fad3b乳腺特異表達盒轉基因小鼠的研制.pdf

1、長鏈n-3多不飽和脂肪酸(n-3 PUFAs)對人類的健康發(fā)揮著重要作用，而由于哺乳動物體內(nèi)沒有產(chǎn)生n-3 PUFAs的脂肪酸去飽和酶基因，所以哺乳動物均不能自身產(chǎn)生n-3 PUFAs。目前，常用于轉基因動物的脂肪酸去飽和酶基因是fat-1，fat-1轉基因小鼠和家畜的研究已經(jīng)有不少報道。在本實驗中，使用了來源于亞麻的脂肪酸去飽和酶基因fad3b，即將fad3b基因連入乳腺特異表達載體pBC-as1中，并通過M.MunⅠ和ApaⅠ進行雙

2、酶切，得到了不含標記基因、抗性基因的fad3b乳腺特異基因表達盒pBC-as1-fad3b，其長度為12188bp，通過原核注射的方法制備轉基因小鼠，并且繁殖到F3代。經(jīng)鑒定，fad3b在Founder、F1、F2、F3代轉基因小鼠的基因組中均有整合、表達。該研究證明，基因表達盒可以在哺乳動物體內(nèi)整合、表達并可以穩(wěn)定遺傳給下一代。同時，選取四個與脂肪酸合成和代謝相關的基因，分別為:脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，F(xiàn)