禁食對氯仿染毒大鼠代謝和肝毒性影響的研究.pdf

1、目的:本課題擬通過不同劑量下氯仿經口給藥、腹腔注射以及吸入染毒,研究禁食對氯仿代謝和肝毒性影響,探討肝臟酶誘導的劑量依賴作用,為禁食對毒物在體內的毒性及代謝改變的研究提供理論和實踐上的參考.方法:選用8周齡Wistar雄性大鼠,正常喂養(yǎng)至10周齡時,隨機分為2組,每組65只,第一組(禁食組)整夜禁食,大鼠從實驗前一天下午16:00時禁食至實驗當天上午10:00時,期間僅喂水;第二組(喂養(yǎng)組)正常喂食.禁食對肝臟微粒體蛋白、CYP450含

2、量及體外氯仿代謝影響的測定:取禁食組和喂養(yǎng)組大鼠各5只,斷頭處死后切除肝臟,用磷酸緩沖溶液配置25％(w/v)肝組織勻漿,離心后測定GSH含量;其余部分進一步離心,并與緩沖液再次緩沖后按照Lowry方法測定其蛋白成份保存?zhèn)溆?微粒體蛋白含量和CYP450酶含量按照Omura方法進行分光光度測定.并用Sato和Nakajima平衡測定法,通過酶底物消失率的改變,定量體外氯仿代謝.氯仿給藥:取禁食組大鼠60只,隨機分為12個小組,1-4組分

3、別吸入0,50,100、500ppm氯仿氣體6小時,5-8和9-12組分別經口和腹腔注射給藥,給予0,100,200、400mg/kg氯仿,24小時后進行指標測定.喂養(yǎng)組60只大鼠同步操作,方法相同.給藥大鼠在實驗當天16:00時開始持續(xù)喂食、喂水.指標測定:從鼠尾采血20 μl,用Sato et al氣相色譜方法,測定血液中氯仿濃度.生物化學測定:用Ellman方法測定經氯仿染毒24小時后大鼠肝臟GSH含量,用速率法測定血清中GOT和