Ⅰ型單純皰疹病毒感染L-02細胞的比較蛋白質組學研究.pdf

1、Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV Ⅰ)主要誘發(fā)口咽部皰疹、角膜結膜炎和散發(fā)性腦炎，同時，臨床中亦發(fā)現(xiàn)HSV Ⅰ病毒還能導致新生兒、孕婦出現(xiàn)非嗜肝病毒性肝炎，加之HSV Ⅰ病毒在人群中的潛伏感染率很高，因此，HSV Ⅰ病毒在皰疹病毒研究領域一直是人們關注的焦點。 HSV Ⅰ病毒感染能導致一系列的細胞效應，尤其是宿主細胞蛋白質合成途徑在病毒侵入后出現(xiàn)明顯變化：mRNA被降解、轉錄被關閉、蛋白質被選擇性地降解或保持穩(wěn)定，甚至重新定義細胞蛋白功

2、能。由此，病毒感染和未感染細胞之間出現(xiàn)了蛋白表達譜的差異，而這些差異蛋白正是病毒感染細胞、細胞抵御病毒的具體執(zhí)行者。因此，尋找這些蛋白并探索它們之間的相互作用將對認識HSV Ⅰ病毒感染機制提供大量的研究線索。 本課題借助比較蛋白質組學的技術平臺，將HSV Ⅰ病毒感染的人正常肝細胞L-02與未感染細胞分別進行雙向電泳(2-DE)作蛋白質組圖，通過PDQuest軟件對蛋白點定性、定量分析，再利用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MA

3、LDI-TOF-MS)鑒定表達差異較為顯著的蛋白點。在所發(fā)現(xiàn)的差異蛋白中，RPLP1(acidic ribosomal phosphoprotein P1)形成mRNA翻譯所需的蛋白復合體、核不均一性核糖核蛋白H2(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2，hnRNPH2)正性調控mRNA剪切和加工、KH型剪切調控蛋自(KH-type splicingregulatory protein，KH

4、SRP)參與mRNA快速降解，它們都從不同角度調節(jié)細胞正常的蛋白質合成通路，但在HSV Ⅰ病毒感染情況下，細胞RPLP1和KHSRP蛋白呈現(xiàn)上調，而hnRNP H2則表現(xiàn)為下調，這一結果提示：病毒在利用細胞轉錄、翻譯調控因子關閉細胞蛋白質合成的同時又利用細胞蛋白合成途徑實現(xiàn)病毒蛋白的合成。盡管上述細胞蛋白的具體作用機制還有待于進一步研究，但本課題為探討病毒如何改變宿主蛋白合成途徑提供了很多新的線索。此外，2-DE發(fā)現(xiàn)新蛋白Unnamed