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文檔簡介
1、目的:使用生物素葡聚糖胺(BDA)示蹤觀察大鼠脊髓損傷下行傳導(dǎo)通路的改變。
方法:采用清潔雌性SD大鼠28只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)對照組(6只)和脊髓腹側(cè)損傷15g、30g、50g3個(gè)小組(每組6-8只),使用標(biāo)準(zhǔn)化脊髓損傷動物模型實(shí)驗(yàn)裝置制備動物模型,損傷部位選擇在T10~T11水平壓迫脊髓腹側(cè),對照組大鼠僅咬除棘突和椎板,不損傷脊髓。術(shù)后12小時(shí)、96小時(shí),采用改良的Tarlov分級評分、斜板實(shí)驗(yàn)及BBB評分評價(jià)實(shí)驗(yàn)動物的運(yùn)動
2、功能,所有大鼠立體定向開顱,BDA注射于大腦皮層。BDA注射2周后取出損傷節(jié)段以下脊髓組織,行BDA染色成像。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法根據(jù)所得數(shù)據(jù)方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果采用雙因素方差分析或秩和檢驗(yàn)。
結(jié)果:BDA神經(jīng)示蹤經(jīng)過免疫組化顯色后BDA陽性的神經(jīng)元呈棕褐色深染,且隨著損傷外力的加大,陽性神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,脊髓損傷組較對照組相比大鼠T12~L1平面平均積分光密度IOD明顯降低,有顯著性差異。脊髓損傷組大鼠改良的Tarlov分級評分、斜
3、板實(shí)驗(yàn)及BBB評分均明顯低于對照組(p<0.05);增加砝碼質(zhì)量,腹側(cè)損傷組大鼠受到的向上提拉的力量增大,雙下肢改良的Tarlov分級評分逐漸下降,大鼠斜板實(shí)驗(yàn)臨界角逐漸下降,BBB評分呈降低趨勢。
結(jié)論:(1)BDA神經(jīng)示蹤可以良好的顯示大鼠脊髓損傷神經(jīng)通路上神經(jīng)元的變化。從而為脊髓損傷及修復(fù)過程中神經(jīng)通路改變提供可靠的形態(tài)學(xué)依據(jù);(2)改良BDA的注射和染色技術(shù),可以有效的避免BDA的漏損,提高顯像質(zhì)量;(3)脊髓腹側(cè)
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