腫瘤標志物結果分析解讀

1、腫瘤標志物 tumor markers,2007.3.20,腫瘤標志物(tumor markers，TM),1978年Herberman在美國國立癌癥研究所召開的人類腫瘤免疫診斷會上提出的。腫瘤標記物（tumor marker）又稱腫瘤標志物，是指特征性存在于惡性腫瘤腫瘤細胞，或由惡性腫瘤細胞異常而產(chǎn)生的物質，或是宿主對腫瘤的刺激反應而產(chǎn)生的物質，并能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展，監(jiān)測腫瘤對治療反應的一類物質。存在于腫瘤患者的組織、體液和排泄

2、物中，能夠用免疫學、生物學及化學的方法檢測。,腫瘤標記物的來源,腫瘤細胞的代謝產(chǎn)物，如：糖酵解產(chǎn)物、組織多肽抗原、核酸分解產(chǎn)物。分化紊亂的細胞基因產(chǎn)物 ，如：異位的ACTH片斷，甲胎蛋白、癌胚抗原、胎兒同工酶。腫瘤細胞壞死崩解釋放進入血液循環(huán)的物質 ，主要是某些細胞骨架蛋白成分，如細胞角質素片段抗原21-1 (Cyfra21-1)，多胺類物質 。腫瘤宿主細胞的細胞反應性產(chǎn)物 ，如：VCA-Ig-A、EA -Ig-A 。,腫瘤標記物

3、發(fā)展的歷史,第一階段，1846年～1928年，發(fā)現(xiàn)本周蛋白第二階段，1929年～1962年，發(fā)現(xiàn)一些激素、酶、同工酶和蛋白在腫瘤發(fā)生時異常，如：異位激素、促性腺激素、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶第三階段，1963年～1975年，發(fā)現(xiàn)了一些胚胎蛋白性標記物 ，AFP、CEA第四階段，1976年至今，單克隆抗體技術的建立，大量的腫瘤標記物涌現(xiàn)出來，如CA15-3、CA125 、CA19-9等,腫瘤標志物開發(fā)的5 個階段,臨床前實驗室研究階段

4、臨床驗證階段以回顧性研究驗證標志物是否可以做為一種篩檢指標并確定其診斷標準以前瞻性研究來進一步驗證其對疾病的篩檢效果確定假陽性率設計隨機對照試驗來評價這種篩檢在人群中應用的價值,理想的TM ：,特異性高，對腫瘤與非腫瘤鑒別的準確性可達100%。敏感性高，能在極早期發(fā)現(xiàn)腫瘤，不漏診。在體液中的濃度應與瘤體大小、臨床分期密切相關，并可據(jù)此判斷預后。半衰期短，可根據(jù)其水平的升降監(jiān)測治療效果及腫瘤是否復發(fā)或轉移。腫瘤標記物的濃度

5、和腫瘤轉移、惡性程度相關，可通過定量或定性檢測而協(xié)助腫瘤的分期和預后的判斷； 存在于體液特別是血液中易于檢測。,一些評價腫瘤標記物的指標,,評價腫瘤標記物的指標,這些指標的概念及含義,敏感性(sensitivity)　即某種TM 檢測腫瘤患者時的陽性率特異性(specificity) 某種TM 在檢測非腫瘤患者(包括正常人) 時陰性率陽性預測價值(positive predictive value）指TM 陽性者中腫瘤患者的百分

6、比陰性預測價值(negative predictive value)　指TM陰性的人中非腫瘤患者的百分比,,有效性(efficiency) 指該TM 能準確區(qū)分腫瘤與非腫瘤患者的能力。陽性似然比( positive likelihood ratio) 指該TM 真陽性率與假陽性率之比,反映其正確判斷陽性的可能性是錯判陽性可能性的倍數(shù),越大越好　陰性似然比(negative likelihood ratio) 指該TM 假陰性率與真

7、陰性率之比,反映其錯判陰性的可能性是正確判斷陰性可能性的倍數(shù),越小越好,腫瘤標志物的用途:,腫瘤的早期發(fā)現(xiàn) 腫瘤篩查腫瘤的診斷、鑒別診斷與分期 腫瘤療效的檢測 腫瘤復發(fā)的指標 腫瘤的預后判斷,腫瘤標記物的分類,由于腫瘤標記物的來源和性質非常復雜，至今尚未有一個統(tǒng)一的分類方法。 目前的分類方法有兩種：一是按腫瘤標記物的來源，二是按腫瘤標記物本身的化學性質和免疫學特性。,按腫瘤標記物的來源分類,腫瘤的特異性標記物 ，指僅

8、有某一種腫瘤所產(chǎn)生的特異性物質 。腫瘤輔助標記物 ，在一類組織類型相似而性質不同的腫瘤發(fā)生時，其水平都有升高 。,按腫瘤標記物本身的性質分類,胚胎抗原蛋白類標記物糖類標記物酶類標記物激素類標記物基因類標記物其他腫瘤標記物,一、胚胎抗原,甲胎蛋白（α-Fetoprotein，AFP） 癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA） 癌胚鐵蛋白 胰癌胚抗原β-癌胚抗原,甲胎蛋白（α-Fetopr

