SDF-1在人正常和退變椎間盤中的表達(dá)、分布及意義.pdf

1、第一部分SDF-1在人正常和退變椎間盤中的表達(dá)、分布及意義
　　目的:通過比較人正常與退變椎間盤不同區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1（SDF-1）的表達(dá)差異來探明人椎間盤退變時相鄰部位可否形成SDF-1的表達(dá)梯度。
　　方法:獲取20例腰椎間盤突出癥患者的椎間盤（L4-5，病理證實為退變椎間盤組織），并納入退變組;7例急性腰椎爆裂性骨折患者的椎間盤(L3-4)，以及3例脊柱側(cè)彎患者的椎間盤（L2-3，病理證實為正常椎間盤組織），納

2、入正常組。HE染色觀察兩組椎間盤的組織學(xué)結(jié)構(gòu)，免疫組織化學(xué)、western-blot、rt-PCR檢測椎間盤中央?yún)^(qū)髓核、髓核與纖維環(huán)交界區(qū)、纖維環(huán)內(nèi)層、纖維環(huán)外層、軟骨終板五個部位的SDF-1表達(dá)情況及分布，并與供者年齡、Thompson分級作相關(guān)分析。
　　結(jié)果:正常組的上述五個部位SDF-1表達(dá):免疫組化積分光密度值分別為420.87±89.93、407.80±100.76、380.02±85.05、342.89±63.76、

3、344.06±88.97; western-blot灰度比值分別為0.08±0.03、0.08±0.05、0.07±0.04、0.05±0.03、0.05±0.02; rt-PCR灰度比值分別為0.22±0.06、0.22±0.05、0.20±0.04、0.20±0.04、0.20±0.04。退變組的五個部位SDF-1表達(dá):免疫組化積分光密度值分別為7355.13±2271.74、5959.58±2436.23、5397.49±3044

4、.80、1605.44±825.31、361.91±104.22; western-blot灰度比值分別為0.55±0.29、0.52±0.28、0.42±0.18、0.21±0.12、0.06±0.04;rt-PCR灰度比值分別為0.75±0.30、0.71±0.26、0.55±0.22、0.36±0.17、0.22±0.13。退變椎間盤五個部位的SDF-1表達(dá)均高于正常組(P＜0.05)，且SDF-1表達(dá):髓核＞纖維環(huán)內(nèi)層＞纖維環(huán)外

5、層＞軟骨終板，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，而中央?yún)^(qū)髓核和髓核與纖維環(huán)交界區(qū)統(tǒng)計學(xué)差異不顯著(P＞0.05);退變椎間盤五個部位的SDF-1的表達(dá)與Thompson分級、年齡呈正相關(guān)性(P＜0.05)。
　　結(jié)論: SDF-1廣泛表達(dá)于退變和正常的椎間盤中;其表達(dá)在退變的椎間盤中相鄰部位呈梯度分布。
　　第二部分軟骨素酶ABC誘導(dǎo)SD大鼠尾椎間盤退變的實驗研究
　　目的:通過向SD大鼠尾椎間盤注入軟骨素酶ABC建

6、立椎間盤退變的動物模型。
　　方法:隨機(jī)選用80只雄性SD大鼠，分為7天、30天造模組，將濃度為0.25unit/ml軟骨素酶ABC0.1ml，注入Co7-8椎間盤，Co6-7近端椎間盤不作處理作為對照。術(shù)后7天、30天行尾椎7.0T磁共振
　　(MRI)后，取標(biāo)本行HE染色，阿爾新藍(lán)染色，馬森三色以及Ⅱ型膠原和蛋白多糖免疫組織化學(xué)觀察椎間盤退變情況。
　　結(jié)果:軟骨素酶ABC注入后7、30天，HE染色，阿爾新藍(lán)染色，

7、馬森三色染色提示Co7-8椎間盤均出現(xiàn)了明顯退變，MRI顯示T2值較Co6-7椎間盤均出現(xiàn)明顯降低(P＜0.05)，而7天、30天Co7-8椎間盤T2值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); Co7-8椎間盤Ⅱ型膠原和蛋白多糖免疫組織化學(xué)積分光密度值較Co6-7椎間盤均出現(xiàn)明顯降低(P＜0.05)，7天、30天Co7-8椎間盤Ⅱ型膠原和蛋白多糖免疫組織化學(xué)積分光密度值差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:軟骨酶素ABC