2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩80頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、棉花(Gossypium hirsutum L.)是我國重要的經(jīng)濟作物之一,在國民經(jīng)濟中占有重要地位。棉花具有強大的雜種優(yōu)勢,利用棉花細胞質(zhì)雄性不育系,實現(xiàn)“三系”配套長期以來是棉花育種家追求的目標。揭示植物細胞質(zhì)雄性不育(CMS)機理,為人工創(chuàng)造CMS種質(zhì)資源及有效調(diào)控CMS的表達提供理論依據(jù),是國內(nèi)外關于植物CMS的重要研究方向。
  本研究以劉冬梅等基于轉(zhuǎn)紅麻HcPDIL5-2a創(chuàng)造的海島棉細胞質(zhì)雄性不育系H276A為材料,

2、以其非轉(zhuǎn)基因保持系H276B(H276A的野生型)為對照,利用多態(tài)性豐富、穩(wěn)定性好、靈敏度高的AFLP分子標記技術,選擇256對選擇性擴增引物對其基因組DNA進行多態(tài)性分析,得出如下主要研究結(jié)果:
  1、AFLP標記技術體系優(yōu)化
  首先,本試驗建立了棉花幼葉高純度、高質(zhì)量的基因組DNA提取方法,在傳統(tǒng)CTAB法的基礎上結(jié)合純化柱式提取方法,所提取的DNA質(zhì)量可以滿足后續(xù)AFLP技術要求,完全適于其分析;其次,從模板用量、

3、酶切時間、連接產(chǎn)物及預擴增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)等方面進行優(yōu)化,建立了最適于本試驗研究材料的AFLP標記技術體系和反應條件;最后,對變性聚丙烯酰胺凝膠的銀染做了優(yōu)化,使顯影效果更佳。
  2、H276A與H276B的AFLP分析
  利用AFLP標記技術,從DNA水平上對H276A、H276B進行分析,在256對選擇性擴增引物中,有17對引物能穩(wěn)定擴增出差異條帶,共獲得24條有無差異條帶,其中H276A有13條,多態(tài)性比例占2.63%

4、; H276B有11條,多態(tài)性比例占2.23%。對差異片段進行回收,最終成功回收到19條片段,大小主要集中在100-700bp之間。
  3、差異片段克隆測序
  純化回收后的目的片段經(jīng)連接轉(zhuǎn)化、菌液PCR檢測,最終成功檢測到13個大小與回收片段相同的差異片段,測序結(jié)果經(jīng)NCBI Blast比對分析,共得到6個陸地棉細胞質(zhì)基因同源序列。分別是2條葉綠體同源序列(均為ndhH基因的編碼序列),4條線粒體同源序列(其中兩條相同c

5、cmC基因上游非編碼區(qū)序列,一條nad6與sdh3編碼區(qū)基因之間的一段非編碼區(qū)序列,一條rps3基因的編碼序列)。通過對兩個材料的差異片段進行再克隆測序比對,共發(fā)現(xiàn)6個堿基替換,5個堿基缺失的突變。
  4、分子標簽的開發(fā)
  基于海島棉H276A、H276B線粒體基因ccmC上游保守區(qū)91bp處存在的一個堿基替換的差異,開發(fā)了兩個能特異區(qū)別海島棉不育系細胞質(zhì)的PCR分子標簽。通過對5對與H276同質(zhì)異核的海島棉不育系與保持

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論