FNBP1在人正常肝細(xì)胞7702形態(tài)控制及生長(zhǎng)調(diào)控過程中的作用.pdf

1、目的:檢測(cè)FNBP1在7702細(xì)胞中的表達(dá)情況和亞細(xì)胞定位;通過觀測(cè)7702細(xì)胞內(nèi)源FNBP1表達(dá)沉默及恢復(fù)后的細(xì)胞效應(yīng)，揭示FNBP1在細(xì)胞形態(tài)控制和生長(zhǎng)調(diào)控過程中的作用。
　　方法:運(yùn)用RT-PCR、western blot在mRNA水平和蛋白水平驗(yàn)證FNBP1在7702細(xì)胞中的表達(dá);運(yùn)用細(xì)胞免疫熒光共定位檢驗(yàn)FNBP1在7702細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位及其與F-actin骨架的相關(guān)性;運(yùn)用特異性siRNA干擾7702細(xì)胞內(nèi)源FNB

2、P1的表達(dá)，于干擾初始、完全沉默和表達(dá)恢復(fù)等數(shù)個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀測(cè)7702細(xì)胞在形態(tài)、活力、增殖及周期等方面的改變。
　　結(jié)果:FNBP1在7702細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá);FNBP1定位于7702細(xì)胞皮層區(qū)，與F-actin有共定位關(guān)系;FNBP1表達(dá)沉默后，7702形態(tài)發(fā)生纖維狀改變，F(xiàn)NBP1表達(dá)恢復(fù)后7702形態(tài)逆轉(zhuǎn);FNBP1表達(dá)沉默后，7702增殖受到抑制，細(xì)胞周期在S期出現(xiàn)阻滯。
　　結(jié)論:細(xì)胞形態(tài)的轉(zhuǎn)變和逆轉(zhuǎn)變表明，F(xiàn)NBP1