龍馬微丸的體外溶出度研究-藥學(xué)畢業(yè)論文.

1、<p><b>　　湘潭大學(xué)畢業(yè)論文</b></p><p>　　題 目：龍馬微丸的體外溶出度研究 </p><p>　　學(xué) 院： 化學(xué)學(xué)院 </p><p>　　專 業(yè)： 藥 學(xué) </p><p>　　學(xué) 號(hào)： 2

2、010601017 </p><p>　　姓 名： 徐 玉 靈 </p><p>　　指導(dǎo)教師： 吳萍 講師 </p><p>　　完成日期： 2014年 5 月 29日 </p><p><b>　　湘 潭 大 學(xué)</b></p>

3、;<p>　　畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)書</p><p>　　論文（設(shè)計(jì)）題目： 龍馬微丸的體外溶出度研究 </p><p>　　學(xué)號(hào)： 2010601017 姓名： 徐玉靈 專業(yè)： 藥 學(xué)

4、 </p><p>　　指導(dǎo)教師： 吳萍 系主任： 彭圣明 </p><p>　　一、主要內(nèi)容及基本要求 </p><p>　　1．掌握微丸制劑相關(guān)知識(shí)，查閱文獻(xiàn)同時(shí)結(jié)合課堂所學(xué)了解微丸制劑，

5、重點(diǎn)掌握微丸的研制過(guò)程以及體外溶出度。 </p><p>　　2．通過(guò)查閱文獻(xiàn)了解龍馬自來(lái)丹的相關(guān)應(yīng)用知識(shí)，包括化學(xué)成分、物理化學(xué)性質(zhì)、藥理作用、毒理作用、臨床應(yīng)用等，在理解文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上根據(jù)自身專業(yè)知識(shí)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，并能在做實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題并及時(shí)的通過(guò)各種渠道解決問(wèn)題。重

6、點(diǎn)掌握馬錢子的性質(zhì)，特別是馬錢子堿的檢測(cè)方法，以及高效液相色譜儀器的使用方法。 </p><p>　　3．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要掌握實(shí)驗(yàn)的基本操作方法，提高動(dòng)手能力，提高處理突發(fā)事件的能力，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)中的安全意識(shí)。結(jié)果分析過(guò)程中要求掌握分析儀器的使用方法，并能對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行全面的分析，得出正確的結(jié)論。

7、 </p><p>　　4．掌握科技論文的寫作方法，撰寫合格的畢業(yè)論文。 </p><p><b>　　二、重點(diǎn)研究的問(wèn)題</b></p><p>　　1．確定檢測(cè)物質(zhì)，優(yōu)化高效

8、液相色譜儀器條件，以及樣品去蛋白處理的方法。 </p><p>　　2． 參照2010年版《中國(guó)藥典》及相關(guān)文獻(xiàn)確定馬錢子堿含量測(cè)定方法。 </p><p>　　3．確定龍馬微丸的溶出規(guī)

9、律，計(jì)算龍馬微丸的累積溶出量，做原藥材對(duì)比實(shí)驗(yàn)，考察成丸后的龍馬微丸的溶出特性變化，用不同溶出介質(zhì)做溶出實(shí)驗(yàn)，考察不同溶出環(huán)境對(duì)龍馬微丸溶出度的影響。 </p

10、><p><b>　　三、進(jìn)度安排</b></p><p>　　四、應(yīng)收集的資料及主要參考文獻(xiàn)</p><p>　　1.李明輝，李鳳琴，王廣林．三波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定壯筋骨膠囊中的士的寧的含量[J]．時(shí)珍國(guó)藥研究，1995，6(3)；17.

11、 </p><p>　　2.羅晉萍，張中蘇，連云嵐，等．薄層掃描法測(cè)定金龍祛痹丸中士的寧的含量口]．藥物分析雜志，1999，19(3)：179—180． </p><p>　　3.王琳，薛玉梅．薄層掃描法測(cè)定暈復(fù)靜片中士的寧含量

12、[J]．基層中藥雜志，1999，13(2)：9．</p><p>　　4.陳勇，黃敏，陸中海，等．十一藥酒的質(zhì)量控制研究[J]．廣西中醫(yī)藥，2002，24，25(2)：57—59. </p><p>　　5.姬

13、生國(guó)，王東，李娥，等．三鼎丹膠囊中士的寧的含量測(cè)定[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17(1)j 64—65． </p><p>　　6.張錚．HPLC法測(cè)定暈復(fù)靜片中士的寧和馬錢子堿的含量[J]．安徽醫(yī)藥，2003，7(3)：214—216．&l

14、t;/p><p>　　7.楊安東，馬艷，吳詩(shī)慧，等．骨痛寧搽劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]．中成藥，2005，27(12)：1400—1404．</p><p>　　8.張凌云，張翔，馮慧憑．RP—HPLC法測(cè)定伸筋丹膠囊中士的寧和馬錢子堿的含量[J]．江蘇藥學(xué)與臨床研究，2004，lZ(3)：32—34．

15、 </p><p>　　9.王冬月，陳軍，蔡寶昌.馬錢子堿血藥濃度測(cè)定方法的優(yōu)化與應(yīng)用[J].中國(guó)中藥雜志，2013，7:1075～1078 </p><p>　　10.國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典2010版二部[

16、M].2012年10月1日。正文第21頁(yè)。 </p><p>　　11.李彥超，蔡寶昌，李偉東，狄留慶.馬錢子總生物堿的測(cè)定及其提取條件的正交設(shè)計(jì)優(yōu)選[J].中藥新藥與臨床藥理,2004(1)15. </p><p>　　12.湯淮波，張令君,李湘玲,孫成風(fēng)，

17、馬丕江.不同溶劑提取馬錢子中士的寧與馬錢子堿的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009，15(11)122~125. </p><p>　　13.付麗佳，王玉華。當(dāng)歸補(bǔ)血丸中阿魏酸溶出度測(cè)定[J]。中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2013,15(3)188~191.</p><p>　　14.

