雷公藤甲素改善壓力超負荷大鼠左心室重構(gòu)的實驗研究.pdf

1、背景： 充血性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是許多心血管疾病的最后共同通路，已日益成為威脅人類健康的重大公共健康問題。CHF的治療伴隨著對其病理生理機制認識的深入而不斷取得進展。目前已認識到心室重構(gòu)是心力衰竭發(fā)生的基本機制，近年來越來越多的研究資料顯示除了神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活以外，促炎癥細胞因子作為一種新型神經(jīng)體液因子在心室重構(gòu)的發(fā)展中可能發(fā)揮著重要的作用，它們可從多途徑(誘導(dǎo)心肌細胞肥大、

2、凋亡、壞死及調(diào)節(jié)心肌間質(zhì)重構(gòu))參與心衰及心室重構(gòu)的發(fā)生與發(fā)展。圍繞心力衰竭炎癥介質(zhì)激活進行的非特異性免疫調(diào)節(jié)干預(yù)已展示出良好的前景。雷公藤甲素(triptolide)作為一種非特異性免疫調(diào)節(jié)劑，不僅對炎癥介質(zhì)有廣泛的調(diào)節(jié)作用，而且可以抑制NF-kB的活化。 目的： 探討雷公藤甲素對壓力超負荷大鼠左心室重構(gòu)和心功能的影響，以及對外周血炎癥介質(zhì)表達的調(diào)節(jié)作用及其可能的作用機制。 方法： 采用腹主動脈縮窄壓力超

3、負荷大鼠模型，大鼠隨機分為五組：假手術(shù)組，模型對照組，雷公藤甲素低濃度組(6μg/kg.d)，雷公藤甲素中濃度組(9 μg/kg.d)，雷公藤甲素高濃度組(12μg/kg.d)，模型對照組及假手術(shù)組以生理鹽水干預(yù)，共干預(yù)八周。治療結(jié)束后采用超聲心動圖評價心臟結(jié)構(gòu)和功能，測定左室質(zhì)量指數(shù)(left—ventricular mass index，IVMI)，HE染色觀察光鏡下心肌細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)的變化，masson特殊染色測量心肌膠原容積分數(shù)

4、和心肌血管周圍膠原面積，免疫組織化學(xué)染色法檢測左心室I型膠原和Ⅲ型膠原的含量并計算它們的比值，ELISA法測定外周血中TNF-a、IL-6、IL-1、IL-10、MCP-1的含量，ELISA法檢測心肌組織NF-kbDNA結(jié)合活性及轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)果： 1.超聲心動圖顯示：與假手術(shù)組比較，模型對照組LVPWT與IVST均增加，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；LVEDD有下降的趨勢，未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；模型對照組較假手術(shù)組左

5、室射血分數(shù)下降，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。雷公藤甲素治療后與模型對照組相比，LVPWT、IVST和LVEDD均無明顯差異：左室射血分數(shù)升高，未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 2.模型對照組LVMI較假手術(shù)組增高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，雷公藤甲素治療后與模型對照組比較，LVMI有下降趨勢，未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 3.HE染色顯示：模型對照組較假手術(shù)組心肌細胞明顯肥大，心肌纖維排列紊亂，血管壁增厚，

6、炎癥細胞浸潤明顯增加，雷公藤甲素治療后炎癥細胞浸潤明顯減少(P<0.01)，其余無明顯變化。 4.Masson特殊染色法顯示：模型對照組較假手術(shù)組心肌膠原容積分數(shù)與心肌血管周圍膠原面積均明顯增加(．P<0.01)，雷公藤甲素治療后與模型對照組相比心肌膠原容積分數(shù)明顯下降(．P<0.01)，心肌血管周圍膠原面積有所減少，但未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。不同濃度藥物組之間無明顯差異(P>0.05)。 5.免疫組織化學(xué)染色

7、顯示：模型對照組較假手術(shù)組I型膠原和Ⅲ型膠原含量明顯增加(P均<0.01)，Ⅰ/Ⅲ膠原比例明顯增加(P<0.01)；雷公藤甲素治療后與模型對照組相比Ⅰ型膠原含量明顯降低(P<0.01)，Ⅲ型膠原含量明顯增加(P<0.01)，Ⅰ/Ⅲ膠原比例顯著減少(P<0.01)。不同濃度藥物組之間無明顯差異(P>0.05)。 6.模型對照組較假手術(shù)組IL-6含量升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，雷公藤甲素治療后可降低IL-6含量，低濃度組未達

8、到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，中、高濃度組均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；模型對照組較假手術(shù)組IL-1含量升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，雷公藤甲素治療后可降低IL-1含量，低濃度組未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，中、高濃度組均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模型對照組較假手術(shù)組TNF-a含量升高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，雷公藤甲素治療后可降低TNF-a含量，僅高濃度組有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；模型對照組較假手術(shù)組IL-1

9、0含量顯著下降(P<0.01)，雷公藤甲素治療后，低濃度組IL-10含量下降，未達到統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，中濃度組IL-10含量明顯下降(P<0.05)，高濃度組IL-10含量顯著下降(P<0.01)；模型對照組較假手術(shù)組MCP-1的含量無明顯變化(P>0.05)，雷公藤甲素治療后可明顯降低MCP-1的含量，三個濃度組均有顯著意義(P<0.01)，不同濃度藥物組之間無明顯差異(P>0.05)。 7.雷公藤甲素對心肌組織NF-kB活

10、性的影響：模型對照組較假手術(shù)組NF-kB的轉(zhuǎn)錄活性顯著增高，有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，雷公藤甲素治療后可降低NF-kB的轉(zhuǎn)錄活性，三組均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，三個用藥組之間無明顯差異(P>0.05)；模型對照組較假手術(shù)組NF-kB的DNA結(jié)合活性增高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，雷公藤甲素治療后NF-KB的DNA結(jié)合活性無明顯變化(P>0.05)。 結(jié)論： 雷公藤甲素對壓力超負荷大鼠外周血中炎性細胞因子