毛冬青活性成分及其藥代動力學研究.pdf

1、毛冬青(MDQ)為冬青科冬青屬植物毛冬青(Ilex pubescens Hook.et Arn)的干燥根，臨床上廣泛用于治療心血管疾病和高膽固醇癥等，有較好的療效。毛冬青中含有多種活性成分，如已報道的毛冬青甲素，Pubescenoside A1和Pubescenoside A2等，均具有心血管方面的活性，但關于毛冬青提取物及其活性成分的藥物代謝及動力學的報道不多。
　　 一、毛冬青中活性成分的分離
　　 本研究采用硅膠柱

2、層析，葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）柱層析以及制備薄層等分離方法對毛冬青藥材中的主要活性成分橄欖苦苷和反式丁香苷進行分離純化，并采用核磁共振和質(zhì)譜對化合物進行結構鑒定，其中反式丁香苷首次從毛冬青中分離得到。
　　 二、橄欖苦苷的體內(nèi)代謝研究
　　 大鼠口服給予橄欖苦苷100 mg/kg后，收集給藥后大鼠尿液及糞便。通過液液萃取法處理樣品，運用LC-MS/MS方法檢測尿液和糞便中的代謝物。在糞便中發(fā)現(xiàn)橄欖苦苷及

3、其5個代謝產(chǎn)物，其中橄欖酸，橄欖酸的葡萄糖苷為主要的代謝產(chǎn)物。在尿液中發(fā)現(xiàn)橄欖苦苷及其4個代謝物，橄欖苦苷苷元以及橄欖酸的氧化產(chǎn)物為主要的代謝物，說明水解反應及水解后氧化反應是橄欖苦苷在體內(nèi)的主要的生物轉化途徑。橄欖苦苷的苷元及其甲基化脫氫產(chǎn)物，橄欖酸的葡萄糖苷以及橄欖酸的單氧化產(chǎn)物為大鼠排泄物中首次發(fā)現(xiàn)。
　　 三、毛冬青提取物大鼠給藥后橄欖苦苷的藥代動力學研究
　　 建立測定大鼠血漿中橄欖苦苷濃度的LC-MS/MS方

4、法，并成功應用于毛冬青乙酸乙酯提取物通過口服和靜脈給藥后，橄欖苦苷在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究。大鼠給予毛冬青乙酸乙酯提取物后，于不同時間點采集血液。樣品加甲醇沉淀蛋白后，直接采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法(LC-MS/MS)對血樣進行含量測定。然后，采用WinNonlin數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件分析其藥代動力學參數(shù)，結果顯示，大鼠靜脈給予乙酸乙酯提取物200 mg/kg后，主要藥動學參數(shù)為:t1/2=0.133 h，Cmax=5.44 ng/μl，AU

5、C0-t=1.84ng·h/μl。然而在大鼠口服給乙酸乙酯提取物1g/kg后，僅在給藥6小時時檢測到橄欖苦苷(Cmax=137 ng/ml)。
　　 四、橄欖苦苷在大鼠體內(nèi)的排泄研究
　　 建立了尿樣及糞樣中橄欖苦苷的定量分析方法，首次對大鼠靜脈和口服給藥后，尿樣及糞樣中橄欖苦苷的累積排泄量進行研究。大鼠靜脈給予乙酸乙酯提取物(200mg/kg)后36h，尿中的橄欖苦苷累積排泄量很低，為2.86士4.10μg，占給藥劑量

6、的0.072±0.102％，靜脈給藥后，原型藥可能被廣泛的代謝轉化，導致尿樣中檢測到的橄欖苦苷原型藥量很少。
　　 大鼠口服給予乙酸乙酯提取物(1g/kg)36 h后，尿中的橄欖苦苷累積排泄量很低，為0.70±0.48μg，占給藥劑量的0.003±0.002％。糞中的橄欖苦苷累積排泄量也很低，為2.20±1.31μg，占給藥劑量的0.011±0.007％。上述結果說明，口服給藥后，一方面橄欖苦苷在肝臟可能存在強烈的首過效應，另一