骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞向角膜內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)并移植.pdf

1、目的: 探索將骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞（BEPCs）向角膜內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化并移植的可行性，以期解決角膜內(nèi)皮細(xì)胞來源缺乏的問題，為臨床上角膜內(nèi)皮失代償疾病的治療提供新的思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 1．從人骨髓中分離培養(yǎng)BEPCs并進(jìn)行鑒定。 2．通過與人CECs共培養(yǎng)，將人BEPCs向CECs誘導(dǎo)分化，并從形態(tài)、功能、抗原標(biāo)志進(jìn)行鑒定。 3．將誘導(dǎo)的人BEPCs接種到豬角膜脫細(xì)胞基質(zhì)（PCACM）上體外構(gòu)建組織

2、工程角膜后板層，并進(jìn)行檢測。 4．將體外構(gòu)建的組織工程角膜后板層移植到去除后彈力層-內(nèi)皮層的貓角膜內(nèi)面，觀察修復(fù)內(nèi)皮缺損的效果。 結(jié)果: 1． 人BEPCs成多邊形，能攝取AcLDL，表達(dá)CD133、CD34和Flk-1抗原標(biāo)志，并表達(dá)VIII型膠原。 2．通過誘導(dǎo)，人BEPCs形態(tài)上與CECs相似，并初步建立屏障功能和泵功能，表達(dá)神經(jīng)烯醇化酶；CECs分泌的細(xì)胞因子在BEPCs的分化中起著重要作用。

3、 3．將誘導(dǎo)的BEPCs接種到PCACM上能形成細(xì)胞單層，細(xì)胞與材料貼合良好，形成角膜后板層。 4．將誘導(dǎo)的BEPCs與PCACM構(gòu)建的植片植入貓角膜，1個(gè)月后角膜逐漸恢復(fù)透明。 結(jié)論: 1．BEPCs是代替CECs的理想的種子細(xì)胞。 2．CECs能誘導(dǎo)BEPCs建立屏障功能和泵功能，并發(fā)生表型轉(zhuǎn)化。 3．誘導(dǎo)的BECPs與PCACM復(fù)合可以體外構(gòu)建組織工程角膜后板層。 4．體外構(gòu)建組