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文檔簡介
1、福建醫(yī)科大學碩士學位論文MithramycinA對大腸癌細胞株骨橋蛋白OPN、轉錄因子Sp1表達影響的實驗研究姓名:黃旭申請學位級別:碩士專業(yè):病理學與病理生理學指導教師:張聲20081201TheexperimentalstudiesofeffectsofMithramycinAontheexpressionofosteopontin、SplinthecolonrectalcarcinomacellsABSTRACTobjective
2、:ToexploretheexpressionoftranscriptionfactorSplandosteopontin(OPN)inthecolorectalcarcinomacelllines(SW480andSW620)wi也differentmetastaticpotential,WetreatthelineswiththemithramycinA(MIT,aSplinhibitor),andobservecellcultur
3、es’growth,exploretheinfluencesofOPNexpressionTheaimofthisstudyistodetecttheeffectsofSplandOPNonproliferationandmetastasisofthecolorectalcancerwhethertranscriptionfactorSplcouldbeaneffectivetherapeutictargetforhumancolore
4、ctalcancelMethods:TakenestablishedhumancolorectalcancercelllinesSW480andSW620invitroasresearchobject,RealtimePCR,Western—blotmethodsandcellularimmunofluorescencetechniquewereusedtodetecttheSpl、OPNexpressionatgeneleveland
5、proteinexpressionlevelbeforeandaftertreatmentwimMithramycinA,separatelyCellgrowthcurvewasusedtoassesstheinhibitoryeffectoftreatmentwitllMithramycinAoncellproliferationThemigrationpotentialofcancercells嘶thdifferenttreatme
6、ntswasanalyzedbythewoundhealingassayrespectivelyTheproductionofmatrixmetalloproteinases(MMPs)ofSW480andSW620celllinesweremeasuredbygelatinzymogrambeforeandaRertreatmentwithMithramycinAResults:RealtimePCRresultsshowedSW48
7、0(DukesBstage)andSW620(DukesCstage)hadSplandOPNexpression;Western—blotalsoshowedtheexpressionofSplandOPNproteinexistedinbothcelllinesThelevelofSplandOPNexpressionincelllineSW620WashigherthaninSW480(P005);aftertreated、^,i
8、mMithramycinA(010肛M,),thelowlevelofSplandOPNexpressioninbothlineswerevalidatedbyRealtimePCR,westernblottinganalysisandcellularimmunofluorescencetechnique(P005);Cellgrowthcurveshowedtheproliferationdecreasedaftertreatment
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