18、 姚彤煒編著。體內(nèi)藥物分析[M]。浙江大學(xué)出版社。2001年01月第1版,第49頁(yè) </p><p><b>　　湘 潭 大 學(xué)</b></p><p>　　畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）評(píng)閱表</p><p>　　學(xué)號(hào) 2010601017 姓名 徐 玉 靈 專業(yè) 藥 學(xué)

19、 </p><p>　　畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目： 龍馬微丸的體外溶出度 </p><p><b>　　湘 潭 大 學(xué)</b></p><p>　　畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）鑒定意見(jiàn)</p><p>　　學(xué) 號(hào)： 2010601017 學(xué)生姓名： 徐 玉 靈 專

20、 業(yè)： 藥 學(xué) </p><p>　　畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)說(shuō)明書） 19 頁(yè) 圖 表 16 張</p><p><b>　　目錄</b></p><p>　　摘要...................................................

21、..........................................................2</p><p><b>　　一、引言3</b></p><p>　　1.龍馬自來(lái)丹簡(jiǎn)介3</p><p>　　2.馬錢子成分測(cè)定的研究進(jìn)展3</p><p>　　2.1分光光度法3</p&

22、gt;<p>　　2.2薄層掃描法4</p><p><b>　　2.3色譜法5</b></p><p><b>　　2.4其他方法5</b></p><p>　　3.本文的主要研究?jī)?nèi)容及意義6</p><p><b>　　二、實(shí)驗(yàn)7</b></p

23、><p><b>　　2.1實(shí)驗(yàn)材料7</b></p><p>　　2.1.1實(shí)驗(yàn)儀器7</p><p>　　2.1.2實(shí)驗(yàn)主要試劑7</p><p>　　2.2分析方法的建立7</p><p>　　2.2.1色譜條件優(yōu)化7</p><p>　　2.2.2 指標(biāo)物質(zhì)選

24、擇8</p><p>　　2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制9</p><p>　　2.2.4去蛋白方法10</p><p>　　2.1.5地龍粉陰性對(duì)照試驗(yàn)11</p><p>　　2.1.6精密度及溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)11</p><p>　　2.2自制龍馬微丸的含量測(cè)定12</p><p>　

25、　2.2.1提取方法12</p><p>　　2.2.2含量計(jì)算12</p><p>　　2.3龍馬微丸溶出實(shí)驗(yàn)13</p><p>　　2.4中藥原材料對(duì)照實(shí)驗(yàn)14</p><p>　　2.5不同溶出介質(zhì)的影響15</p><p><b>　　三、結(jié)論16</b></p>

26、<p>　　3.1關(guān)于分析方法的結(jié)論16</p><p>　　3.2自制龍馬微丸溶出規(guī)律及特性的結(jié)論16</p><p><b>　　四、 討論16</b></p><p>　　4.1關(guān)于分析方法的討論16</p><p>　　4.2自制龍馬微丸溶出規(guī)律及特性的討論17</p>&l

27、t;p><b>　　參考文獻(xiàn)18</b></p><p><b>　　致謝19</b></p><p>　　龍馬微丸的體外溶出度研究</p><p><b>　　中文摘要</b></p><p>　　目的：考察龍馬微丸的體外溶出度，并對(duì)其釋藥特性進(jìn)行探討。</p

28、><p>　　方法：采用高效液相色譜測(cè)定龍馬微丸的溶出樣品，確定去蛋白處理后樣品的液相條件。在不同溶出介質(zhì)條件下考察不同環(huán)境對(duì)龍馬微丸溶出度的影響，并對(duì)比馬錢子粉及馬錢子與地龍的混合粉溶出規(guī)律,考察成丸后的龍馬微丸的溶出規(guī)律。</p><p>　　結(jié)果：液相條件：流動(dòng)相為甲醇—水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75），選馬錢子堿為檢測(cè)物質(zhì)；自制龍馬微丸溶出迅速，酸性介質(zhì)有利于龍馬微丸馬錢

29、子堿的溶出。</p><p>　　結(jié)論：該溶出度測(cè)定分析方法簡(jiǎn)便易行，準(zhǔn)確可靠，可以用于龍馬微丸的質(zhì)量控制。</p><p>　　關(guān)鍵字：龍馬微丸，高效液相，溶出度</p><p>　　In vitro dissolution rate of the Homemade Longma Pellets</p><p><b>　　Abs

30、tract</b></p><p>　　Objective:To investigate the vitro dissolution rate of Longma pellets ;And explore its release characteristics.</p><p>　　Methods: HPMC was used as the matrix material ？t

31、o determinate the dissolution of the sample Longma pellets;to determine the liquid condition of the sample that protein has been processed. to investigate the influence of the vitro dissolution rate of Longma pellets und

32、er different conditions:</p><p>　　Results:HPLC Conditions：the suitable mobile phase is methanol---water (Containing1%triethylamine and 0.3%formic acid); the Homemade Longma Pellets have the rapid dissolution

33、 rate,and acidic environment helps the dissolution of the Homemade Longma Pellets.</p><p>　　Conclusion:The established dissolution method was accuracy，sensitive and simple．It can be used for quality control

34、of the Homemade Longma Pellets.</p><p>　　Key words:Longma pellets,HPLC,Dissolution</p><p><b>　　請(qǐng)仔細(xì)核對(duì)英文摘要</b></p><p><b>　　一、引言</b></p><p><b&g

35、t;　　1.龍馬自來(lái)丹簡(jiǎn)介</b></p><p>　　龍馬自來(lái)丹的處方來(lái)源于《醫(yī)林改錯(cuò)》卷下。書中記載的功能主治為癇癥。藥物組成：馬錢子8兩，地龍8條（去土，焙干為末)，香油1斤。將香油入鍋內(nèi)熬滾，入馬錢子炸之，待馬錢子微有響爆之聲，拿1個(gè)用刀切兩半，看其內(nèi)以紫紅色為度，研為細(xì)末；再入前地龍末和勻，面糊為丸，如綠豆大。用法用量：每服3-4分，臨臥以鹽水送下。如不為丸，面子亦可服。該藥對(duì)癇癥的治愈率極

