)五：腫瘤標(biāo)志物的輕度升高價(jià)值不大,正因?yàn)樵S多良性疾病都可以有腫瘤標(biāo)志物的異常，所以有些醫(yī)生認(rèn)為腫瘤標(biāo)志物的輕度升高價(jià)值不大，只有在高于正常參考值5倍以上才有意義?！　∈聦?shí)并非如此，因?yàn)樵诖蠖鄶?shù)情況下，正常參考值