3GT基因轉化馬鈴薯的研究.pdf

1、在世界糧食生產中，馬鈴薯僅次于小麥、玉米和水稻，位居第四。馬鈴薯塊莖是繁殖器官，也是產品器官。塊莖的皮色或肉色有白色、黃色、紅色或紫色等。研究表明，馬鈴薯塊莖的顏色主要來源于花色苷的積累，花色苷具有一定的保健功能，如抗氧化、抗突變及抗腫瘤等功用。類黃酮3-O-葡萄糖基轉移酶（3GT，UDP-glucose：flavonoid-3-O-Glucosyltr-ansferase）是花色苷合成通路中的下游基因，它催化花色素3-O-糖基化形成了

2、第一個穩(wěn)定的花色苷分子。本研究旨在通過向馬鈴薯中導入3GT基因增加塊莖中花色苷的積累。研究結果如下：
　　 以馬鈴薯品種Désirée的莖段為外植體，外植體暗中預培養(yǎng)2d，農桿菌侵染5-8 min，暗中共培養(yǎng)2d，轉入愈傷誘導和芽分化的培養(yǎng)基（MS+0.5 mg/LTDZ+0.3 mg/L GA3+50 mg/L Kan+200 mg/L Cef）。光照培養(yǎng)3～4周即有不定芽的生成，對產生的不定芽通過Kan（100 mg/L）生

3、根篩選，共得到了18個Kan抗性株系；對所獲得的18個kan抗性植株進行PCR檢測，有7株表現(xiàn)為陽性.Southern雜交檢測，有6株出現(xiàn)雜交信號，表明3GT基因已經整合到再生植株基因組中。
　　 用RT-PCR分析了轉基因馬鈴薯3GT基因的空間表達，在對照植株中，3GT基因僅在塊莖和匍匐莖中有少量表達，而在轉基因植株的塊莖和匍匐莖中該基因表達量明顯增高，莖段中亦有少量表達，葉片中不表達。轉基因植株之間3GT表達量也存在很大差異