乳酸菌胞外多糖生物合成及提高免疫力的研究.pdf

1、本研究主要內(nèi)容為高產(chǎn)胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)乳酸菌的篩選、培養(yǎng)基的確定、培養(yǎng)條件的優(yōu)化及乳酸菌胞外多糖在增強(qiáng)免疫功能方面的作用。另外，利用干酪在加工過(guò)程中的副產(chǎn)物乳清來(lái)合成胞外多糖。 以發(fā)酵乳制品、酸菜、泡菜等為樣品，進(jìn)行了乳酸菌菌種的活化、分離、純化，共分離到乳酸菌20株。對(duì)分離到的乳酸菌進(jìn)行胞外多糖高產(chǎn)菌株的篩選，結(jié)果篩選出植物乳桿菌為高產(chǎn)EPS的乳酸菌。 根據(jù)多糖的產(chǎn)量，從MRS、AT

2、P、SL、Eiller培養(yǎng)基中選擇高產(chǎn)胞外多糖的Eiller培養(yǎng)基作為植物乳桿菌合成EPS的基本培養(yǎng)基。并對(duì)碳源、氮源、鹽等對(duì)該菌株EPS生物合成的影響進(jìn)行了研究。從而開(kāi)發(fā)出用于植物乳桿菌EPS生物合成研究的新型合成培養(yǎng)基(命名為E1)，該培養(yǎng)基的組成為：普通蛋白胨13.3g、蔗糖13.3g、葡萄糖13.3g、酵母提取物5.0g、氯化鈉4.0g、明膠2.5g、乙酸鈉1.5g、抗壞血酸0.5g、去離子水1000mL。 選擇適當(dāng)?shù)呐?/p>

3、養(yǎng)條件，根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)L9(34)正交試驗(yàn)，確定最佳發(fā)酵條件為：初始pH為5.2，45℃發(fā)酵22h，。粗多糖含量為881.90mg/L。 經(jīng)提取的粗多糖，依次經(jīng)DEAE-52纖維素層析和SephadexG-100凝膠層析分離，樣品濃度10mg/ml，上樣量為3ml，流速15ml/h，3ml/管分部收集，用凝膠柱層析法測(cè)得EPS I的平均分子量為EPS I的分子量為1.5×105，EPS H的分子量為1.1×104。

4、 急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，植物乳桿菌EPS安全無(wú)毒。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與NS組相比，多糖組可以顯著提高小鼠脾臟、胸腺的重量和吞噬指數(shù)(P<0.05或P<0.01)，表明EPS可以促進(jìn)非特異性免疫功能；粗多糖高劑量組可以可使小鼠足跖腫脹度明顯增加，差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)，表明EPS對(duì)小鼠的細(xì)胞免疫功能有促進(jìn)作用；純多糖高劑量組和粗多糖高、低劑量組可以顯著的降低小鼠的血清溶血值(P<0.05或P<0.01)，表明EPS可增