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1、目的:
本研究采用高脂飼料復(fù)制高脂血癥小鼠模型,運(yùn)用健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)模型小鼠進(jìn)行干預(yù),觀察該針法對(duì)模型小鼠總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的影響,探討其對(duì)高脂血癥小鼠血脂的調(diào)節(jié)作用機(jī)理;觀察本針法對(duì)丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影響,探討其抗脂質(zhì)過氧化損傷的作用機(jī)制;觀察其對(duì)內(nèi)皮素(ET)、一氧化氮(NO)的影響,探討其對(duì)血管內(nèi)皮保護(hù)作用和對(duì)血管舒縮
2、狀態(tài)及血液運(yùn)行等方面的作用機(jī)制。
方法:
第一部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠脂代謝的影響
選用健康雄性昆明小鼠60只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為4組:(1)正常組20只;(2)模型組20只;(3)針刺組10只:(4)辛伐他汀組10只。除正常組喂飼普通飼料外,其余各組均喂飼高脂飼料,第15天取正常組和模型組小鼠各10只,斷頭取血測(cè)血清TG、 TC、HDL-C及LDL-C,結(jié)果模型組TG、TC、
3、LDL-C明顯高于正常組,HDL-C明顯低于正常組,表明造模成功。造模成功后針刺組和辛伐他汀組開始治療,針刺組針刺雙側(cè)豐隆、曲池、三陰交穴,并在雙曲池、雙豐隆穴加用韓式電針儀,采用疏密波,頻率2Hz,強(qiáng)度1mA(以小鼠肢體微微顫動(dòng)、能耐受不掙扎為度),每天1次,每次10分鐘,連續(xù)治療10天。辛伐他汀組灌胃辛伐他汀6.6mg/Kg/天,每次用藥體積按0.2ml/10g計(jì)算,每天1次,連續(xù)灌胃10天。除辛伐他汀組外其余各組每天灌胃同體積蒸餾
4、水,除針刺組外其余各組同樣抓取固定。各組小鼠于末次針刺、給藥禁食不禁水12小時(shí)后斷頭取血,低溫離心,分離血清,密封,-20℃冷存待檢。生化法檢測(cè)血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量。
第二部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量、SOD活力的影響
選用健康雄性昆明小鼠40只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為4組:(1)正常組,(2)模型組,(3)針刺組,(4)辛伐他汀組,每組各10只。造模方法同實(shí)驗(yàn)
5、一,造模成功后針刺組和辛伐他汀組開始治療,方法同實(shí)驗(yàn)一。連續(xù)針刺、灌胃10天,各組小鼠于末次針刺、給藥禁食不禁水12小時(shí)后斷頭取血,低溫離心,分離血清,密封,-20℃冷存待檢。血清MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色分析法,SOD活力測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法。
第三部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清ET、NO含量的影響
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組同實(shí)驗(yàn)二,造模、針刺及給藥方法同實(shí)驗(yàn)一。連續(xù)針刺、灌胃10天,各組小鼠于
6、末次針刺、給藥禁食不禁水12小時(shí)后斷頭取血,低溫離心,分離血清,密封,-20℃冷存待檢。ET測(cè)定采用放射免疫法,NO測(cè)定采用硝酸還原酶法。
結(jié)果:
第一部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠脂代謝的影響
1、造模第15天正常組和模型組小鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C含量的比較
模型組小鼠血清TC、TG、LDL-C含量(5.72±0.85、1.31±0.32、2.68±0.55
7、)mmol/L均高于正常組(3.08±0.74、0.70±0.21、1.83±0.36)mmol/L,差異均有顯著性意義(P<0.01),模型組小鼠血清HDL-C含量(0.60±0.26)mmol/L低于正常組(0.94±0.30)mmol/L,差異有顯著性意義(P<0.05);表明造模成功。