36、高，一直沿用至今。</p><p>　　隨著現(xiàn)代藥理學(xué)研究的發(fā)展，研究人員逐漸發(fā)現(xiàn)龍馬自來(lái)丹可以運(yùn)用到其他的疾病上，與此同時(shí)，通過(guò)適當(dāng)?shù)匦薷呐浞?、改變劑型使得龍馬自來(lái)丹的應(yīng)用又有了新的進(jìn)展。</p><p>　　馬錢子成分測(cè)定的研究進(jìn)展</p><p>　　馬錢子為馬錢子科植物馬錢Strychnos nuxvomica L. 或云南馬錢Strychnos pierr

37、ana A. W. Hill 的干燥成熟種子，是常用中藥。具有通絡(luò)止痛、散結(jié)消腫之功效。士的寧、馬錢子堿是馬錢子及其制劑的有效成分，通常作為馬錢子及以馬錢子為主要處方成分的復(fù)方制劑分析的指標(biāo)物質(zhì)，我國(guó)醫(yī)藥研究者在馬錢子及其制劑中化學(xué)成分的測(cè)定做了很多工作，使馬錢子及其制劑的分析技術(shù)更加精確成熟。查閱文獻(xiàn)資料，現(xiàn)將幾年來(lái)馬錢子成分測(cè)定的研究進(jìn)展做簡(jiǎn)要總結(jié)如下。</p><p><b>　　2.1分光光度法

38、</b></p><p>　　2.1.1紫外分光光度法</p><p>　　利用士的寧、馬錢子堿分別在255、264nm處有最大吸收而測(cè)定其含量。黃馳等采用薄層色譜法在硅膠GF254板上分離得到的士的寧，再用紫外分光光度法測(cè)定，計(jì)算其中的含量。</p><p>　　2.1.2 雙波長(zhǎng)法</p><p>　　特點(diǎn)是用一個(gè)吸收池和兩束

39、不同波長(zhǎng)的光進(jìn)行測(cè)定。通常干擾組分吸收光譜在這兩個(gè)波長(zhǎng)處具等同吸收，可消除共存組分的干擾。有研究者將暈復(fù)靜片經(jīng)適當(dāng)溶媒提取后，分別測(cè)定在λ262nm，λ300nm處的吸光度，計(jì)算士的寧含量。還有報(bào)道用此法測(cè)定風(fēng)濕馬錢片中士的寧的含量和金錢白花蛇藥酒中士的寧的含量。</p><p>　　2.1.3 三波長(zhǎng)法</p><p>　　根據(jù)選定干擾組分吸收光譜上為一條直線的3個(gè)不同波長(zhǎng)，利用比例關(guān)系

40、消除干擾組分對(duì)測(cè)定的影響。李明輝等配置適當(dāng)濃度的士的寧及馬錢子堿的標(biāo)準(zhǔn)溶液及不含馬錢子的空白壯筋骨膠囊樣品提取液，并將上述3種溶液于210～320nm波長(zhǎng)掃描，計(jì)算馬錢子堿及陰性樣品在3個(gè)波長(zhǎng)處吸光度成一條直線，224nm，264nm，267nm為測(cè)定壯筋骨膠囊中士的寧含量的精選測(cè)定波長(zhǎng)測(cè)定士的寧的含量。</p><p>　　2.1.4 正交函數(shù)分光光度法</p><p>　　以士的寧及馬

41、錢子堿在240~290nm 波長(zhǎng)區(qū)間內(nèi)呈二次吸收曲線，故采用二次正交多項(xiàng)式為特征多項(xiàng)式，以264nm，269nm，284nm 和298nm 的幾個(gè)測(cè)試點(diǎn)，按P=5A1一A2—4A3— 4A4一A5+5A6計(jì)算各式中間波長(zhǎng)P值，通過(guò)P值轉(zhuǎn)換曲線，選擇276.5nm為測(cè)定士的寧的中間波長(zhǎng)測(cè)定壯筋骨膠囊，回收率99．3％。</p><p><b>　　2.2薄層掃描法</b></p>

42、<p>　　2.2.1單波長(zhǎng)反射法鋸齒掃描</p><p>　　羅晉萍等以甲苯一丙酮一乙醇一濃氨液(30：20：3：1)為展開(kāi)劑，測(cè)定波長(zhǎng)為254nm，對(duì)金龍祛痹丸中士的寧的含量進(jìn)行測(cè)定。點(diǎn)樣量在0.54～3.21腭范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。報(bào)道用硅膠GF254薄層板，環(huán)已烷一氯仿一甲醇(7．5：4：1)為展開(kāi)劑，在256nm波長(zhǎng)測(cè)定骨刺膠囊中士的寧含量，結(jié)果點(diǎn)樣量在1．10～5．50µg范圍內(nèi)與

43、積分值呈線性關(guān)系，平均回收率為100．16％ 。</p><p>　　2.2.2雙波長(zhǎng)薄層掃描法</p><p>　　王琳等用雙波長(zhǎng)反射法鋸齒形掃描測(cè)定暈復(fù)靜片中士的寧含量。用硅膠GF254，展開(kāi)劑為甲苯一丙酮一乙醇一濃氨(8:6:0.5:0.5)λ=245nm，λ=300 nm，Sx=30；點(diǎn)樣量在0.536~3.216µg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。陳曉斌等用雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定

44、風(fēng)濕痹痛丸士的寧、馬錢子堿、烏頭堿的含量。測(cè)定波長(zhǎng)503nm，參比波長(zhǎng)550 nm，結(jié)果面積積分平均值為47519．17，標(biāo)準(zhǔn)差為762．37，平均回收率士的寧99．9％。陳勇等在十一方藥酒的質(zhì)量控制研究中測(cè)定馬錢子堿和士的寧的含量，結(jié)果λ=500nm，λ=650nm，Sx=3士的寧含量在1.063～5.315µg之間，點(diǎn)樣量與峰面積呈良好線性關(guān)系。姬生國(guó)等以甲苯：丙酮：乙醇：濃氨溶液(16：12：1：4)的上層溶液為展開(kāi)劑，

45、在λ=254nm，λ325nm，測(cè)定三鼎丹膠囊中士的寧的含量，結(jié)果在1.026~5.130µg之間，線性關(guān)系良好，樣品平均回收率為99．5％。</p><p><b>　　2.3色譜法</b></p><p>　　2.3.1薄層掃描法( TLCS)</p><p>　　在各類色譜分析中TLCS 使用頻率最高，普遍采用的是雙波長(zhǎng)反射法鋸

