蛋白酶體抑制劑MG132促進順鉑誘導非小細胞肺癌凋亡機制的研究.pdf

1、背景：
　　當今社會迅速發(fā)展，而生活環(huán)境卻日益惡化，惡化的環(huán)境是惡性腫瘤發(fā)生的重要誘因之一。研究表明惡性腫瘤是目前全球發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一，而近些年肺癌的發(fā)病率已躍居惡性腫瘤的首位，因此如何有效地治療肺癌引起大家的重視。肺癌的治療已進入手術、化療、放療、生物治療、靶向治療等聯(lián)合治療的新階段，雖然手術切除腫瘤仍是目前最主要和最有效的治療方法。但是由于早期肺癌患者并無明顯的臨床癥狀，延誤了早起發(fā)現(xiàn)的時機?；颊叱霈F(xiàn)癥狀后再來醫(yī)院

2、就診，約有50％-60％的患者已處于肺癌晚期(Ⅲ/Ⅳ)，而此時已經(jīng)失去最佳的手術時機。因而對于晚期肺癌患者，化療、放療對其治療占有重要的地位。由于化療藥物被廣泛地使用在對肺癌的治療，化療藥物的毒副作用以及腫瘤對化療藥物的耐藥性已成為臨床工作者難以克服的障礙。癌癥的發(fā)生主要是由于細胞的DNA發(fā)生了基因水平的突變。因此腫瘤在化療后復發(fā)，基因水平的突變造成了對化療藥物的多重耐藥性。因此，尋找減小腫瘤對化療藥物的耐藥性，提高化療藥物作用，毒副作

3、用小的新的作用靶點已成為當今醫(yī)學界探討和研究的熱點。蛋白酶體是近些年研究的熱點，蛋白酶體廣泛存在真核細胞中，可選擇性降解細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，而蛋白酶體可以調(diào)控各種細胞過程，如蛋白質(zhì)的加工和更新、細胞周期、信號轉導、細胞分化和細胞凋亡等。蛋白酶體抑制劑可以通過阻斷蛋白酶體通路從而抑制蛋白質(zhì)的降解，誘導細胞凋亡。因此蛋白酶體抑制劑可以抑制腫瘤細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)的降解，調(diào)節(jié)細胞周期，抑制腫瘤細胞生長和增殖，促進腫瘤細胞凋亡。而蛋白酶體抑制劑與化療藥物

4、聯(lián)合作用于腫瘤細胞，蛋白酶體抑制劑能否提高化療藥物對腫瘤細胞的殺傷作用，提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，本方面的研究較少。因此本研究通過蛋白酶體抑制劑與順鉑聯(lián)合應用誘導肺癌A549發(fā)生凋亡，來分析蛋白酶體抑制劑對細胞凋亡的影響，為減小化療藥物的耐藥性，提高腫瘤對化療藥物的敏感性提供了實驗依據(jù)。
　　目的：
　　通過蛋白酶體抑制劑三肽基乙醛(MG132)聯(lián)合順鉑(DDP)來探討誘導肺癌A549細胞凋亡的影響，為進一步研究腫瘤對

5、化療藥物的敏感性，提高化療療效提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　采用細胞計數(shù)盒(CCK-8)法檢測不同分組對肺癌A549的抑制率;通過采用Hoechst33342染色觀察細胞的形態(tài)變化及熒光染色陽性細胞百分比;流式細胞術(FCW)檢測細胞凋亡率;采用Westernblot法檢測細胞中核轉錄因子NF-kB和凋亡相關蛋白caspase9的表達情況。
　　結果：
　　單用MG132組、單用DDP組細胞抑制率隨時間和濃度明

6、顯增加，細胞核裂解，染色質(zhì)凝集，細胞凋亡率增加。MG132和DDP聯(lián)合作用組細胞凋亡率較單用DDP組明顯增加，MG132和DDP聯(lián)合作用組較單用DDP組，核轉錄因子NF-kB表達明顯減少凋亡相關蛋白caspase9表達顯著增加。
　　結論：
　　蛋白酶體抑制劑MG132與DDP聯(lián)合作用促凋亡作用明顯提高，其部分作用機制可能是蛋白酶體抑制劑MG132抑制腫瘤細胞中NF-kB的釋放，提高了腫瘤細胞對DDP誘導凋亡的敏感性，迸一步