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文檔簡介
1、 本文介紹了借助磷酸化蛋白質體內外富集策略,結合蛋白質組學高通量技術,鑒定受LMP1調控的下游功能效應蛋白質分子(磷酸化蛋白質分子);然后采用傳統(tǒng)的信號轉導通路研究策略建立EB病毒瘤蛋白LMP1與下游功能效應蛋白質分子間的關系,初步構建EB病毒瘤蛋白LMP1介導的信號轉導通路網(wǎng)絡?!?擬采用磷酸酶抑制劑和磷酸基團金屬親和純化(phosphatemetalaffinitychromatography,PMAC)兩種策略來富集磷酸
2、化蛋白質。我們研究證實采用磷酸酶抑制劑抑制細胞內磷酸酶活性可以有效提高細胞內磷酸化蛋白質的總量,并且呈劑量和時間依賴性,從而確定了絲/蘇氨酸磷酸酶抑制劑和酪氨酸磷酸酶抑制劑的最佳工作濃度和最佳處理時間?! ≡谝呀?jīng)建立磷酸化蛋白質富集技術平臺的基礎上,確定了磷酸化蛋白質富集結合蛋白質組學技術鑒定LMP1調節(jié)的磷酸化蛋白質分子的可行性?! ”狙芯宽椖客ㄟ^將蛋白質組學高通量技術引入到信號轉導通路研究中,鑒定EB病毒瘤蛋白LMP1調節(jié)的磷酸
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