46、齒形掃描。該方法使用薄層厚度不同而引起的基線噪音得到補(bǔ)償，又可克服斑點(diǎn)不規(guī)則而引起的誤差。定量方法分外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。對(duì)其馬錢子的中成藥制劑( 馬錢子散、滋陰補(bǔ)腎丸、養(yǎng)血祛風(fēng)丸、傷科七味片、益髓沖劑) 用甲苯-丙酮-乙醇-氨水系統(tǒng)在硅膠G板展開(kāi)，紫外燈( 254nm) 定位，雙波長(zhǎng)鋸齒反射掃描對(duì)馬錢子堿和士的寧進(jìn)行分離和含量測(cè)定，可有效控制藥品質(zhì)量，且結(jié)果準(zhǔn)確。士的寧、馬錢子堿是風(fēng)濕痹痛丸中的有效成分，也是其毒性成分，用硅膠G板，正丁醇-

47、苯-乙酸乙酯-甲醇-氨水( 20.3:14.5:23:1.5:30) 展開(kāi) 0. 05 mol/L 硫酸-碘化鉍鉀試液顯色，鋸齒反射掃描外標(biāo)兩點(diǎn)法定量測(cè)定其制劑中馬錢子堿、士的寧含量，回收率分別為99. 0%，99. 9%。九分散中麻黃、馬錢子、乳香和沒(méi)藥組成，經(jīng)氯仿-甲醇-氨水展開(kāi)，雙波長(zhǎng)鋸齒反射掃描測(cè)定士的寧、馬錢子堿和麻黃堿。對(duì)中藥馬錢子提取液用高效硅膠GF薄層板，反射直線掃描，以λ260nm 為測(cè)定波長(zhǎng)λ355nm 為參比波長(zhǎng)

48、在線形范圍1.0~5.0pg/ml 內(nèi)測(cè)其含量。</p><p>　　2.3.2 高效液相色譜法(HPLC)</p><p>　　HPLC以經(jīng)典液相色譜法為基礎(chǔ)：引入氣相色譜理論及實(shí)驗(yàn)方法，流動(dòng)相采用高壓輸送，采用高效固定相及在線檢測(cè)手段而發(fā)展起的分離分析方法。因其不受物質(zhì)沸點(diǎn)，熱穩(wěn)定性，有機(jī)物或無(wú)機(jī)物的限制，具有適用范圍廣分離效率高，分析速度快，靈敏度高等特點(diǎn)。所以，近年來(lái)，該法已廣泛用

49、于中草藥及其制劑化學(xué)成分分離，鑒定及含量測(cè)定。王冬月等以0．01 mol/L 庚烷磺酸鈉與0．02 mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液(10％ 的磷酸調(diào)節(jié)pH2．8)，乙腈(76：24)為流動(dòng)相264為檢測(cè)波長(zhǎng)，正相HPLC法測(cè)血液中馬錢子堿的濃度，用此法避免了采用反相HPLC 法測(cè)定士的寧和馬錢子堿含量時(shí)色譜峰拖尾嚴(yán)重，分析分離時(shí)間長(zhǎng)的缺點(diǎn)， 其結(jié)果與1995 版《中國(guó)藥典》其含量測(cè)定比較，結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高。楊安東等在骨痛寧搽劑的質(zhì)量

50、標(biāo)準(zhǔn)研究中采用高效液相色譜法對(duì)方中淫羊藿中淫羊藿昔、馬錢子中士的寧進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：士的寧在0．4～4．8 µg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。張凌云等用RP—HPLC法測(cè)定伸筋丹膠囊中士的寧和馬錢子堿的含量，采用Hypersil C18色譜柱(4．6ram×200mm，10µm)，水一乙腈(80：20)(</p><p><b>　　2.4 其他方法</b></p

51、><p>　　4．1 毛細(xì)管區(qū)帶電泳法</p><p>　　姜堯舜等應(yīng)用本法對(duì)伸筋丹膠囊中士的寧和馬錢子堿成分進(jìn)行了分離研究。采用pH=6.0,0.2mol／L磷酸溶液作為緩沖液；運(yùn)行電壓20kV；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，被測(cè)成分可得到較好分離。用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定其含量，在0.02～0.15mg／ml范圍內(nèi)，士的寧和馬錢子堿均與內(nèi)標(biāo)峰面積之比呈良好線性關(guān)系，平均回收率分別為95.1％和96.4％。&l

52、t;/p><p>　　4．2 流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析法</p><p>　　朱龍等利用馬錢子堿、士的寧和麻黃類生物堿在KMnO4-H+-還原體系中的化學(xué)發(fā)光(CL) 行為而更建立起來(lái)的分析方法，并將此與HPLC 聯(lián)用實(shí)現(xiàn)上述物質(zhì)的選擇性測(cè)定，目前，此法已用于一些藥物中馬錢子堿等生物堿的測(cè)定。</p><p>　　4．3 硅膠柱準(zhǔn)離子交換色譜法</p><

53、;p>　　此法對(duì)馬錢子及其炮制品馬錢子中士的寧含量測(cè)定，并與《中國(guó)藥典》收載的計(jì)算分光光度法進(jìn)統(tǒng)計(jì)對(duì)比。本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，不受其它成分干擾；經(jīng)配對(duì)比較t檢驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，測(cè)定結(jié)果與分光光度法差異有極顯著性(P<O．O1)。</p><p>　　3.本文的主要研究?jī)?nèi)容及意義</p><p>　　龍馬自來(lái)丹是來(lái)源于《醫(yī)林改錯(cuò)》卷下的一味古方，功能主治為癇癥，現(xiàn)代臨床應(yīng)用研究其

