骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性肺氣腫治療的研究.pdf

1、目的：體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells，MSCs)，將培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)尾靜脈注入用豬胰彈性蛋白酶制作的大鼠肺氣腫模型體內(nèi)，4周后測(cè)動(dòng)脈血?dú)?，觀察肺組織病理學(xué)變化，以探討MSCs對(duì)肺氣腫的治療作用，為今后臨床治療肺氣腫探求一種新的方法。 方法：Wistar大鼠24只，體重250±10g，隨機(jī)分為4組，每組6只，分別為健康組(A組)、模型組(B組)、生理鹽水對(duì)照組(C組)和治療組(D組)。B、C和D

2、組均利用氣管內(nèi)一次性滴注豬胰彈性蛋白酶(PPE)的方法(劑量2u/g)制作大鼠肺氣腫動(dòng)物模型，A組用相同的方法以生理鹽水為對(duì)照。4周后肺氣腫動(dòng)物模型制成。利用密度梯度離心與貼壁法相結(jié)合的方法分離、培養(yǎng)大鼠MSCs，并進(jìn)行體外擴(kuò)增。傳到第三代時(shí)，MSCs的細(xì)胞活力最佳，用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)MSCs表面CD71的表達(dá)。用溴氮胞苷(BrdU)對(duì)MSCs進(jìn)行體外標(biāo)記，采用同種異體移植，通過(guò)尾靜脈注射于D組肺氣腫大鼠體內(nèi)，約2.0×106/只，

3、C組用相同的方法給予生理鹽水。 結(jié)果：4周后測(cè)動(dòng)脈血?dú)?，代表肺功能；取肺組織作病理切片，觀察肺泡變化，進(jìn)行肺泡計(jì)數(shù)，并計(jì)算單位面積平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積，觀察肺組織病理改變。結(jié)果顯示：A、B、C、D四組兩兩比較，動(dòng)脈血?dú)?PH值、PO2和PCO2)均無(wú)明顯差異(P＞0.05)；平均肺泡數(shù)和平均肺泡面積均有明顯差異：D組大鼠單位面積平均肺泡數(shù)組明顯高于B組(P＜0.001)和C組(P=0.02)，但低于A組(P＜0.001)；A