siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin-3蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、廣州廣州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文碩士研究生學(xué)位論文siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin3蛋白表達(dá)的研究ThestudiesofThestudiesofinterferencestointerferencestothetheexpressionofcoloncancercelllineexpressionofcoloncancercellline’sgalectingalectin3proteinbyproteinbysi

2、RNAsiRNA專業(yè)名稱：腫瘤學(xué)學(xué)位申請(qǐng)人：黃青導(dǎo)師：黃健清副主任醫(yī)師導(dǎo)師單位：廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院二O一三年五月siRNA干擾大腸癌細(xì)胞株galectin3蛋白表達(dá)的研究研究生：黃青導(dǎo)師：黃健清副主任醫(yī)師中文摘要中文摘要研究背景：研究背景：SmallinterferingRNA(siRNA)是一種長(zhǎng)度為2125核苷酸的小RNA分子，由Dicer（RNAaseⅢ家族中對(duì)雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成，其是siRISC的主要成員，

3、可激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默。本課題前期的研究顯示：免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)到半乳糖凝集素3（galectin3）蛋白在II期大腸癌的實(shí)體瘤標(biāo)本中呈現(xiàn)一種高表達(dá)的趨勢(shì)，與癌旁組織相比，具有顯著性差異；且在隨后的大腸癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，低分子柑橘果膠（LowmolecularweightcitruspectinLCP）奧沙利鉑聯(lián)合組較奧沙利鉑單藥組可增加大腸癌細(xì)胞HCT116、HT29的細(xì)胞凋亡，聯(lián)合組和單藥組差異具有顯著意義；此外，在小

4、鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的研究中還發(fā)現(xiàn)：ELISA方法檢測(cè)顯示Galectin3在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移中呈高水平表達(dá)，與陰性對(duì)照組相比，差異具有顯著意義（P0.05）且LCP能明顯抑制結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。本次實(shí)驗(yàn)旨在通過對(duì)大腸癌細(xì)胞株中的galectin3蛋白進(jìn)行干擾來進(jìn)一步地證實(shí)galectin3蛋白在大腸癌治療中的作用同時(shí)也為大腸癌的靶向治療提供一定的積極的理論基礎(chǔ)。方法：方法：1.1.五種大腸癌細(xì)胞株五種大腸癌細(xì)胞株HCT116HCT116、H

5、T29HT29、SW116SW116、SW480SW480和SW620SW620的培養(yǎng)：的培養(yǎng)：1.1用含10%胎牛血清的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液，在37攝氏度、5%CO2的培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)五種大腸癌細(xì)胞株HCT116、HT29、SW116、SW480和SW620，每23天換液一次，待該貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至80%密度時(shí)進(jìn)行傳代，傳代23次后選擇狀態(tài)較好的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)；1.2將上述對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)狀態(tài)較好的大腸癌細(xì)胞株進(jìn)行離心收集，然后向