54、對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、小兒癇癥、神經(jīng)根型頸椎病等疾病有較好的療效。微丸是指直徑小于 2.5 mm 的各類球形或類球形的制劑，具有外形美觀、流動(dòng)性好、比表面積大、生物利用度高等特點(diǎn)。中藥微丸包衣后可掩蓋不良?xì)馕?，減少某些藥物刺激性，增加藥物穩(wěn)定性，特別是改善中藥浸膏易吸潮的特性，還可通過(guò)包衣制成緩控釋劑型，服用方便，且能降低藥物的毒副作用。</p><p>　　本課題組組成員通過(guò)擠出滾圓制粒法將龍馬自來(lái)丹制備成中藥復(fù)方

55、微丸，本實(shí)驗(yàn)旨在探究成丸后的龍馬微丸其體外溶出度及釋藥特性，建立自制龍馬微丸溶出度的測(cè)定方法，以全面評(píng)價(jià)龍馬微丸的特性。</p><p><b>　　二、實(shí)驗(yàn)</b></p><p><b>　　2.1實(shí)驗(yàn)材料</b></p><p><b>　　2.1.1實(shí)驗(yàn)儀器</b></p>&l

56、t;p>　　電子天平,長(zhǎng)沙湘平科技發(fā)展有限公司，型號(hào)：ES-HA。</p><p>　　分析天平，余姚市紀(jì)銘稱重校驗(yàn)設(shè)備有限公司，型號(hào)：MB-2003。</p><p>　　遠(yuǎn)紅外快速恒溫干燥箱，上海醫(yī)療越進(jìn)醫(yī)療器械廠，型號(hào)：YHG-600BS。</p><p>　　藥物溶出試驗(yàn)儀，天津市正通科技有限公司，型號(hào)：DT-8。</p><p&g

57、t;　　高效液相色譜儀，日本島津有限公司，型號(hào)：LC-20A。</p><p>　　智能恒溫磁力攪拌器，河南愛(ài)博特科技發(fā)展有限公司，型號(hào)：ZNCL-G。</p><p>　　微型渦旋混合儀，上海滬西分析儀器廠有限公司，型號(hào)：60227。</p><p>　　2.1.2實(shí)驗(yàn)主要試劑</p><p>　　乙腈，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：

58、20140214，500ml/瓶。</p><p>　　甲醇，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20130610,500ml/瓶。</p><p>　　生馬錢子，株洲市榮康飲片廠。</p><p>　　地龍，株洲市榮康飲片廠。</p><p>　　氫氧化鈉，天津市復(fù)興科技發(fā)展有限公司，批號(hào)：20111108,500g/瓶。</p>

59、<p>　　馬錢子堿標(biāo)品，中國(guó)食品檢定研究院，批號(hào)：9U7Z—HJPD，200mg/瓶。</p><p>　　三氯甲烷，天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號(hào)：110601，500ml/瓶。</p><p>　　冰醋酸，長(zhǎng)沙湘科精細(xì)化工廠，批號(hào)：20100307，500ml/瓶。</p><p>　　無(wú)水醋酸鈉，廣東省臺(tái)山市化工廠，批號(hào)：20090712,50

60、0g/瓶。</p><p>　　2.2分析方法的建立</p><p>　　2.2.1色譜條件優(yōu)化</p><p>　　色譜柱：Intersustain C柱（4.6 mm×250 mm,5μm）。參照中國(guó)藥典2010年版（一部）化學(xué)成分分析，馬錢子檢測(cè)指標(biāo)物質(zhì)可選擇士的寧、馬錢子堿，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為254nm、264nm。 </p><

61、p>　　參考相關(guān)文獻(xiàn)流動(dòng)相為甲醇--水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）。 另有相關(guān)文獻(xiàn)用流動(dòng)相為甲醇--水（含1%甲酸+0.3%醋酸銨）。本實(shí)驗(yàn)用兩種流動(dòng)相體系，樣品為溶出實(shí)驗(yàn)1h取樣所制備的供試品。色譜圖如下：</p><p>　　圖1：流動(dòng)相體系甲醇—水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25：75）時(shí)供試品的HPLC色譜圖</p><p>　　圖2：流動(dòng)相體系甲醇—水（含1%甲酸+0

62、.3醋酸銨）（25:75）時(shí)供試品的HPLC色譜圖</p><p>　　從圖1、2可以看出選擇甲醇--水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）為流動(dòng)相體系較為適宜，其中A泵為有機(jī)相甲醇，B泵為水相，進(jìn)龍馬微丸溶出實(shí)驗(yàn)供試品，將B泵比例調(diào)為：70%、75%、80%。水相為70%各物質(zhì)沒(méi)有分開(kāi)；加大水相比例為75%，同條件進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)品，士的寧、馬錢子堿的保留時(shí)間分別為10.3min、12.6min，馬、士分離較好。再加大水相為8

63、0%，士的寧保留時(shí)間較長(zhǎng)為16.6min，馬錢子堿20min內(nèi)未出峰。</p><p>　　綜上所述，后續(xù)實(shí)驗(yàn)選擇流動(dòng)相為甲醇-水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75）為宜。</p><p>　　2.2.2 指標(biāo)物質(zhì)選擇</p><p>　　馬錢子檢測(cè)的指標(biāo)物質(zhì)通常為士的寧和馬錢子堿，本實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相體系甲醇-水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75），25

64、4nm波長(zhǎng)時(shí)，士的寧保留時(shí)間約10.5min,龍馬微丸溶出1h供試品士的寧有雜質(zhì)干擾（如圖3），疑似是綠原酸，綠原酸的最大吸收波長(zhǎng)為327nm（如圖4）,可認(rèn)為馬錢子在自制龍馬微丸制作過(guò)程中，由于馬錢子的炮制或龍馬微丸的制備工藝的因素，使檢測(cè)時(shí)士的寧被綠原酸干擾。馬錢子堿保留時(shí)間為12.1min,無(wú)明顯雜質(zhì)干擾，分離度較好，故選馬錢子堿做為指標(biāo)物質(zhì)，對(duì)龍馬微丸溶出做定量分析。</p><p>　　圖3：龍馬微丸1

65、h取樣制備供試品264nm波長(zhǎng)處色譜圖</p><p>　　圖4：龍馬微丸1h取樣制備供試品327nm波長(zhǎng)處色譜圖</p><p>　　2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)使用的馬錢子堿標(biāo)準(zhǔn)品為中國(guó)食品檢測(cè)研究院提供的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，含量為91.7%。取10.8mg,配成99.036µg/ml，取4ml99.036µg/ml溶液

