加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠調(diào)脂作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：加味青麟丸由酒制大黃、黨參、制首烏組成，具有益氣化瘀降濁的功效，為導(dǎo)師楊繼軍教授多年臨床觀察篩選研制的效方，對(duì)高脂血癥具有較好的治療效果，為進(jìn)一步驗(yàn)證加味青麟丸的藥效并說明其作用機(jī)制，本研究采用高脂飼料復(fù)制高脂血癥動(dòng)物模型，同時(shí)施加藥物干預(yù)，旨在通過觀察對(duì)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的影響，探討其調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用；通過觀察對(duì)丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的

2、影響，探討其抗脂質(zhì)過氧化損傷的作用機(jī)制；通過觀察對(duì)內(nèi)皮素-1(ET-1)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列環(huán)素F1α(6-Keto-PGF1α)的影響，探討其對(duì)血管舒縮狀態(tài)和血液運(yùn)行等方面的作用機(jī)制。 方法： 第一部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠脂代謝的影響選用健康雄性昆明小鼠50只，隨機(jī)分為5組：(1)正常對(duì)照組(簡(jiǎn)稱正常組)；(2)模型對(duì)照組(簡(jiǎn)稱模型組)；(3)加味青麟丸低劑量組(簡(jiǎn)稱

3、低劑量組)；(4)加味青麟丸高劑量組(簡(jiǎn)稱高劑量組)；(5)辛伐他汀對(duì)照組(簡(jiǎn)稱辛伐他汀組)。除正常組喂飼普通飼料外，其余各組均喂飼高脂飼料。同時(shí)，給藥組每日分別灌胃加味青麟丸低劑量1.5g/Kg，高劑量3.0g/Kg，辛伐他汀6.6mg/Kg，正常組和模型組每日給予同體積蒸餾水。每次用藥體積均按0.2ml/10g計(jì)算，各組灌胃1次/天，連續(xù)灌胃4周。末次給藥禁食不禁水12h后各組小鼠摘除眼球取血，將血樣低溫離心，分離血清，密封，-20

4、℃冷存待檢。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量測(cè)定均采用生化法，測(cè)定步驟和計(jì)算公式均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。第二部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量、SOD活力的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、造模及給藥方法同前。連續(xù)灌胃4周，于末次給藥禁食不禁水12h后各組小鼠摘除眼球取血，將血樣低溫離心，分離血清，密封，-20℃冷存待檢。血清MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色分析法，SOD活力測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法，測(cè)定步驟和計(jì)算公式均嚴(yán)

5、格按照試劑盒說明書操作。 第三部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿ET-1、CGRP及TXB2、6-Keto-PGF1a含量的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、造模及給藥方法同前。連續(xù)灌胃4周，于末次給藥禁食不禁水12h后各組小鼠摘除眼球取血，將血樣分成兩份，分別裝入加有不同抗凝劑的試管中混勻，低溫離心，分離血漿，密封，-80℃冷存待檢。ET-1、CGRP、TXB2和6-Keto-PGF1a均采用放射免疫法，測(cè)定步驟和計(jì)算公式均嚴(yán)格按照試劑盒說明書

6、操作。 結(jié)果： 第一部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠脂代謝的影響加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量的影響高脂血癥模型組(5.06±0.90、1.98±0.41、2.31±0.39)小鼠血清TC、TG、LDL-C含量均明顯高于正常組(3.71±0.30、0.89±0.27、1.57±0.18)(P<0.01)，模型組(1.43±0.18)血清HDL-C含量明顯低于正常組(1.81±0.14)(

7、P<0.01)；藥物干預(yù)各組TC、TG、LDL-C含量均明顯低于模型組，HDL-C含量明顯高于模型組(P<0.05或P<0.01)；高劑量組(3.95±0.41、1.78±0.12、1.69±0.14)，低劑量組(3.93±0.30、1.79±0.13、1.67±0.15)和辛伐他汀組(4.02±0.33、1.82±0.14、1.66±0.10)之間血清TC、LDL-C和HDL-C的含量無顯著性差異(P>0.05)，而高劑量組(1.28

8、±0.19)和低劑量組(1.26±0.45)血清TG的含量均低于辛伐他汀組(1.61±0.16)(P<0.05)，高、低劑量組之間TG的含量無顯著性差異(P>0.05)。 第二部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量、SOD活力的影響1 加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血清MDA含量的影響高脂血癥模型組(20.94±3.49)小鼠血清MDA含量明顯高于正常組(11.94±1.44)(P<0.01)；藥物干預(yù)各組血清MDA含量均明顯低于

