水產(chǎn)品中致病性副溶血性弧菌的檢測.pdf

1、副溶血性弧菌是食物中毒的重要病原菌。環(huán)境中95％的副溶血性弧菌為非致病菌，5％為致病菌。判斷水產(chǎn)品的食用合格性需要準(zhǔn)確鑒定5％的致病菌。神奈川溶血反應(yīng)曾作為致病性判定的標(biāo)準(zhǔn)，但該試驗(yàn)操作繁瑣，易產(chǎn)生假陽性。耐熱性溶血毒素作為副溶血性弧菌致病性的主要毒力因子，可由tdh基因的檢出來判斷菌株的致病性。該方法尚未在國內(nèi)進(jìn)行應(yīng)用。本研究建立了一個以16SrDNA序列分析鑒定副溶血性弧菌，以tdh基因測定的PCR和實(shí)時熒光定量PCR反應(yīng)體系定量反

2、映副溶血性弧菌致病性的方法，并與神奈川溶血反應(yīng)，脲酶反應(yīng)進(jìn)行比較。使用16SrDNA分析臨床分離的181株常見菌作為對照，對39株副溶血性弧菌進(jìn)行測定；36/39株副溶血性弧菌的鑒定結(jié)果與生化培養(yǎng)法相符，對臨床分離菌株均無誤判。對97株腹瀉患者來源和75株環(huán)境來源分離的副溶血性弧菌進(jìn)行tdh基因測定，神奈川溶血反應(yīng)和脲酶反應(yīng)。腹瀉患者和環(huán)境來源菌株的tdh基因檢出率有顯著差異（83.51％vs13.70％，P<0.001）。神奈川溶血反