66、稀釋成25ml，以此15.8458µg/ml溶液為母液，按下表稀釋：</p><p>　　表1 ：母液標(biāo)準(zhǔn)品溶液的稀釋</p><p>　　將標(biāo)準(zhǔn)品依次進(jìn)樣，264nm波長(zhǎng)下保留時(shí)間12.9min處，計(jì)算馬錢子堿的峰面積。如下表：</p><p>　　表2：不同濃度馬錢子堿標(biāo)準(zhǔn)品峰面積</p><p>　　按表2所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果，濃度為

67、橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)作圖，得馬錢子堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖：</p><p>　　圖5：馬錢子堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖</p><p>　　從馬錢子堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以看出:峰面積y與供試品濃度x的關(guān)系為y=87334x，且R=0.9999說(shuō)明在溶出條件下的濃度范圍內(nèi)馬錢子堿的線性關(guān)系良好。</p><p>　　2.2.4去蛋白方法</p><p>　　龍馬微丸

68、制備使用原藥材為馬錢子和地龍，地龍的主要成分是蛋白質(zhì)，為了防止溶出時(shí)，地龍里的蛋白溶出損害HPLC的色譜柱，對(duì)溶出實(shí)驗(yàn)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)所取的樣品要進(jìn)行去蛋白處理，參考相關(guān)文獻(xiàn)，能與水混溶的有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈、丙酮等，當(dāng)它們過(guò)量存在時(shí)，可使蛋白質(zhì)沉淀。通常用1～3倍體積的有機(jī)溶劑時(shí)可使90％以上的蛋白質(zhì)沉淀。本實(shí)驗(yàn)將所取溶出樣品加一倍乙腈去蛋白，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在供試品濃度范圍內(nèi)，一倍乙腈影響士的寧、馬錢子堿的峰形（如圖7），改用甲醇去蛋白。在相同色

69、譜條件下士的寧、馬錢子堿混合標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖如圖6。</p><p>　　對(duì)比圖6、7、8,本實(shí)驗(yàn)選擇甲醇對(duì)溶出實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行去蛋白處理。</p><p>　　圖6：馬、士標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC的色譜圖</p><p>　　圖7： 馬、士標(biāo)準(zhǔn)品加乙腈稀釋一倍的HPLC色譜圖</p><p>　　圖8： 馬、士:標(biāo)準(zhǔn)品加甲醇稀釋一倍的HPLC色譜圖<

70、;/p><p>　　2.1.5 地龍粉陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)</p><p>　　取制備龍馬微丸的原料藥材地龍粉約0.625g做溶出實(shí)驗(yàn)，溶出條件：漿法，蒸餾水做溶出介質(zhì)，37℃水浴，轉(zhuǎn)速100r/min。分別在5, 10, 15, 20, 30, 60, 90, 120min取10次溶出液2ml于5mlEP管中，往溶出杯里補(bǔ)2ml溶出介質(zhì)，EP管中加2ml甲醇，渦旋混合儀上混勻冰箱中冷置2h左右，用注

71、射器、過(guò)濾頭按濃度由低到高過(guò)濾于HPLC進(jìn)樣瓶中。檢測(cè)結(jié)果入下圖9，可以看出在254nm檢測(cè)波長(zhǎng)處地龍對(duì)馬錢子堿的檢測(cè)不會(huì)造成干擾。</p><p>　　圖9：地龍粉溶出實(shí)驗(yàn)1h取樣制備供試品254nm波長(zhǎng)處色譜圖</p><p>　　2.1.6精密度及溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)</p><p>　　課題組的往屆同學(xué)對(duì)本實(shí)驗(yàn)所用的色譜柱、流動(dòng)相體系，關(guān)于士的寧、馬錢子堿的檢測(cè)分

72、析做過(guò)系統(tǒng)方法學(xué)驗(yàn)證，這里不再做重復(fù)試驗(yàn)。根據(jù)相關(guān)方法學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，精密度試驗(yàn)為馬錢子的提取液制備的供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣六次，記錄馬錢子堿峰面積，計(jì)算峰面積RSD=0.444%，說(shuō)明儀器精密度良好。</p><p>　　溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)為取馬錢子提取液制備的供試品溶液，分別在0，2，4，8，12，24 h進(jìn)樣測(cè)定，記錄馬錢子堿峰面積，計(jì)算峰面積RSD=0.254%，表明供試品溶液在室溫條件下放置24 h穩(wěn)定性良好。&

73、lt;/p><p>　　2.2龍馬微丸的含量測(cè)定</p><p><b>　　2.2.1提取方法</b></p><p>　　取龍馬微丸用干燥研缽研成粉末精密稱取2.5280g，加入100ml溶液（蒸餾水：甲醇：甲酸=50:50:1），超聲30min，抽濾取濾液；用移液管移取5ml濾液于50ml容量瓶中（蒸餾水：甲醇：甲酸=50:50:1）溶液定容

74、；注射器取稀釋后的濾液加過(guò)濾頭過(guò)濾于HPLC進(jìn)樣瓶中。HPLC測(cè)其濃度。</p><p><b>　　2.2.2含量計(jì)算</b></p><p>　　接收提取濾液的具塞錐形瓶中M=67.4788g,倒入濾液錐形瓶總重M=148.3126g,取5ml后錐形瓶重M=143.5583g，設(shè)稀釋后的供試品HPLC所測(cè)的濃度為x g/ml,則龍馬微丸中馬錢子堿的含量y為<

75、/p><p><b>　　y=**100%</b></p><p>　　HPLC測(cè)得x=6.8039µg/ml，將數(shù)值代入公式得龍馬微丸中馬錢子堿的含量y=0.2288%。</p><p>　　2.3龍馬微丸溶出實(shí)驗(yàn)</p><p>　　取龍馬微丸（馬錢子：地龍：微晶纖維素=1:1:2）約2.5g，用溶出儀采用轉(zhuǎn)籃