9、otein，AFP）,,甲胎蛋白（α-Fetoprotein，AFP）,糖蛋白，含590個氨基酸，分子量70kD，半衰期在5天左右。在胎兒發(fā)育到六周開始出現(xiàn)， 在出生一周后消失。成人血清中含量甚微。,AFP升高的因素,生理條件下，，AFP在卵黃囊的內胚層細胞和胚肝、新生兒肝細胞中高度表達，在胃腸道粘膜上皮細胞中也有見表達。病理狀況下，見于正常成年個體的肝細胞被破壞后的再生（急、慢性肝炎，重癥肝炎恢復期，肝硬化）、先天性膽管閉塞、畸形

10、胎兒（無腦兒、脊柱裂等）以及原發(fā)性肝細胞肝癌、畸胎瘤或部分胃腸道腫瘤,AFP異質體的檢測,用扁豆凝集素（LCA）可將其分為LCA親和型與不親和型。肝癌中AFP主要是LCA親和型；而良性肝病中主要是LCA不親和型。LCA親和型AFP>25%時提示肝癌；與LCA親和型AFP<25%時提示為良性肝病。 用刀豆素A（Con A）可將其分為Con A親和型與不親和型。與刀豆素A（Con A）不結合的AFP常見于卵黃囊腫瘤或其他消化

11、道腫瘤。,AFP的臨床意義,,一、診斷肝癌,在我國60～70％的肝癌病人存在AFP高于正常值。 正常人血清AFP值為10～30μg/L，凡AFP>500μg/L持續(xù)1個月或AFP>200μg/L持續(xù)2個月，應高度懷疑肝癌，同時應有醫(yī)學影像學的證據(jù)參與診斷；低濃度（50～200μg/L）持續(xù)時間超過2個月的患者，應視為肝癌的高危人群。當谷丙轉氨酶（ALT）正常，用AFP來診斷肝癌，可取性可達100％。,,在進行肝癌診斷

12、時，應排除由妊娠、活動性肝炎、生殖腺胚胎癌、繼發(fā)性肝癌和少數(shù)消化道腫瘤等引起的AFP升高，通常由非原發(fā)性肝癌引起的AFP升高，一般都不會高于400μg/L。3.6～5.2％的膽管上皮癌、84％以上的肝母細胞癌和70％左右的生殖性畸胎瘤及較少比例的胰腺癌、肺癌、腎癌和白血病患者也可出現(xiàn)AFP低濃度的異常升高。,缺點,對原發(fā)性肝癌的敏感性只有70％左右對轉移性肝癌的診斷效果就更差對AFP指標陰性，臨床可疑的患者應結合其他檢查資料或多項

13、指標聯(lián)合檢測，如同時檢測γ-GT-Ⅱ、AFU、ALP等，以期優(yōu)勢互補，減少漏診,二、療效觀察和預后的評估,若AFP及膽紅素同時明顯升高，病人存活期很短。原發(fā)性肝癌在治療過程中，如AFP含量保持在術后水平，示病情穩(wěn)定；下降示病情好轉，持續(xù)不降說明療效不佳。,三、良性病變中的AFP升高,升高一般是散在的和暫時的，肝炎病人，10％升高， 水平<50μg/L肝硬化病人，30％升高，

14、 水平< 500μg/L。,AFP在生殖腺腫瘤中的應用,,精原細胞瘤,無性細胞瘤,卵黃囊瘤,絨毛膜上皮細胞癌,畸胎瘤,AFP,HCG,—,↑,—,↑,↑,—,—,↑,—,—,癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）,,癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）,妊娠期2個月起存在于胎兒消化系統(tǒng)中，如腸道、胰腺和肝臟中。胎兒出生后其濃度明顯下降。在一些成

15、人腫瘤組織，其中包括胚胎性腫瘤，結腸、胃、肺、乳腺等癌組織中可出現(xiàn)表達，并分泌于體液中。,CEA的相關歸類,CEA多肽，高度糖基化的大分子糖蛋白，糖占60～70％。CEA相關多肽，包括36種糖蛋白。CEA家族，CEA多肽與CEA相關多肽組成CEA家族與免疫球蛋白超家族分子結構相類似，因此CEA又可屬免疫球蛋白超家族中的一員。,CEA檢測非特異性現(xiàn)象的原因,CEA家族及其與免疫球蛋白超家族的分子的同源性各種CEA的糖鏈分子在結構及

16、組成上的差異因為抗體可以針對蛋白抗原決定簇，也可針對糖鏈半抗原抗體的多樣性，必然會造成對抗原（CEA）檢測時，出現(xiàn)非特異性,CEA的臨床意義,,一、惡性腫瘤的輔助診斷,CEA在中晚期腫瘤中的陽性率胰腺癌 88～91％肺癌 76％結腸癌 73％乳腺癌和卵巢癌 73％膀胱癌、宮頸癌

17、和子宮內膜癌中也有升高,CEA的優(yōu)勢,CEA是一個結腸癌標記物，CEA與CA242聯(lián)合應用目前被認為是對結腸癌的最佳標記物的搭配。在整個直腸癌治療其間，CEA是一個有效的監(jiān)視指標，是發(fā)現(xiàn)復發(fā)的理想指標，其敏感性高于X線和直腸鏡。,CEA的局限性,只在腫瘤的中晚期才有較顯著的升高，也不只局限于某一類腫瘤，因此CEA對多數(shù)腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)與鑒別診斷并無幫助。 CEA具有較高的假陽性和假陰性，并不適合用于腫瘤的普查 。,二、預后的評估,術前C