2、健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量的影響
模型組小鼠血清TC、TG、LD
8、L-C含量(5.83±1.07、1.25±0.35、2.59±0.59)mmol/L均高于正常組(3.26±0.71、0.74±0.18、1.83±0.42)mmol/L,差異均有顯著性意義(P<0.01),模型組HDL-C含量(0.61±0.27)mmol/L低于正常組(0.95±0.34)mmol/L,差異有顯著性意義(P<0.01);針刺組和辛伐他汀組TC、TG、LDL-C含量均低于模型組,HDL-C含量均高于模型組,差異均有顯著
9、性意義(P<0.05或P<0.01);針刺組TC、LDL-C含量(3.33±0.77、1.55±0.27)mmol/L均低于辛伐他汀組(4.36±0.82、2.08±0.28)mmol/L,差異均有顯著性意義(P<0.05或P<0.01),針刺組TG、HDL-C含量(0.81±0.10、0.92±0.19)mmol/L與辛伐他汀組(0.78±0.21、0.93±0.24)mmol/L比較差異均無顯著性意義(P>0.05)。
10、 第二部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量、SOD活力的影響
1、健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量的影響
模型組小鼠血清MDA含量(29.94±2.79)nmol/L高于正常組(23.33±3.44)nmol/L,差異有顯著性意義(P<0.01);針刺組和辛伐他汀組血清MDA含量均低于模型組,差異均有顯著性意義(P<0.01);針刺組血清MDA含量(21.58±3.54)nmol/L與
11、辛伐他汀組(23.57±2.61)nmol/L比較差異無顯著性意義(P>0.05)。
2、健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清SOD活力的影響
模型組小鼠血清SOD含量(222.66±25.48)u/ml低于正常組(266.00±15.05)u/ml,差異有顯著性意義(P<0.01);針刺組和辛伐他汀組血清SOD含量均高于模型組,差異均有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);針刺組血清SOD含量(264.5
12、7±14.46)u/ml高于辛伐他汀組(244.12±26.75)u/ml,差異有顯著性意義(P<0.05)。
第三部分健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清ET、NO含量的影響
1、健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清ET含量的影響
模型組小鼠血清ET含量(67.07±11.98)Pg/ml高于正常組(45.50±8.79)Pg/ml,差異有顯著性意義(P<0.01);針刺組和辛伐他汀組血清ET含量
13、均低于模型組,差異均有顯著性意義(P<0.01或P<0.05);針刺組血清ET含量差異有顯著性意義(P<0.05)。
2、健脾通腑泄?jié)後樂▽?duì)高脂血癥小鼠血清NO含量的影響
模型組(63.83±9.19)μmol/L小鼠血清NO的含量低于正常組(87.26±6.10)μmol/L,差異有顯著性意義(P<0.01);針刺組和辛伐他汀組血清NO的含量均高于模型組,差異均有顯著性意義(P<0.01);針刺組血清NO含
14、量(85.02±10.06)μmol/L高于辛伐他汀組(75.80±9.11)μmol/L,差異有顯著性意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1、健脾通腑泄?jié)後樂山档透咧Y小鼠血清TC、TG、LDL-C含量,升高HDL-C含量,具有較好的調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。
2、健脾通腑泄?jié)後樂山档透咧Y小鼠血清MDA含量,提高SOD活力,抑制機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng),增加抗氧化能力,通過改善自由基代謝,以減輕高脂
15、血癥引發(fā)的脂質(zhì)過氧化損傷。
3、健脾通腑泄?jié)後樂山档透咧Y小鼠血清ET含量,升高NO含量,通過調(diào)節(jié)血管平滑肌收縮與舒張,抑制血小板聚集和血栓形成,從而維持血管張力和血流暢通,減輕高脂血癥引發(fā)的血管內(nèi)皮損傷,以保護(hù)血管內(nèi)皮功能。
4、健脾通腑泄?jié)後樂ㄔ诮档透咧Y小鼠血清TC、LDL-C、ET和提高SOD活力、NO含量方面的作用明顯優(yōu)于辛伐他汀,表明該針法在改善血脂的同時(shí)又具有顯著的增強(qiáng)抗氧化能力和保護(hù)血管
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