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文檔簡介
1、環(huán)境的變化與病原微生物的干擾將會不可避免地給機體的生殖細胞造成重要影響。據(jù)報道,男性不育癥的發(fā)病率正在逐年上升。因此,對生殖細胞的研究正引起人們的重視。脂多糖的致炎作用可影響生殖細胞的正常發(fā)育,對大鼠睪丸線粒體組分具有潛在毒性,誘導(dǎo)氧化應(yīng)激而導(dǎo)致睪丸生殖細胞的功能損害。Nucl-eostemin是與干細胞的增殖密切相關(guān)的重要因子,參與維持干細胞的增殖。它在細胞質(zhì)內(nèi)合成后轉(zhuǎn)位至細胞核,然后穿梭于核質(zhì)和核仁之間。GTP結(jié)合形式的Nucleo
2、stemin可錨定在核仁內(nèi),激活核仁的功能,促進細胞增殖。Nucleostemin不僅對生殖細胞的功能狀態(tài)的識別極有幫助,對于生殖細胞的損傷修復(fù)機制的研究也是十分重要的。Lin28a在機體發(fā)育過程中促進多種干細胞的生長,也可通過促進代謝而增加能量供給來促進多種組織的損傷后再生。
本研究運用腹腔內(nèi)注射低劑量脂多糖誘導(dǎo)并運用HE染色技術(shù)觀察成年雄性Sprague Dawley大鼠睪丸在不同時間點時的炎癥性損傷,運用免疫組織化學(xué)染色
3、技術(shù)和免疫印跡技術(shù)檢測和顯示Nucleostemin和Lin28a在生理鹽水處理對照組大鼠和4個時間點組—3h組、6h組、12h組和24h組—大鼠睪丸炎模型中的表達情況并運用統(tǒng)計軟件對各組Nucleostemin陽性率、Lin28a陽性率和Nucleostemin表達量進行計算(表示為均數(shù)±標準差)、“One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test”正態(tài)性檢驗和對照組與各實驗組的各變量的均數(shù)差異的“Independ
4、ent-Samples T Test”以探明Nucleostemin和Lin28a在大鼠正常和炎癥性生精小管中的表達模式,深化對生精上皮細胞的分型和功能狀態(tài)的理解和初步探索生精小管炎癥性損傷的可能的修復(fù)機制。
研究表明:1.腹腔內(nèi)注射低劑量脂多糖導(dǎo)致了大鼠睪丸生精上皮的輕度損傷和次級精母細胞的第二次減數(shù)分裂的阻抑;2.Nucleostemin主要表達于正常和炎癥生精上皮中的B型精原細胞、精母細胞和圓形精子細胞的核仁,Lin28
5、a表達于正常和炎癥生精上皮中的圓形精子細胞的細胞質(zhì)或細胞核(以核膜處最明顯),Nucleostemin和Lin28a共定位于圓形精子細胞的細胞核;與對照組相比,Nucleostemin和Lin28a在注射脂多糖后第3h、第6h和第12h時的表達水平均無顯著變化(P>0.05),在第24h時的表達水平均出現(xiàn)了顯著下降(P<0.05);3.Nucleostemin在對生精上皮細胞的類型的鑒別和對生精上皮細胞的增殖能力的判斷上均有一定的參考價
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