18、EA水平正常的患者手術治愈率高，術后不易復發(fā)。若術前CEA已升高者，則大多數(shù)已有血管壁、淋巴系統(tǒng)和周圍神經(jīng)的侵犯和轉移，預后較差。術后若癌癥有轉移或復發(fā)者，在臨床癥狀出現(xiàn)前10周～13個月，CEA就有可能開始升高，CEA濃度變化隨病情進展而升高。,三、伴CEA升高的良性疾病,吸煙者潰瘍性結腸炎胰腺炎結腸息肉,二、蛋白類標記物,正常細胞在惡變過程中必將伴隨著細胞表型及基因型的改變，導致某些與腫瘤相關的基因出現(xiàn)異常的高表達，有些表

19、達的蛋白還可分泌進入宿主體液中。當腫瘤快速分化、增值時，一些在正常組織中不表達的蛋白類型或組分可大量出現(xiàn)，如作為細胞支架的角蛋白，可作為腫瘤標記物。,一、組織多肽抗原（tissue polypeptide antigen，TPA）,分子量在17 000～45 000之間分子結構和細胞骨架蛋白相類似增值活躍的細胞，包括正常細胞和癌細胞，均能分泌這種蛋白 ，因此TPA不僅可作為一種細胞增值的指標，也可視為一種腫瘤標記物,,TPA是鱗狀

20、上皮細胞的標記物，在基底細胞中無表達可反映腫瘤患者體內腫瘤細胞的增值及凋亡狀況 在消化道腫瘤、乳腺癌、肺癌、宮頸癌、前列腺癌、胃癌、卵巢癌及膀胱癌中均可出現(xiàn)異常升高，其中肺癌的陽性率可達60％，胃腸道腫瘤的陽性率為54％。,特點,不含糖或脂的多肽體現(xiàn)了腫瘤共有的增值特性器官特異性較差屬廣譜腫瘤標記物,TPA的應用,鑒別診斷膽管癌（TPA升高）和肝細胞癌（TPA不升高）和CEA以及糖蛋白類抗原結合判斷膀胱癌、乳腺癌、直腸癌、肺

21、癌、卵巢癌有無轉移,二、細胞角蛋白 （cytokeratin，CK）,細胞角蛋白是細胞體間的中間絲，存在于所有的正常上皮細胞及上皮性癌細胞中，在細胞中起支架作用，支撐細胞及細胞核，根據(jù)其生化特性，可分為20多種不同的類型。作為標記物的細胞角蛋白主要是CK19,細胞角蛋白－－CK19,主要存在于單層上皮中，如腸上皮、胰管、膽囊、子宮內膜和肺泡上皮，這些細胞癌變時，CK19含量可增加。CK19是分子量為40 000的酸性蛋白C

22、yfra21-1是角蛋白CK19的一種，根據(jù)該蛋白的抗原性，現(xiàn)已制備成2種抗CK19的特異性單克隆抗體（Ks19-1，BM19-21）,應用,敏感性與腫瘤的組織學類型存在著一定的相關性，如肺鱗癌的敏感性為最高達76.5％、腺癌為47.8％、小細胞肺癌僅為42.1％。血清中Cyfra21-1的含量與肺鱗癌患者的病程呈正相關，根據(jù)肺癌的TNM分期，Ⅰ～Ⅳ期患者的敏感性分別為60.0％、88.8％、80％和100％Cyfra21-1與CA

23、19-9聯(lián)合對肺癌診斷的敏感性為76％、特異性為96％。,三、鱗癌相關抗原（squamous cell carcinoma associated antigen，SCCAg）,由14種蛋白片斷組成，每一片斷的相對分子量在42 000～48 000之間通過等電聚焦電泳法可把SCCAg分為中性和酸性兩個亞組分惡性和正常鱗狀上皮細胞中均含中性組分，而酸性組分僅見于惡性細胞,,在子宮頸癌、非小細胞肺癌、皮膚癌、頭頸部癌、消化道癌、卵巢癌和

24、泌尿道腫瘤中都可見SCCAg 升高。 牛皮癬、腎功能不全或肺、肝、乳腺的良性疾病病人，其血清SCCAg也可出現(xiàn)非特異性升高此外汗液的污染也可引起假陽性結果。,應用,早期腫瘤SCCAg 很少升高，不適用于腫瘤的普查SCCAg在小細胞肺癌中并不升高，而在肺鱗癌中常出現(xiàn)異常升高， SCCAg的檢測有助于鑒別小細胞肺癌和非小細胞肺癌敏感性比Cyfra21-1低,,SCCAg在血液中的半衰期僅為數(shù)十分鐘，根治性腫瘤切除后，術前異常升高可在

25、術后72h內迅速降至正常水平。姑息性切除術后，SCCAg水平可暫時性下降，但多數(shù)仍高于正常。連續(xù)動態(tài)檢測SCCAg水平可以作為一項監(jiān)測肺及食管鱗癌療效，尤其是檢測手術療效的敏感指標。,四、β2微球蛋白（β2-microglobulin, β2M）,從腎病患者尿中分離出的一種蛋白質分子量僅為1.2kD，電泳時顯于β2M區(qū)帶，故被命名為β2微球蛋白β2M是人類白細胞抗原（HLA）的輕鏈部分，鏈內含有一對二硫鍵，β2M可與HLA Ⅰ類