9、模型組(P<0.01)；其中高劑量組(13.77±1.41)和低劑量組(15.87±1.51)均低于辛伐他汀組(17.95±1.24)(P<0.05或P<0.01)，而高劑量組低于低劑量組(P<0.05)。 2.加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血清SOD活力的影響高脂血癥模型組(160.6±10.64)小鼠血清SOD活力明顯低于正常組(236.2±12.89)(P<0.01)；藥物干預(yù)各組血清SOD活力均明顯高于模型組(P<0.01)；

10、其中高劑量組(205.7±11.82)和低劑量組(193.0±11.55)均高于辛伐他汀組(181.9±11.40)(P<0.05或P<0.01)，而高劑量組高于低劑量組(P<0.05)。第三部分加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿ET-1、CGRP及TXB2、6-Keto-PGF1α含量的影響1 加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿ET-1含量的影響高脂血癥模型組(126.95±15.46)小鼠血漿ET-1的含量明顯高于正常組(67.78±7.04)

11、(P<0.01)；藥物干預(yù)各組血漿ET-1的含量均明顯低于模型組(P<0.01)；其中高劑量組(74.29±6.65)和低劑量組(85.41±9.93)均低于辛伐他汀組(100.43±9.44)(P<0.01)，而高劑量組低于低劑量組(P<0.05)。 2.加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿CGRP含量的影響高脂血癥模型組(54.83±7.18)小鼠血漿CGRP的含量明顯低于正常組(105.65±11.65)(P<0.01)；藥物干預(yù)

12、各組血漿CGRP的含量均明顯高于模型組(P<0.01)；其中高劑量組(89.63±8.18)和低劑量組(80.49±8.28)均高于辛伐他汀組(67.54±6.79)(P<0.01)，而高劑量組高于低劑量組(P<0.05)。 3.加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿TXB2含量的影響高脂血癥模型組(2704.24±370.59)小鼠血漿TXB2的含量明顯高于正常組(1514.64±342.93)(P<0.01)；藥物干預(yù)各組血漿TXB2

13、的含量均明顯低于模型組(P<0.05或P<0.01)；其中高劑量組(1883.46±332.30)和低劑量組(1893.38±237.39)均低于辛伐他汀組(2294.48±340.49)(P<0.05)，而高、低劑量組之間無顯著性差異(P>0.05)。 4 加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿6-Keto-PGF1α含量的影響高脂血癥模型組(924.37±153.28)小鼠血漿6-Keto-PGF1a的含量明顯低于正常組(1370.1

14、9±131.21)(P<0.01)；藥物干預(yù)各組血漿6-Keto-PGF1a均明顯高于模型組(P<0.05或P<0.01)；其中高劑量組(1236.70±144.09)和低劑量組(1245.92±157.26)均高于辛伐他汀組(1093.73±135.86)(P<0.05)，而高、低劑量組之間無顯著性差異(P>0.05)。 5 加味青麟丸對(duì)高脂血癥小鼠血漿TXB2/6-Keto-PGF1a的影響高脂血癥模型組(2.98±0.52

15、)小鼠血漿TXB2/6-Keto-PGF1a明顯高于正常組(1.10±0.23)(P<0.01)；用藥干預(yù)各組血漿TXB2/6-Keto-PGF1a均明顯低于模型組(P<0.01)；其中高劑量組(1.53±0.31)和低劑量組(1.47±0.24)血漿TXB2/6-Keto-PGF1a均低于辛伐他汀組(2.12±0.40)(P<0.01)，而高、低劑量組之間無顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.加味青麟丸可降低高脂

16、血癥模型小鼠血清TC、TG、LDL-C含量，升高HDL-C含量，具有較好的調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。 2.該方可降低高脂血癥模型小鼠血清MDA含量，提高SOD活力，抑制機(jī)體脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，增加抗氧化能力，通過改善自由基代謝，以減輕高脂血癥引發(fā)的氧化損傷。 3.該方可降低高脂血癥模型小鼠血漿ET-1、TXB2含量，升高CGRP、6-Keto-PGF1a含量，降低TXB2/6-Keto-PGF1a，通過調(diào)節(jié)血管平滑肌收縮與舒張，抑