吳茱萸堿抑制人骨肉瘤細胞143B增殖與PI3K-Akt信號關系的研究.pdf

1、骨肉瘤是臨床上最為常見的骨組織惡性腫瘤，多種抗腫瘤藥物的聯合應用治療骨肉瘤已經被引入臨床超過40年，但是，仍有超過80％的早期局限性骨肉瘤的患者會全身轉移。因此，非常有必要尋求一種新型更加有效的方式來治療骨肉瘤。
　　本實驗小組通過結晶紫染色和定量分析、Western blot、PCR、Annexin V-EGFP染色以及流式細胞儀分析發(fā)現：EVO既能顯著地抑制143B細胞的增殖，又能誘導143B細胞的凋亡，并且呈現出了濃度依賴性

2、和時間依賴性；我們在裸鼠上建立了異位成瘤模型，從取出的大體標本看出，EVO實驗組與對照組相比較，EVO能明顯減小瘤塊的體積與重量。H&E染色與免疫組織化學染色結果均顯示，EVO能呈現濃度依賴性的提高骨肉瘤細胞的壞死率。
　　通過Western blot和PCR實驗，我們證實了相對于對照組，EVO實驗組能呈濃度依賴性的提高PTEN在143B細胞中的表達。結晶紫實驗結果顯示，外源性的PTEN能夠增強EVO對于143B的增殖抑制作用，沉

3、默PTEN能夠逆轉EVO對于143B的增殖抑制。此外，PTEN抑制劑（VO-Ohpic）同樣能夠逆轉EVO對于143B的增殖抑制作用。結果提示，PTEN基因參與了EVO對于骨肉瘤的增殖抑制作用
　　本實驗通過給予外源性的Ad-PTEN，siAd-PTEN以及Western blot蛋白功能鑒定，分析了PTEN在EVO對人骨肉瘤細胞143B的增殖抑制作用中與PI3K/Akt的相互關系。結果發(fā)現，EVO呈濃度依賴性抑制磷酸化Akt（p