26、分子的重鏈非共價的結合，而存在于細胞膜上。,來源,β2M是人體有核細胞，主要是漿細胞，產(chǎn)生的一種由100個氨基酸組成的單鏈多肽低分子蛋白。體內來源于人體間質上皮和造血系統(tǒng)的正常細胞及惡性細胞均能合成β2M。,在相關腫瘤中的應用,淋巴系統(tǒng)腫瘤如慢性淋巴細胞白血病、淋巴細胞肉瘤、何杰金病、非何杰金淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤等中升高尤為明顯檢測腦脊液中的β2M的水平有助于對腦膜白血病的診斷在78％的膽管癌、53％的原發(fā)性肝癌、48％的胃癌、4

27、5％的大腸癌、35％的肺癌、33％的食管癌和33％的膀胱癌中也可見有升高在一些非腫瘤性疾患如腎臟疾病、肝炎、肝硬化、風濕性關節(jié)炎以及一些傳染病中也可見有β2M的升高。,三、糖類標記物,腫瘤細胞內糖基化過程發(fā)生變異，從而導致細胞分泌性或細胞膜上的糖蛋白或糖脂中的糖基序列發(fā)生改變，形成了一種和正常糖蛋白不同的特殊抗原，可利用單克隆抗體技術檢測這些抗原，結果誕生了糖蛋白類抗原。作為新一代的腫瘤標記物，遠較酶和激素類標記物敏感、特異。,分類

28、,由哺乳動物上皮細胞分泌的大分子量粘蛋白， 如：CA125、CA15-3、CA549、CA27-29。其中CA15-3、CA549、CA27-29是異構體，都是乳腺癌的腫瘤標記物唾液酸巖藻糖的衍生物如：CA19-9、CA19-5、CA50、CA72-4、CA242，可作為消化道腫瘤、胰腺癌的標記物。,一、CA125,分子量可達220 000～1 000 000之間糖基含量僅占總蛋白質量的24％CA-125是由鼠抗人乳頭狀囊性卵巢上

29、皮細胞系OC125制備而成,CA-125在卵巢診斷中的應用,80～90％的卵巢上皮癌中CA-125可明顯升高子宮內膜癌、透明細胞癌、輸卵管癌及未分化卵巢癌患者中CA-125含量也可明顯升高粘液性卵巢癌患者的陽性率則較低CA-125在卵巢包塊良惡性的鑒別上特別有價值，敏感度為78％、特異性95％、陽性預測價值82％、陰性預測價值91 ％ 。 CA-125和CEA聯(lián)合測定，計算兩者比值，可提高卵巢癌檢出的敏感性和特異性。,其他應用,

30、非卵巢癌類的惡性腫瘤，如胰腺、肝、胃、腸、子宮、和乳腺癌癥患者中CA-125的陽性率可分別高達73％、70％、53％、27％、22％和20％。然而CA-125血清濃度輕微上升還可見于1％健康婦女，3～6％的良性卵巢疾患或非腫瘤患者，包括孕期起始3個月、行經(jīng)期、子宮內膜異位、子宮纖維變性、子宮肌瘤、良性卵巢瘤、急性輸卵管炎、急性胰腺炎、肝病、胸腹膜和心包感染等。應注意排除 。,二、CA19-9,為唾液酸化的Ⅰ型乳糖系巖藻五糖，有六個糖基

31、組成 正常在胰腺導管、膽道、胃、腸、子宮內膜和涎腺上皮細胞中均有表達,CA19-9的應用,CA19-9的器官特異性不強在各種腺癌特別是消化系統(tǒng)的惡性腫瘤如： 71～93％胰腺癌、67％肝膽管癌、40～50％胃癌、30～50％肝癌、30％直腸癌和15％乳腺癌的CA19-9都有升高在急性胰腺炎、膽汁淤積性膽管炎、膽道結石和肝臟疾患中CA19-9也有可能升高，但很少超過120kU/L，往往是呈“一過性”升高。,CA19-9在胰腺癌中的應

32、用,CA19-9在胰腺癌中的陽性率最高，常被認為是針對胰腺癌的一種腫瘤標記物。早期胰腺癌CA19-9敏感性較低， T1期為60.7％、T2期為78.4％ 檢測胰腺癌的治療效果及術后復發(fā)情況,三、CA15-3,分子量約為40 000的糖蛋白包含兩種抗體，一種是用鼠抗人乳腺癌肝細胞轉移株膜的單克隆抗體DF3制備的；另一種抗體是115DB，為鼠抗人乳小脂球抗體。 DF3抗體反應的是分子量為30～45kD的糖蛋白分子，稱多態(tài)的上皮粘蛋

33、白-----mucin,在乳腺癌等多種腫瘤中，Mucin可發(fā)生以下變化：,表達增高，且表達與腫瘤的惡性程度呈正相關細胞表面的極性分布喪失，整個細胞表面及胞漿都能表達Mucin 1結構發(fā)生改變，出現(xiàn)了新的肽鏈及糖鏈表位1997年美國FDA批準Mucin 1（CA15-3）作為Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌復發(fā)的檢測指標。,臨床意義 :,CA15-3作為乳腺癌的主要標記物 23％的原發(fā)性乳腺癌和69％轉移性乳腺癌可有 CA15-3的升高乳腺癌的Ⅰ

