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文檔簡介
1、該研究克隆得到了鱖魚(Siniperca chuatsi)和草魚(Ctenopharyngodon idellus)Mx蛋白全長cDNA基因,并構(gòu)建了鱖魚Mx蛋白原核表達工程菌,用于研究Mx蛋白的體外誘導(dǎo)表達,同時,為了探討機體內(nèi)Mx蛋白的誘導(dǎo)表達機制,該研究對病毒誘導(dǎo)草魚Mx蛋白的體內(nèi)組織表達情況進行了初步研究.1、Mx蛋白全長cDNA的克隆及序列分析該研究以感染了鱖傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)的鱖魚、感染了草魚呼腸孤病毒(GCR
2、V)的草魚為材料,提取肝臟總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)擴增出Mx蛋白基因的核心片段序列(草魚Mx蛋白核心片段在該研究前已由該實驗室獲得),再應(yīng)用3'和5'快速擴增cDNA末端(RACE)方法PCR擴增Mx蛋白cDNA末端,最終獲得鱖魚Mx蛋白全長cDNA序列.2、鱖魚Mx蛋白原核表達工程菌的構(gòu)建應(yīng)用PCR方法獲得鱖魚Mx蛋白成熟肽cDNA,將該cDNA片段用PCR方法改造后使其能定向插入融合表達質(zhì)粒pGEX-4T
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