遠(yuǎn)志質(zhì)量控制及糖酯類成分的抗抑郁活性和藥代動力學(xué)研究.pdf

1、遠(yuǎn)志為常用中藥，臨床用于治療心腎不交引起的神志恍惚、失眠多夢、健忘驚悸等癥。本文綜合運用多種研究模式和分析技術(shù)，建立了遠(yuǎn)志的質(zhì)量控制方法，評價了遠(yuǎn)志總糖酯(Total acylated Oligosaccharides of Polygalae Radix，TAOPR)的抗抑郁活性并探索了部分活性成分的藥代動力學(xué)性質(zhì)。本研究主要內(nèi)容包括：
　?、挪捎萌铣苫蛑参锘瘜W(xué)方法，制備了9個遠(yuǎn)志糖酯類化合物(PolygalaeRadix a

2、cylated oligosaccharides，PRAOs)。以tenuifoliside B(TFSB)為目標(biāo)化合物，采用區(qū)域選擇性的方法對該化合物進(jìn)行了全合成，按照相同思路合成了西伯利亞糖A5(Sibiricose A5，SA5)、西伯利亞糖A6(Sibiricose A6，SA6)、tenuifolisideA(TFSA)、tenuifoliside C(TFSC)。采用串聯(lián)柱色譜提取(cylic columnchromatog

3、raphic extraction，CCCE)聯(lián)合反相快速液相色譜技術(shù)，從遠(yuǎn)志藥材中制備得到高純度的3'，6-二芥子?；崽酋ィ?'，6-Disinapoyl sucrose，DISS）。采用集成柱色譜提取-大孔樹脂純化方法，從遠(yuǎn)志藥材中提取得到富含遠(yuǎn)志寡糖多酯的提取物，以半制備高效液相色譜從該提取物中分離得到3個寡糖多酯類化合物，分別為teniufolioseⅠ(TFOI),tenuifoliose H(TFOH),tenuifoli

4、ose A(TFOA)。采用上述方法，制備得到了9個高純度的PRAOs。
　　⑵采用HPLC-UV法，建立了遠(yuǎn)志藥材中8個PRAOs的定量分析方法，并將該方法用于不同產(chǎn)地藥材的質(zhì)量評價。與現(xiàn)有質(zhì)量分析方法相比，該方法能更全面地反映遠(yuǎn)志藥材的質(zhì)量，特別是遠(yuǎn)志糖酯類成分的特征。
　?、墙⒘诉h(yuǎn)志藥材的高效液相色譜指紋圖譜，并采用化學(xué)計量學(xué)方法，從遠(yuǎn)志藥材的HPLC-UV指紋圖譜中提取8個PRAOs的含量信息，建立其含量預(yù)測PLS

5、R模型，校正集相關(guān)系數(shù)均大于0.95。經(jīng)驗證，所得預(yù)測模型的RSEP值均不大于5.1％，可用于遠(yuǎn)志藥材中這8個PRAOs的含量預(yù)測。該方法的提出，使得遠(yuǎn)志藥材指紋圖譜不僅可用于真?zhèn)伪鎰e、產(chǎn)地鑒別和炮制過程研究等定性分析，還可用于指標(biāo)成分的定量分析，大大豐富了遠(yuǎn)志指紋圖譜的內(nèi)涵，可為其它中藥的質(zhì)量控制提供參考。
　?、炔捎没瘜W(xué)計量學(xué)方法輔助HPLC-UV指紋圖譜，建立了遠(yuǎn)志藥材的指紋圖譜-體外DPPH清除活性之間的關(guān)系，所得SMLR

6、模型的驗證集的RSEP值為3.96％，模型可用于遠(yuǎn)志藥材抗氧化活性的預(yù)測。采用DPPH-HPLC/ESI-Q-TOF-MS/MS技術(shù)，從遠(yuǎn)志中篩選得到8個具有較強(qiáng)DPPH自由基清除活性的成分，DISS可能是其中活性最強(qiáng)的化合物。體外抗氧化研究表明，DISS具有較強(qiáng)的抗氧化活性，其DPPH、ABTS自由基清除活性和總還原能力略弱于維生素C。
　?、刹捎眯∈髲?qiáng)迫游泳、育亨賓毒性增強(qiáng)實驗，初步評價了遠(yuǎn)志總糖酯(Totalacylated

7、 Oligosaccharides of Polygalae Radix，TAOPR)的抗抑郁活性，考察了人參總皂苷(Total ginsenoside ginseng root，TGGR)對TAOPR抗抑郁活性的影響。結(jié)果表明，TAOPR能顯著增強(qiáng)小鼠育亨賓的毒性、減少小鼠強(qiáng)迫游泳不動時間，TGGR能顯著增強(qiáng)TAOPR的抗抑郁活性。選用慢性不可預(yù)知應(yīng)激(Chronicunpredictable mild stress，CUMS)致大鼠

8、抑郁模型，采用行為學(xué)評價和GC-MS代謝組學(xué)研究方法，評價了TAOPR的抗抑郁活性，并對其作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明，TAOPR可能通過修復(fù)失衡的糖酵解代謝通路，逆轉(zhuǎn)CUMS引起的病理損傷，從而表現(xiàn)出一定的抗抑郁活性。研究結(jié)果可為TAOPR的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
　?、什捎肏PLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技術(shù)，考察了TFSA，TFSB和DISS的大鼠尿液代謝產(chǎn)物。隨后，采用HPLC-UV法建立了大鼠血漿中SA6的