34、期和Ⅱ期，僅有10～20％的病人有升高，所以不能用于乳腺癌的早期診斷對晚期病人，當CA15-3>100 kU/L 時，肯定有轉移，敏感性高于CEA、TPA。,,80％的胰腺癌、71％的肺癌、68％的乳腺癌、64％的卵巢癌、63％的直腸癌、28％的肝癌中也可見到CA15-3的升高5.5％的正常人、一些良性肝病和良性乳腺?。?6％）也可見有 CA15-3的升高,四、CA27-29,由乳腺癌轉移至腹水中的細胞作為抗原所誘導的抗體（B

35、27.29）組成 臨床作用和CA15-3一樣，主要用于轉移性乳腺癌的診斷，,五、CA50,CA50來自抗直腸腺癌細胞系（COLO 205）抗體 是一種廣譜的腫瘤標記物廣泛存在于胰腺、膽囊、肝、胃、結直腸、膀胱、子宮，當細胞惡變時，由于糖基轉化酶的失活或胚胎時才活躍的某些轉化酶被激活，造成細胞表面糖鏈結構的性質改變而形成CA50。,,41～71％的食管癌、41～71％的胃癌、58～70％的膽管癌、14～78％的肝癌和80～97％的胰

36、腺癌都可見有CA50的升高。診斷直腸癌的陽性率與病情的分期密切相關，Duke A期19～43％、B期30～59％、C期和D期為53～73％的病人可出現(xiàn)CA50陽性在一些消化系統(tǒng)的良性病變，如膽管和胰管炎癥、結石以及肝病中常見異常升高。CA50和CA19-9具有互補作用，同時測定可以提高檢測的特異性和敏感性。,六、CA242,是一種與粘蛋白相關的標記物，也是一種唾液酸化的糖脂類抗原CA242能同時識別CA50和CA19-9的抗原

37、決定簇。 5～33％的消化道良性疾病中可見有升高68～79％的胰腺癌、55～85％的直腸癌、44％的胃癌病人中CA242的水平可高于20kU/L,臨床應用,診斷胰腺癌時，敏感性為70～80％，特異性為90％?？捎糜诔踉\時篩選胰腺癌。對非小細胞肺癌的敏感性和特異性分別為28.5％和95.6％。肺鱗癌患者血清CA242水平顯著低于非鱗癌患者（肺腺癌和大細胞肺癌），可用于肺癌的鑒別診斷 。,CA242、 CA50和CA19-9,三者的作

38、用十分相近相關系數(shù)在0.81～0.95綜合比較起來，CA19-9的敏感性和特異性要更好一些，因而更為常用,四、酶類標記物,腫瘤發(fā)生時，機體酶的活性常會發(fā)生較大的變化，這是因為：腫瘤細胞或組織本身誘導其它細胞或組織產(chǎn)生異常含量的酶腫瘤細胞代謝旺盛，細胞通透性增加，使得腫瘤細胞內的酶進入血液腫瘤使得某些器官功能出現(xiàn)障礙，從而導致各種酶的滅活及排泄障礙腫瘤組織壓迫某些空腔而使得某些通過這些空腔排出的酶返流而進入血液,腫瘤發(fā)生時酶類

39、的具體變化,與分化功能相關的同工酶活性降低或消失與細胞增值功能相關的同工酶活性的增高，其中尤其明顯的是某些成年型同工酶減少而出現(xiàn)一些胚胎同工酶和異位酶腫瘤快速增值時，往往導致缺氧，糖酵解相關酶如己糖激酶、葡萄糖異構酶、醛縮酶、乳酸脫氫酶均較正常糖有氧氧化時升高,同工酶的分辯和檢測,胚胎型同工酶，某些組織在腫瘤狀態(tài)時，使酶的同工酶譜返祖為胚胎時期的未分化狀態(tài)，而分泌出大量的胚胎時期的同工酶，這種變化往往與腫瘤的惡性程度呈正比胎盤型同

40、工酶，有些腫瘤組織會分泌出某些原屬胎盤階段的同工酶，目前已知的胎盤型同工酶已達20余種異位同工酶，是指某些腫瘤組織改變了自身的分泌特性，而去分泌表達在其它成年組織上的同工酶。,酶類標記物有如下特點,酶類廣泛存在特異性不高敏感性較高，但其低特異性限制了酶類標記物的應用同工酶分析的應用提高了酶類標記物的敏感性和特異性目前臨床上主要測定酶的活性，酶的活性可受多種因素的影響和干擾，穩(wěn)定性較差，有不少學者建議以測定酶的質量來代替測定酶的活

41、性,一、前列腺特異性抗原（prostate special antigen，PSA）,分子量約為34 000含糖7％的糖蛋白分子由240個氨基酸組成具有蛋白酶的活性，和緩激肽家族的絲氨酸蛋白酶的氨基酸序列相似,,正常人PSA主要存在于精液中，其濃度（0.5～5.5g/L）約為血清（<0.4μg/L ）的100萬倍，每克前列腺癌組織可使血清中PSA升高3μg/L，每克增生的列腺組織可使血清中PSA升高0.3μg/L。,血

42、清中總PSA（t-PSA）包括兩種,較少的是游離型PSA（f-PSA），半衰期0.75～1.2小時大量存在的是復合型PSA （c-PSA），半衰期約2～3天，前列腺癌成功治療后，高濃度的PSA降到正常值約需2～3周。,PSA在前列腺癌各期的濃度范圍,前列腺肥大10.02±8.97μg/L；前列腺癌，A期9.39±8.09μg/L 、B期17.45±8.83μg/L 、C期55.14±51

