SH-SY5Y細(xì)胞交叉污染的鑒定.pdf

1、在以細(xì)胞系為研究模型的正常生理、腫瘤病理及藥物研發(fā)領(lǐng)域，有效數(shù)據(jù)的獲得常常依賴(lài)于正確細(xì)胞系的選擇。近些年來(lái)細(xì)胞系交叉污染和錯(cuò)誤鑒定的案例時(shí)有報(bào)道；細(xì)胞系污染不僅將產(chǎn)生無(wú)效數(shù)據(jù)，也會(huì)對(duì)后續(xù)研究造成極大影響，必須引起重視。在研究物種間水平基因轉(zhuǎn)移的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，小鼠基因組DNA探針雜交到本室的人SH-SY5Y基因組DNA上時(shí)出現(xiàn)很強(qiáng)的雜交信號(hào)，推測(cè)該株細(xì)胞中含有大量的小鼠細(xì)胞。本研究課題分別利用PCR擴(kuò)增、基因文庫(kù)克隆、染色體計(jì)數(shù)、細(xì)胞形態(tài)觀(guān)

2、察、southerndotblot、STR指紋圖譜技術(shù)分析從不同實(shí)驗(yàn)室收集到的7株SH-SY5Y細(xì)胞或DNA樣本的物種屬性。研究結(jié)果表明，SH-SY5Y細(xì)胞系污染不是個(gè)例，7株SH-SY5Y細(xì)胞系中僅有3株細(xì)胞是真正的SH-SY5Y細(xì)胞，而另外4株細(xì)胞基本為小鼠細(xì)胞，提示在各實(shí)驗(yàn)室使用的SH-SY5Y細(xì)胞可能存在相當(dāng)程度的污染或錯(cuò)誤標(biāo)記。另外，研究還提示，如果只是鑒定小鼠細(xì)胞污染的存在，DNA雜交結(jié)合部分片段PCR或測(cè)序，將是一個(gè)比較經(jīng)