蛋白酶體抑制劑MG132對(duì)非小細(xì)胞肺癌生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文論文題目蛋白酶體抑制劑MG132對(duì)非小細(xì)胞肺癌生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機(jī)制的研究研究生姓名劉靜指導(dǎo)教師姓名曹建平（教授）專業(yè)名稱放射醫(yī)學(xué)研究方向腫瘤放射生物學(xué)論文提交日期2013年5月蛋白酶體抑制劑蛋白酶體抑制劑MG132對(duì)非小細(xì)胞肺癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機(jī)制對(duì)非小細(xì)胞肺癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機(jī)制中文摘要中文摘要I中文摘要目的探討蛋白酶體抑制劑MG132聯(lián)合X射線對(duì)人非小細(xì)胞肺癌A549和H1299細(xì)胞

2、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移侵襲、細(xì)胞凋亡和周期、放射敏感性的影響及機(jī)制如何，進(jìn)一步構(gòu)建人非小細(xì)胞肺癌的裸鼠移植瘤，在體內(nèi)驗(yàn)證MG132的致放射增敏作用。方法（一）體外實(shí)驗(yàn)：1、MTT法檢測(cè)不同MG132濃度不同預(yù)處理時(shí)間聯(lián)合X射線下肺癌A549和H1299細(xì)胞的增殖變化；2、劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室實(shí)驗(yàn)分別測(cè)定肺癌A549細(xì)胞和H1299細(xì)胞的遷移能力；3、Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肺癌A549和H1299細(xì)胞的侵襲能力；4、克隆形成法檢測(cè)

3、MG132對(duì)A549和H1299細(xì)胞的放射敏感性的影響；5、流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定肺癌A549和H1299細(xì)胞的周期分布和細(xì)胞凋亡的影響；6、Westernblot法測(cè)定細(xì)胞蛋白表達(dá)水平的改變。（二）體內(nèi)試驗(yàn)：建立25只裸鼠皮下人非小細(xì)胞肺癌移植瘤模型，將移植瘤模型裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、MG132組、照射組、照射MG132組。測(cè)量每組移植瘤模型裸鼠的體重和腫瘤體積并繪制體重變化曲線和腫瘤生長(zhǎng)曲線，同時(shí)計(jì)算各組的腫瘤生長(zhǎng)抑制率。結(jié)果（一）體外實(shí)驗(yàn)結(jié)

4、果：1.1、在無(wú)X射線照射下，MG132單獨(dú)作用于人非小細(xì)胞肺癌A549和H1299細(xì)胞后表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制作用，呈現(xiàn)劑量效應(yīng)和處理時(shí)間效應(yīng)關(guān)系，我們選擇細(xì)胞存活90%以上時(shí)的MG132濃度（0.1μM）作為MG132實(shí)驗(yàn)劑量（nontoxicdose，無(wú)毒性劑量）用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。1.2、在聯(lián)合4GyX射線照射下，隨著照前應(yīng)用MG132預(yù)處理上述兩種細(xì)胞的時(shí)間不斷增加，兩種細(xì)胞的存活率不斷下降（P0.01）。1.3、MG132

5、預(yù)處理上述兩種細(xì)胞6h后聯(lián)合X射線照射，隨著照射劑量的增加，兩種細(xì)胞的存活率不斷下降（P0.01）；2.1、MG132聯(lián)合X射線可顯著抑制人非小細(xì)胞肺癌A549和H1299細(xì)胞的遷移能力。2.2、MG132聯(lián)合X射線可顯著抑制人非小細(xì)胞肺癌A549和H1299細(xì)胞的侵襲能力（P0.05）；3.1、MG132預(yù)處理上述兩種細(xì)胞6h后聯(lián)合X射線照射，細(xì)胞的克隆存活率均隨照射劑量的增加而減少（P0.01）。―單擊多靶模型‖顯示，A549細(xì)胞單