43、.65μg/L、 D期118.92±50μg/L。一些分化較差的前列腺癌中PSA結果常不太可靠，與前列腺酸性磷酸酶（PACP）同時檢測，以提高診斷的準確率。,,用ELISA法測定，血清PSA的正常值4.8μg/L，良性前列腺肥大時介于兩者之間，約為3.4μg/L。 PSA對前列腺癌具有高度的特異性，總的陽性率可達82～97％之間，PSA測定對包膜內癌的敏感性為70％、轉移癌為100％。,臨床應用 ：,早期發(fā)現(xiàn)前列腺癌

44、臨床分期和預后的判斷監(jiān)測前列腺癌的復發(fā),改善PSA的早期診斷能力的措施,⑴以年齡調整參考值范圍的上限，40～49歲為2.5μg/L，50～59歲為3.5μg/L，60～69歲為4.5μg/L，70～79歲為6.5μg/L；⑵PSA升高的速率，高速增長者（0.75μg/（L*y））為癌癥；⑶PSA密度，即PSA濃度/超聲測量的前列腺體積，如PSA為4～10μg/L，直腸指檢陰性，但密度呈陽性，則可能是前列腺癌；,,⑷f-PSA和t-

45、PSA的比例具有重要的診斷價值。特別是當t-PSA在4.0～10.0μg/L時，血清中f-PSA/t-PSA比值為0.15可作為前列腺肥大和前列腺癌的鑒別臨界點，比值<0.15時前列腺癌的可能性較大。PSA濃度越高，f-PSA/t-PSA比值越小，前列腺癌的可能性就越大。臨床上常用血清中f-PSA/t-PSA的比值來鑒別良、惡性前列腺腫瘤,二、酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）,主要存在于血細胞、一些細胞的溶

46、酶體和前列腺中 前列腺中ACP（PACP）含量可比其他組織高出100～1 000倍，具有免疫特異性，為前列腺組織特異性酶。成年男性血清中1/3～1/2的ACP來自前列腺 女性血清中ACP主要來自于血細胞及破骨細胞,,75％的已轉移前列腺癌患者血清中ACP活力可增高未轉移的前列腺癌患者血清ACP為正常水平或略有升高一旦手術切除后，血清ACP可恢復正常 良性前列腺肥大、部分膀胱癌及某些部位的類癌中也有表達。正常和增生的前列腺組織

47、PACP陽性表達有時強于前列腺癌，甚至少數(shù)前列腺癌還不表達PACP，因此最好與PSA同時應用,三、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）,正常存在于肝臟、胎盤和骨組織異?？梢娪谠l(fā)及繼發(fā)性肝癌、膽管癌、前列腺癌、白血病、肉瘤、淋巴瘤可分成胎盤型、小腸型和肝型3種同工酶ALP與其同工酶相結合，可提高診斷的敏感性和特異性,胎盤型ALP,正常胎盤大量表達，同時在宮頸、睪丸等組織也可出現(xiàn)不同程度的表達 精原細胞

48、瘤、卵巢癌、胃癌、乳腺癌、何杰金病及肝癌中可觀察到不同程度的異常升高。精原細胞瘤患者中，80％以上可見胎盤型ALP的升高，僅有20％存在HCG的升高吸煙者胎盤型ALP可比正常人高10倍以上,肝型ALP,肝型ALP在肝病患者中可有升高在肝癌中陽性率達14.3～24.0％肝型ALP協(xié)助判斷肝癌轉移較優(yōu)可以作為AFP陰性肝癌診斷的輔助指標,骨型ALP（BALP）,大多出現(xiàn)在有骨轉移的腫瘤患者中，尤其是見于某些高鈣型的腫瘤患者單獨測

49、定ALP在腫瘤早期很難反映腫瘤的轉移。如，單獨測定骨型ALP無法區(qū)分正常人、前列腺肥大和前列腺癌對于晚期骨轉移的前列腺癌具有重要的診斷價值。ALP急劇升高常意味著成骨細胞的破壞；ALP緩慢升高意味著溶骨性損傷，常見于乳腺癌的骨轉移,四、α-L-巖藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU）,是水解糖蛋白或糖脂中α-L-巖藻糖苷鍵的酶 存在于多種細胞的溶酶體中，肝癌患者血清中AFU平均含量顯著高于正常,AFU升高的原因：,腫瘤細

50、胞合成AFU的功能亢進正常肝細胞的變性和壞死可使肝攝取和清除AFU的能力下降肝細胞和腫瘤細胞的壞死使溶酶體中的AFU大量釋放入血腫瘤細胞可能分泌某種抑制因子，抑制肝細胞對AFU的清除或分泌某些刺激因子促進肝細胞或腫瘤細胞合成AFU。,用于診斷肝癌的價值：,AFU對肝癌診斷的靈敏度和特異度分別為75％和91％，且與AFP的濃度無明顯的相關性AFP陰性肝癌和小肝癌患者血清中AFU陽性率分別為76.1％和70.8％，其中在小肝癌中AF

51、U的陽性率高于AFP的陽性率轉移性肝癌和良性肝臟占位性病變AFU的假陽性率僅為17.6％,五、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）,烯醇化酶是催化糖酵解途徑中甘油分解的酶。由3個獨立的基因片斷編碼3種免疫學性質不同的亞基α、β、γ，組成的5種同工酶αα、ββ、γγ、αγ、βγ。其中含γ亞基的同工酶主要存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內分泌組織，稱為神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）。含α亞基的同工酶定位于