76、法，900ml蒸餾水為溶出介質(zhì)，水浴37℃，轉(zhuǎn)速100r/min，做A、B兩組平行試驗(yàn)，兩組龍馬微丸重量為：A組2.5021g、B組2.5003g。分別在5,10,15,20,30,60,90,120,150,180min取10次溶出液2ml于5mlEP管中，往溶出杯里補(bǔ)2ml溶出介質(zhì)，EP管中加2ml甲醇，渦旋混合儀上混勻冰箱中冷置2h左右，用注射器、過(guò)濾頭按濃度由低到高過(guò)濾于HPLC進(jìn)樣瓶中。檢測(cè)結(jié)果入下表3、圖10：</p&

77、gt;<p>　　表3：不同取樣時(shí)間馬錢子堿累計(jì)溶出度</p><p>　　圖10：不同取樣時(shí)間馬錢子堿累計(jì)溶出度曲線</p><p>　　從圖9可以看出，本課題組自制龍馬微丸中馬錢子堿釋放迅速，在30min內(nèi)科釋放約75%，且在90min內(nèi)釋放完畢。故后續(xù)溶出實(shí)驗(yàn)取樣時(shí)間到2h為止。</p><p>　　2.4中藥原材料對(duì)照實(shí)驗(yàn)</p>

78、<p>　　取龍馬微丸（馬錢子：地龍：微晶纖維素=1:1:2）約2.5g，用溶出儀采用漿法，900ml蒸餾水為溶出介質(zhì)，水浴37℃，轉(zhuǎn)速100r/min，用制備龍馬微丸的原藥材制馬錢子粉，制馬錢子粉并地龍粉1:1混合物做對(duì)照實(shí)驗(yàn)，考察龍馬微丸原藥材制成微丸后的釋放規(guī)律變化，每組做平行實(shí)驗(yàn)計(jì)算平均值，分別在5、10、15、20、30、60、90、120min取8次溶出液加一倍甲醇制備供試品溶液。其結(jié)果如表4，圖11。</

79、p><p>　　表4： 龍馬微丸與原料粉末溶出度</p><p>　　圖2.11 龍馬微丸與原料粉末溶出度曲線</p><p>　　序列1：龍馬微丸；序列2：制馬錢子粉；序列3：制馬錢子與地龍1:1混合粉</p><p>　　從圖10可以看出，同條件下的溶出性，制馬錢子粉溶出非常迅速，5min即可溶出98%，龍馬微丸有1.5h的溶出過(guò)程，且釋放完

80、畢的累計(jì)溶出度低于制馬錢子粉。并且地龍粉對(duì)制馬錢子粉中馬錢子堿的溶出無(wú)明顯的影響。</p><p>　　2.5不同溶出介質(zhì)的影響</p><p>　　本次實(shí)驗(yàn)各組取龍馬微丸（馬錢子：地龍：微晶纖維素=1:1:2）約2.5g，用溶出儀采用轉(zhuǎn)籃法，分別采用三種不同PH的溶出介質(zhì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，蒸餾水、PH1.2（7.65ml濃鹽酸加蒸餾水配成1000ml）、PH4.8（2.99g醋酸鈉加水溶解+14

81、ml醋酸2mol/ml溶液加水配成1000ml），900ml溶出介質(zhì)，水浴37℃，轉(zhuǎn)速100r/min，分別在5,10,15,20,30,60,90,120min取8次溶出液加一倍甲醇制備供試品溶液。每組做平行試驗(yàn)取平均值，其結(jié)果如表5，圖12.</p><p>　　表5：不同PH溶出介質(zhì)馬錢子堿累計(jì)溶出度</p><p>　　圖12：不同PH溶出介質(zhì)馬錢子堿累計(jì)溶出度曲線</p&g

82、t;<p>　　序列1：蒸餾水；序列2：PH1.2；序列3：PH4.8</p><p>　　從圖2.12可以看出酸性條件有利于龍馬微丸的釋放，PH1.2時(shí)龍馬微丸中馬錢子堿釋放的速度最快，可在30min內(nèi)基本釋放完畢，PH1.2是胃酸的PH,說(shuō)明未經(jīng)包衣的龍馬微丸可在胃環(huán)境中充分溶出。</p><p><b>　　三、結(jié)論</b></p>

83、<p>　　3.1關(guān)于分析方法的結(jié)論</p><p>　　本課題組所制備的龍馬微丸原料為中藥原材料粉末，輔料為微晶纖維素。溶出實(shí)驗(yàn)可采用轉(zhuǎn)籃法或漿法，注射器取溶出液，并補(bǔ)足溶出介質(zhì)，用甲醇對(duì)樣品做去蛋白處理制備供試品溶液。HPLC色譜條件：色譜柱Intersustain C柱（4.6 mm×250 mm,5μm），流動(dòng)相體系甲醇-水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75），馬錢子堿保留時(shí)間

84、為12.8min,且其出峰無(wú)干擾，選為指標(biāo)物質(zhì)做定量分析。馬錢子堿累計(jì)溶出度Q（%）的計(jì)算公式：</p><p>　　Q（%）=x*2*900*10/(M*0.2288%)*100</p><p>　　其中，x(µg/ml)為HPLC測(cè)得的供試品液濃度，M（g）為溶出實(shí)驗(yàn)所取龍馬微丸質(zhì)量。</p><p>　　3.2自制龍馬微丸溶出規(guī)律及特性的結(jié)論<

85、/p><p>　　本課題組自制龍馬微丸中馬錢子堿釋放較快，在30min內(nèi)可以釋放約75%，且在90min內(nèi)釋放完畢。對(duì)比制備龍馬微丸的原料---制馬錢子粉，同條件下的溶出性，制馬錢子粉溶出非常迅速，在5min即可釋放98%，龍馬微丸有1.5h的溶出過(guò)程。不同溶出介質(zhì)的龍馬微丸溶出實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，酸性條件有利于龍馬微丸的釋放，PH1.2時(shí)龍馬微丸中馬錢子堿釋放的速度最快，可在30min內(nèi)基本釋放完畢。</p>

