下調APC-Cdh1對Hela細胞周期的影響.pdf_第1頁
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1、華中科技大學碩士學位論文下調APCCdh1對Hela細胞周期的影響姓名：柳璐申請學位級別：碩士專業(yè)：麻醉學指導教師：張傳漢20080501華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文1下調下調APCCdh1對Hela細胞周期的影響細胞周期的影響華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院麻醉學教研室碩士研究生：柳璐指導老師：張傳漢教授中文摘要中文摘要目的目的細胞周期調控機制的紊亂導致細胞無限制地增殖是惡性腫瘤發(fā)生的主要機制之一。參與細胞周期調

2、控的因子有多種，Skp2為其中一種，它作為一種新的癌基因已成為人們日益關注的焦點。Skp2也是APCCdh1的關鍵底物之一。APCCdh1雖在細胞周期調控中發(fā)揮著重要作用，但下調APCCdh1是否引起增殖細胞凋亡及如何影響細胞周期，尚不確定。故本實驗構建Cdh1小干擾RNA載體，并將其轉染至Hela細胞中，對其表達進行鑒定，下調APCCdh1檢測相關蛋白Skp2的變化，并探討下調APCCdh1對Hela細胞周期的影響。方法方法1.Cdh

3、1小干擾RNA載體的構建及鑒定根據pENTRTMH1TO中間載體要求，設計Cdh1小干擾RNA載體的干擾序列及無干擾作用的對照序列，合成相應的DNA單鏈，退火后連接到pENTRTMH1TO線性載體，形成完整載體，進行測序鑒定。分別將測序鑒定成功的Cdh1小干擾RNA載體及對照載體采用脂質體法轉染Hela細胞，轉染后48h提取細胞總RNA及細胞總蛋白，采用實時定量PCR和Westernblot檢測Cdh1的表達。2.下調APCCdh1對H

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