蛋白酶體抑制劑MG-132在誘導K562細胞株凋亡中的作用.pdf

1、目的:研究蛋白酶體抑制劑MG-132對人慢性粒細胞白血病急性紅白血病變細胞株K562的干預作用，為白血病的治療提供可靠的理論依據(jù)。
　　 方法:分組實驗分為對照組和實驗組，對照組為等量培養(yǎng)基組（0μmol/L MG-132組），實驗組按照不同劑量的MG-132分2、4、8、16、32μmol/L五個劑量組，各組再以24、48、72、96 h四個時間點進行實驗。采用四甲基偶氮唑藍（MTT）比色法檢測不同劑量（0、2、4、8、16、

2、32μmol/L）的MG-132在不同時間（24、48、72、96 h四個時間點）對K562細胞株增殖的影響 ; 采用免疫細胞組織化學法檢測不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的MG-132在不同時間（24、48、72、96 h四個時間點）對K562細胞株中的核因子-KB(NF-KB)活性的影響。采用免疫細胞組織化學法檢測不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的MG-132在不同時間（24、48、72、96 h

3、四個時間點）對K562細胞株中的糖皮質激素受體（GR）表達的影響。采用流式細胞術(FCM)檢測不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的MG-132在不同時間（24、48、72、96 h四個時間點）對K562細胞株凋亡的影響。
　　 結果: MTT：不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的 MG-132干預24、48、72、96 h后，K562細胞株的抑制率表現(xiàn)為對時間和劑量的依賴性，實驗組明顯高于對照組，

4、以MG-132劑量為16μmol/L、干預72 h時，抑制率最高，為（63.33±1.52）％ 。免疫細胞組織化學法：不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的 MG-132干預24、48、72、96 h后，K562細胞株中的NF-KB的表達水平表現(xiàn)為對時間和劑量的依賴性，實驗組明顯低于對照組，以MG-132劑量為32μmol/L、干預96 h時，NF-KB表達水平最低，為50.59±1.91。免疫細胞組織化學法：不同劑量（0

5、、2、4、8、16、32μmol/L）的 MG-132干預24、48、72、96 h后，K562細胞株中的GR表達水平，實驗組明顯高于對照組，以MG-132劑量為16μmol/L、干預72 h時，GR的表達水平最高，為89.21±3.49。流式細胞術：不同劑量（0、2、4、8、16、32μmol/L）的 MG-132干預24、48、72、96 h后，K562細胞株的凋亡率表現(xiàn)為對時間和劑量的依賴性，實驗組明顯高于對照組，以MG-132劑

6、量為32μmol/L、干預48h時，凋亡率最高，為(21.37±2.02)％。
　　 結論:本實驗條件下（1）MG-132可以抑制K562細胞的生長。（2）MG-132可以下調K562細胞中NF-KB的表達。（3）MG-132可以上調K562細胞中GR的表達。（4）MG-132可以誘導K562細胞的凋亡。（5）MG-132抑制K562細胞的生長及誘導其凋亡的機制可能是通過下調NF-KB、上調GR的表達來實現(xiàn)的，并表現(xiàn)出對時間和劑