86、<p><b>　　討論</b></p><p>　　4.1關(guān)于分析方法的討論</p><p>　　在色譜柱Intersustain C柱（4.6 mm×250 mm,5μm），流動(dòng)相體系甲醇-水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75）色譜條件下，生馬錢子提取液檢測(cè)，254nm波長(zhǎng)處綠原酸對(duì)士的寧的干擾可以忽略，本實(shí)驗(yàn)龍馬微丸溶出液制備的供

87、試品中士的寧的峰前有個(gè)小峰干擾（參考2.2.2），推測(cè)士的寧是受綠原酸的干擾。原因可能是龍馬微丸處方中馬錢子的炮制引起的，本課題組馬錢子的炮制方法是：揀選飽滿完好的生馬錢子，按5:1的比例分別稱取馬錢子和綠豆放入燒杯中，加入適量自來(lái)水，在電爐上放一石棉網(wǎng)使加熱均勻,接通電路，加熱煮沸至大部分綠豆開(kāi)裂。取出馬錢子，去皮切條，置于遠(yuǎn)紅外恒溫干燥箱中于80℃下干燥6h。另取麻油適量，置鍋內(nèi)燒熱，加入經(jīng)干燥后的馬錢子條，炸至棕褐色，剔出焦黑者，

88、剩余放涼，用濾紙將馬錢子表面麻油擦拭干凈。因?yàn)榕谥品椒ú煌斐墒康膶幧V峰被干擾，故此選擇馬錢子堿作為指標(biāo)物質(zhì)做定量分析。</p><p>　　4.2自制龍馬微丸溶出規(guī)律及特性的討論</p><p>　　龍馬微丸溶出迅速，從各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，龍馬微丸釋放完畢時(shí)的累計(jì)溶出度均>100%，可能是HPLC的測(cè)量誤差，也有可能是龍馬微丸含量測(cè)定沒(méi)有將龍馬微丸中馬錢子堿最大量提取出來(lái)。</

89、p><p>　　從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看制馬錢子粉及地龍粉制備成龍馬微丸之后，藥物釋放特性有所改變，對(duì)龍馬微丸進(jìn)行包衣或可進(jìn)一步延長(zhǎng)藥物釋放達(dá)到緩控釋作用，有待進(jìn)一步研究。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn)</b></p><p>　　李明輝，李鳳琴，王廣林．三波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定壯筋骨膠囊中的士的寧的含量[J]．時(shí)珍國(guó)藥研究，1995，6(3)；17.&l

90、t;/p><p>　　羅晉萍，張中蘇，連云嵐，等．薄層掃描法測(cè)定金龍祛痹丸中士的寧的含量口]．藥物分析雜志，1999，19(3)：179—180．</p><p>　　王琳，薛玉梅．薄層掃描法測(cè)定暈復(fù)靜片中士的寧含量[J]．基層中藥雜志，1999，13(2)：9．</p><p>　　陳勇，黃敏，陸中海，等．十一藥酒的質(zhì)量控制研究[J]．廣西中醫(yī)藥，2002，24，25

91、(2)：57—59.</p><p>　　姬生國(guó)，王東，李娥，等．三鼎丹膠囊中士的寧的含量測(cè)定[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17(1)j 64—65．</p><p>　　汪電雷，朱繼民.馬錢子及其制劑中化學(xué)成分的測(cè)定方法綜述[J].基層中藥雜志，2001,15（2）43-46.</p><p>　　王冬月，陳軍，蔡寶昌.馬錢子堿血藥濃度測(cè)定方法的優(yōu)化與應(yīng)用[J]

92、.中國(guó)中藥雜志，2013，7:1075～1078.</p><p>　　楊安東，馬艷，吳詩(shī)慧，等．骨痛寧搽劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]．中成藥，2005，27(12)：1400—140.</p><p>　　張凌云，張翔，馮慧憑．RP—HPLC法測(cè)定伸筋丹膠囊中士的寧和馬錢子堿的含量[J]．江蘇藥學(xué)與臨床研究，2004，lZ(3)：32—34．</p><p>　　姜舜堯

93、，金甌，黃宗玉，等．毛細(xì)管區(qū)帶電泳測(cè)定伸筋彤膠囊中士的寧和馬錢子堿的含量口]．中草藥，1999，30(5)：341—343.</p><p>　　朱龍， 封滿良，萬(wàn)秀琴. HPLC分離化學(xué)發(fā)光檢測(cè)藥物中的馬錢子堿、士的寧和麻黃類生物堿[J]. 高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)，2009; 17( 11) : 1693.</p><p>　　國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典2010版二部[M].2012

94、年10月1日。正文第21頁(yè)。</p><p>　　李彥超，蔡寶昌，李偉東，狄留慶.馬錢子總生物堿的測(cè)定及其提取條件的正交設(shè)計(jì)優(yōu)選[J].中藥新藥與臨床藥理,2004(1)15.</p><p>　　湯淮波，張令君,李湘玲,孫成風(fēng)，馬丕江.不同溶劑提取馬錢子中士的寧與馬錢子堿的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2009，15(11)122~125.</p><p>　　付麗

95、佳，王玉華。當(dāng)歸補(bǔ)血丸中阿魏酸溶出度測(cè)定[J]。中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2013,15(3)188~191.</p><p>　　姚彤煒編著。體內(nèi)藥物分析[M]。浙江大學(xué)出版社。2001年01月第1版,第49頁(yè)</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　本研究及學(xué)位論文是在我的導(dǎo)師吳萍老師親切關(guān)懷和悉心指導(dǎo)下完成的。她嚴(yán)肅的科學(xué)

96、態(tài)度，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)精神，精益求精的工作作風(fēng)，深深地感染和激勵(lì)著我。在本論文的完成過(guò)程中，吳萍老師傾注了大量的心血，從選題到確定方案，從一個(gè)又一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟的實(shí)施，到一遍又一遍地指出論文中的具體問(wèn)題，嚴(yán)格把關(guān)，循循善誘，在此我表示衷心感謝。同時(shí)，要特別感謝吳老師在生活中給我以指導(dǎo)和幫助，在此謹(jǐn)向吳老師再次致以誠(chéng)摯的謝意和崇高的敬意。</p><p>　　同時(shí)我還要感謝在我學(xué)習(xí)期間給我極大關(guān)心和支持的各位老師們，是你四年