52、膠質細胞，稱為非神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NNE）。,,NSE在淋巴細胞、平滑肌細胞、肌上皮細胞、腎上皮細胞以及Ⅱ型肺上皮細胞中也有表達在小細胞肺癌和神經(jīng)母細胞瘤中?？梢娪挟惓＿^量的表達在Whims瘤、乳腺癌、胃癌、淋巴瘤中也可有表達。,臨床意義有 ：,用于小細胞肺癌患者的療效觀察、復發(fā)預測和預后評估NSE對小細胞肺癌的敏感度為80％，特異性為80～90％用于神經(jīng)母細胞瘤的診斷、鑒別診斷、療效觀察、復發(fā)預測和預后評估，NSE對兒童型神

53、經(jīng)母細胞瘤陽性率為90％作為精原細胞瘤的腫瘤標記，68.7%的轉移性精原細胞瘤患者在行睪丸切除術前血清NSE水平可見升高,,五、激素類標記物,,激素類腫瘤標記物分類,原位激素（eutopic hormone）異位激素（ectopic hormone）,,原位激素 由內分泌腺體的腫瘤導致相應的激素的過量分泌，往往在未檢出腫瘤前，血清中相應的激素水平即可升高，導致機體出現(xiàn)某些功能亢進。異位激素 是指在正常情況下不產(chǎn)生激素的細胞惡性轉

54、化后形成的腫瘤細胞合成和分泌的激素或激素樣物質。,判定異位激素的條件：,由非內分泌腺體的細胞合成的激素某種內分泌腺體的細胞分泌的是其它內分泌腺體的激素腫瘤患者應伴有相應的內分泌異常綜合征腫瘤細胞在體外培養(yǎng)時也能產(chǎn)生激素腫瘤切除或經(jīng)治療消退時，血清中激素水平下降，內分泌綜合征癥狀改善,激素類腫瘤標記物的特點：,除良性腫瘤外，惡性腫瘤異位激素分泌的量較少，且不恒定，臨床上應用較多的是HCG。除少數(shù)腫瘤外，大部分腫瘤和激素的關系并不

55、固定，有時同一種腫瘤可分泌多種激素，同一激素也可有多種腫瘤分泌。肺癌分泌激素的種類最多。腫瘤發(fā)生時，激素本身并不增加，只是相應的激素受體增加。如乳腺癌病人雌激素和孕激素水平并不增加或增加很少，但其受體數(shù)量可明顯增加。,一、人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin，HCG）,由在妊娠期有胎盤滋養(yǎng)細胞分泌的糖蛋白含145個氨基酸，分子量45kD，半衰期12～20小時HCG由α和β兩個亞基組成，α

56、亞基也是其它激素如卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺素（TSH）的組成部分，β亞基僅存在于HCG中,臨床意義：,早孕診斷可以作為睪丸腫瘤和胎盤腫瘤即絨毛膜上皮癌或葡萄胎的標記物100％滋養(yǎng)體瘤和絨毛膜上皮細胞癌β-HCG異常升高，可達100萬IU/L 70％的非精原細胞性睪丸癌β-HCG低度升高（常和AFP同時升高）10％的精原細胞瘤β-HCG也有升高。,,乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、子宮內膜癌、肝癌、肺癌、白血病和

57、淋巴瘤患者中也可見有HCG輕度升高肝硬化、十二指腸潰瘍和一些炎癥中也可見有升高此外，由于β-HCG無法穿過血腦屏障，所以一旦腦脊液中出現(xiàn)β-HCG，并且和血清中β-HCG的比例超過1：60，常預示著出現(xiàn)腦轉移,二、兒茶酚胺類物質（catecholamines，CA）,兒茶酚胺類物質是一類結構中都含有兒茶酚的物質的總稱，包括腎上腺素、去甲腎上腺素、香草扁豆酸（vanillylmandelic acid，VMA）等。,,腎上腺素 檢測尿

58、中腎上腺素濃度可間接地了解體內兒茶酚胺的分泌香草扁豆酸增多主要見于嗜鉻細胞瘤患者，交感神經(jīng)節(jié)細胞瘤和神經(jīng)母細胞瘤 高香草酸升高可見于神經(jīng)母細胞瘤和兒童交感神經(jīng)瘤 促腎上腺皮質激素（ACTH）大約70％的肺癌病人有ACTH的升高，升高的ACTH大多無生物活性，但可生成黑色素細胞刺激素，故肺癌病人很少合并庫欣綜合癥，但常伴有皮膚色素沉著。,六、其他腫瘤標記物,多胺唾液酸抗EB病毒相關抗原的抗體,一、多胺（polyamines）,腐

59、胺（putrecine）精脒（spermidine）精胺（spermine）尸胺（cadaverine） 多胺可與核酸結合，增強核酸和蛋白質的合成，促進細胞增值。細胞快速生長促使多胺生成增加，而多胺的增加又為細胞快速生長提供了條件。,,在生長旺盛的組織，如胚胎組織、再生組織以及癌組織，均有多胺合成并分泌至胞外，使血清和尿中的多胺濃度升高。血清中以腐胺升高最為常見，其次是精脒，且多胺的增多和腫瘤的生長相一致，是追蹤病情變化的比較

