豬圓環(huán)病毒2型感染豬肺泡巨噬細胞的蛋白質組學研究.pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)感染主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥，還可引發(fā)肺炎，同時對豬的免疫系統(tǒng)產生影響，能誘導仔豬的免疫抑制。而豬肺泡巨噬細胞(porcine alveolar macrophage,PAM)不僅是豬圓環(huán)病毒2型的靶細胞，而且是一種重要的免疫細胞，具有抗原遞呈、產生細胞因子、吞噬外來病原微生物的功能。因此，研究PCV2與豬肺泡巨噬細胞的互作以及PCV2感染PAM后的蛋白

2、質組水平的變化，將有助于闡明PCV2的致病機理。
　　 本研究以豬肺泡巨噬細胞3D4/21細胞系為模型，通過對感染PCV2WH株3D4/21細胞的比較蛋白質組學研究，試圖從細胞和蛋白質水平探討豬圓環(huán)病毒2型的致病機理。
　　 應用雙向凝膠電泳結合質譜鑒定的方法，對PCV2感染的PAM細胞差異蛋白進行分析。數據分析顯示，在PCV2感染PAM后的不同時間點，共有58個差異表達蛋白被發(fā)現(xiàn)，主要的差異表達蛋白出現(xiàn)在PAM感染后2

3、4-48h。經MALDI-TOF/TOF質譜分析，共成功的鑒定出32個差異表達蛋白，包括14個上調表達蛋白和18個下調表達蛋白。其中，PCV2感染PAM后24h上調蛋白有：醛脫氫酶9A1、前mRNA加工因子19、微絲相關蛋白，下調蛋白有：多聚腺苷酸結合蛋白、磷脂結合蛋白、含有EF-H結構域的蛋白D2、蛋白酶體激活復合物亞型1、蛋白酶體β亞基、熱休克蛋白β-1；PCV2感染PAM后48h上調蛋白有：t-復合多肽1、分子伴侶Erp和Tapa

4、sin二聚體、谷氨酰胺酶、α-烯醇化酶、線粒體鳥氨酸氨基轉移酶、TarDNA結合蛋白、中間絲相關蛋白、酸性核蛋白體磷蛋白P0、微管蛋白、真核細胞起始因子5A、CLIC蛋白4，下調蛋白有：微絲相關蛋白、增殖細胞核抗原、中間絲相關蛋白、前mRNA剪接因子、天冬氨酸氨基轉移酶、精氨酸酶、磷脂結合蛋白；PCV2感染PAM后96h下調蛋白有：微絲相關蛋白tropomyosin-3、14-3-3蛋白。這些差異蛋白主要涉及細胞骨架蛋白，生物大分子合成