60、理想的指標。精脒是了解腫瘤細胞破壞的指標，可借此判斷化療藥物的療效。 腐胺水平和細胞增值有關，它可用于評估腫瘤生長速度。,,非癌性患者如細菌感染、創(chuàng)傷或骨愈合以及失血或貧血恢復期也可見有尿中多胺的升高 癌癥患者尿中多胺明顯高于正常人 ，其中尿中三類多胺（腐胺、精脒、精胺）全部升高是惡性腫瘤所獨有的 ，精脒和腐胺的陽性率分別為78％和52％ 只有用高效液相色譜（HPLC）熒光衍生法才能測定，難以推廣,2．血清唾液酸和唾液酸?；D移

61、酶,唾液酸（sialic acid，SA）在生物組織和體液中大量分布，是細胞膜糖蛋白的重要組成部分，與生物體的許多生物學功能有關，且與細胞惡變、腫瘤浸潤、轉移、失去接觸性抑制、細胞粘附性降低以及腫瘤的抗原性密切相關。唾液?；D移酶（saliva transacylase，ST）是神經(jīng)節(jié)苷脂的成分之一，能催化唾液酸轉移至糖蛋白或糖脂受體上，與細胞膜的形成和正常功能的維持有關，在調節(jié)細胞生長及細胞間信息的溝通上起重要的作用。,,在中晚期乳

62、腺癌、前列腺癌、卵巢癌、肺癌及淋巴瘤中，血清總唾液酸的濃度（TSA）可顯著升高。 檢測總唾液酸（TSA）中的脂質結合唾液酸（LSA）對惡性腫瘤的診斷更敏感、更特異，應用更多。,唾液?；D移酶,脂質唾液酰基轉移酶（LASA）糖蛋白結合?；D移酶（GPSA）游離唾液?；D移酶（FSA） 目前臨床上常測定的唾液?；D移酶多為LASA和GPSA的混合物，稱為唾液酸酶,,TSA、LSA、LASA、GPSA的臨床價值近似，都是廣譜腫瘤標記物

63、肺癌、乳腺癌、子宮頸癌、胃腸道腫瘤、鼻咽癌、血液系統(tǒng)腫瘤病人的血清和尿中的TSA和LASA的濃度均可見升高陽性率在61～80％之間假陽性率在12～21％之間，假陽性主要見于風濕性關節(jié)炎等膠原系統(tǒng)疾病和肝臟的一些疾病,3．抗EB病毒相關抗原的抗體,EB病毒與伯基特淋巴瘤、何杰金病和鼻咽癌的關系十分密切。 伯基特淋巴瘤和鼻咽癌患者外周血中都含有高滴度的抗EB病毒相關抗原的抗體，如抗殼抗原（VCA）和早期抗原（EA）的抗體。為 EB病

64、毒感染后機體免疫系統(tǒng)的反應性產(chǎn)物,臨床意義：,用于診斷 正常人VCA-Ig A陽性率為8％，鼻咽癌患者的陽性率為90％；EA-Ig A診斷鼻咽癌的特異性為98％，敏感性為50％。臨床上通常將二者聯(lián)合應用高危人群的檢測 以VCA-Ig A滴度≥ 1：5或VCA-Ig A滴度≥1：40或在定期檢查中抗體的水平持續(xù)上升者列入鼻咽癌的高危人群監(jiān)測療效 VCA-Ig A抗體滴度與鼻咽癌病程相關,七、多種腫瘤標記物聯(lián)合應用,腫瘤標記物的現(xiàn)實：

65、1.腫瘤標記物非常之多 2.單個標記物的敏感性或特異性偏低，不能滿足臨床要求。3.理論上和實踐上都提倡一次同時測定多種標記物，以提高敏感性和特異性。,腫瘤標記物聯(lián)合應用的要點,靈敏度與特異性的關系假陰性與假陽性的關系腫瘤標記物與患者個體差異的關系和與患者臨床具體情況的關系腫瘤標記物的分析要結合臨床情況，從多個角度比較，才能得出客觀真實的結論腫瘤標記物不是腫瘤確診的唯一依據(jù)，腫瘤確診是一定要有組織或細胞病理學的診斷依據(jù)。,主要

66、腫瘤的常用多標記組合,肝癌首選AFP、CEA和CA19-9，AFP是原發(fā)性肝癌診斷、鑒別診斷、療效及預后評估的必測指標。CEA對于繼發(fā)性肝癌具有良好的診斷率。其他如γ-谷氨酸轉肽酶(γ-GT)、CD24。近年來開展了應用RT-PCR技術擴增AFP基因轉錄ｍRNA來進行診斷原發(fā)性肝癌，其陽性率為36%。,,肺癌非小細胞性肺癌 (NSCLC) 一般首選CEA和鱗狀上皮癌相關抗原（ SccAg)；小細胞肺癌(SCLC)一般首選NSE、

67、CEA和降鈣素(CT)。 乳腺癌首選CA15-3和CEA，其他的TM對乳腺癌的早期診斷陽性率較低。,,前列腺癌首選PAP、PSA和F-PSA。近年來又提出PSA密度、 PSA升高的速率、以年齡調整參考值范圍的上限和f-PSA和t-PSA的比例等指標，以提高診斷前列腺癌的陽性率此外開展了PCR檢測PSA ｍRNA和RT-PCR檢測前列腺特異性膜抗原(PSM)等的研究工作。,,胰腺癌首選CA19-9和CEA等。在胰腺癌病人中CA